体内遗传标记成团肠杆菌固氮质粒pEA9

用卡那霉素抗性（Kanr）基因对成团肠杆菌固氮质粒pEA9进行活体遗传标记。将来自质粒pEA9的3.0kb片段（nif ENX）克隆到pBR322载体中,再将卡那霉素抗性（Kanr）基因插入到3.0kb的片段中,构建成供体质粒pST5。将该质粒转化到含有待标记质粒pEA9的E.a.339菌株中,然后在AP培养基中消除供体质粒,筛选得到40个失去了pST5并保持卡那霉素抗性的克隆,分析表明它们不是质粒pEA9和pST5的共整合体,而是卡那霉素抗性基因通过两个质粒在nifENX区域内的DNA间的同源重组整合到了质粒pEA9上。

活体(in vivo)遗传标记成团肠杆菌(Enterobacter agglo merans 339)固氮质粒pEA9

作者用卡那霉素抗性 (Kanr)基因对成团肠杆菌固氮质粒 pEA9进行活体遗传标记 .将来自质粒 pEA9的 3.0kb片段 (nifENX)克隆到 pBR32 2载体中 ,再将卡那霉素抗性(Kanr)基因插入到 3.0kb的片段中 ,构建成供体质粒 pST5.将该质粒转化到含有待标记质粒pEA9的E .a .339菌株中 ,然后在AP培养基中消除供体质粒 ,筛选得到 4 0个失去了 pST5并保持卡那霉素抗性的克隆 ,分析表明它们不是质粒 pEA9和 pST5的共整合体 ,而是卡那霉素抗性基因通过两个质粒在nifENX区域内的DNA同源重组整合到了质粒 pEA9上 .