METTL3在同型半胱氨酸诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用

背景:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症与胰岛β细胞功能密切相关,但其具体分子机制尚不完全明确。目的:探讨METTL3在Hcy诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用。方法:取第3,4代小鼠胰岛β细胞进行实验。①细胞模型建立和分组:对照组细胞不加入Hcy,Hcy组细胞加入浓度为100µmol/L Hcy干预48h;②按Lipofectamine^(TM) 2000说明书将过表达质粒Ad-METTL3及si-METTL3转染小鼠胰岛β细胞,设计3种不同干扰片段,PCR验证、筛选出干扰效率最好的干扰片段;③转染后实验分组:对照组、Hcy组、Ad-NC(阴性对照)+Hcy组、Ad-METTL3+Hcy组、si-NC(阴性对照)+Hcy组和si-METTL3+Hcy组;④采用qRT-PCR及Western blot检测细胞中METTL3及细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达;ELISA法测定胰岛素水平来评价胰岛β细胞胰岛素分泌能力;分别过表达和干扰METTL3后检测细胞自噬相关蛋白及胰岛素水平。结果与结论:①与对照组相比,Hcy组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平升高(P<0.05),而p62表达明显降低(P<0.05),胰岛素分泌能力明显下降(P<0.05);②与对照组相比,Hcy组中METTL3蛋白及mRNA水平表达均降低(P<0.05);③胰岛β细胞中沉默METTL3后,Hcy进一步上调了细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ的表达(P<0.05),而p62表达显著下降(P<0.05),细胞中胰岛素水平增加(P<0.05);过表达METTL3后,Hcy则使LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著降低且p62表达则增高(P<0.05);④结论:METTL3参与了Hcy诱导的胰岛β细胞自噬调控,对胰岛素的分泌发挥着调控作用。

特异性lncSLC25a6在同型半胱氨酸诱导的大鼠心肌细胞铜死亡中的作用

目的:探讨特异性长链非编码RNA SLC25a6(long noncoding RNA SLC25a6,lncSLC25a6)在同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的心肌细胞铜死亡中作用。方法:体外培养大鼠心肌细胞并分为对照(control)与Hcy组,干预细胞48 h后,采用Western blot及免疫荧光染色方法检测铜死亡相关蛋白铁氧还蛋白1(ferredoxin 1,FDX1)、热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)等的表达水平;利用荧光染色检测心肌细胞氧化应激状态;采用铜离子试剂盒测定心肌细胞内Cu^(2+)水平;进一步将lncSLC25a6过表达后,分析Hcy对心肌细胞铜死亡相关蛋白表达的影响。结果:与control组相比,80μmol/L Hcy显著加速了心肌细胞损伤,且lncSLC25a6呈低表达(P<0.05)。Western blot检测结果显示:与control组相比,Hcy干预组FDX1表达水平明显降低(P<0.05),而HSP70表达水平明显增高(P<0.05),且Hcy组心肌细胞铜离子表达水平增高(P<0.05)。免疫荧光染色发现,Hcy组FDX1荧光强度明显减弱,HSP70的荧光强度明显增强;进一步过表达lncSLC25a6后,Hcy诱导的心肌细胞铜死亡显著缓解,细胞铜死亡相关蛋白FDX1呈高表达,HSP70呈低表达(P<0.05)。Pearson相关性分析发现,lncSLC25a6的表达水平与FDX1蛋白表达呈负相关(r=−0.676,P=0.046),而与HSP70表达则呈正相关(r=0.680,P=0.044)。结论:lncSLC25a6可显著缓解Hcy诱导的心肌细胞铜死亡,可作为Hcy诱导心肌损伤的潜在治疗靶点。

高同型半胱氨酸经TRPC6/NF-κB诱导肾小球足细胞铁死亡的机制

目的探讨TRPC6/NF-κB在高同型半胱氨酸(Hcy)介导下诱导肾小球足细胞铁死亡的机制。方法对小鼠肾脏足细胞进行体外培养,将其分成对照组(0μmol/LHcy)和Hcy组(80μmol/LHcy),干预细胞48 h后,采用Western blot检测GPX4、SLC7A11铁死亡相关蛋白以及TRPC6、NFκb蛋白表达情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与免疫荧光检测TRPC6的表达水平;通过流式细胞术检测足细胞凋亡率;采用丙二醛(MDA)试剂盒测定细胞内MDA活性水平。转染TRPC6干扰片段及TRPC6阴性对照(NC)后qRT-PCR分组为Control、si-NC及si-TRPC6(si-TRPC6-1、si-TRPC6-2、si-TRPC6-3),Western blot分组为Control、Hcy、si-NC+Hcy、si-TRPC6+Hcy,采用qRT-PCR检测TRPC6 mRNA的表达;采用Western blot检测GPX4、SLC7A11、NF-κb及TRPC6的表达水平;采用流式细胞术检测干扰后足细胞凋亡水平。结果(1)与Control组相比,Hcy组中铁死亡相关蛋白GPX4、SLC7A11表达水平减低,凋亡水平增加(P<0.05);(2)与Control组相比,Hcy组TRPC6蛋白、mRNA水平及免疫荧光表达均增加,MDA水平增高,NF-κb信号通路蛋白表达增加,两组间比较均差异有统计学意义(P<0.05);(3)与si-NC组相对比,si-TRPC6(si-TRPC6-1、si-TRPC6-2、si-TRPC6-3)组中TRPC6的mRNA表达水平降低,其中si-TRPC6-3干扰效果最佳(P<0.05);转染TRPC6NC与TRPC6干扰片段并给予Hcy干预后,与Hcy组相比,si-NC+Hcy组GPX4、SLC7A11、NFκb、TRPC6表达无差异;与si-NC+Hcy组相比,si-TRPC6+Hcy组中铁死亡相关蛋白:GPX4、SLC7A11表达增高,NFκb、TRPC6表达降低,凋亡率降低(P<0.05)。结论本研究证实了在Hcy作用下TRPC6/NFκb可以调控肾足细胞铁死亡,是导致肾损伤的机制之一。

冠心病经皮冠状动脉介入治疗病人疾病感知研究的范围综述

目的:对国内外冠心病经皮冠状动脉介入治疗病人疾病感知相关研究进行描述、分析,为后续研究提供依据。方法:以Arksey提出的研究方法为框架,检索PubMed、Web of Science、Embase、中国知网、维普数据库等,提取该人群疾病感知相关文献,对文献内容进行筛选、讨论和总结,检索时间为建库至2023年5月8日。结果:最终纳入34篇文献,21篇有关疾病感知对病人影响的研究;2篇有关疾病感知影响因素的研究;4篇涉及评估工具;7篇为随机对照试验。结论:疾病感知在冠心病经皮冠状动脉介入治疗病人健康结局中具有关键地位,护理领域应重视疾病感知对冠心病经皮冠状动脉介入治疗病人的影响,积极研发特异评估工具,探索相关理论框架并制订干预方案,促进病人早期康复。

使用支撑面预防压力性损伤的证据总结

目的通过系统的检索、评价及总结长期卧床患者支撑面使用的相关证据,为临床长期卧床患者体位管理提供依据。方法按照自上而下的原则在国内外数据库中检索关于使用支撑面预防压力性损伤的文献,文献类型包括临床决策、最佳实践、指南、专家共识、系统评价、证据总结等,检索时间为建库至2023年7月20日。结果纳入13篇文献,其中临床决策2篇、指南4篇、系统评价5篇、证据总结2篇。最终从患者评估、支撑面选择、支撑面摆放、注意事项4个方面汇总了30条最佳证据。结论该研究总结了对于不同患者,各功能、材质、形状及表面覆盖物的支撑面使用策略,建议临床护理人员熟知各类型支撑面的功能及用法,通过评估给予不同患者相应支撑面及摆放位置,从而有效预防压力性损伤的发生,提升患者舒适度。

慢性心力衰竭患者家庭复原力的研究进展

文章综述了家庭复原力的概念、来源以及测评工具,总结慢性心力衰竭患者家庭复原力的影响因素及干预策略,为制定基于家庭复原力理论框架的干预方案提供理论依据。

LncRNA H19调控肾小球足细胞焦亡中作用

目的探讨lncRNA H19在高糖调控肾小球足细胞焦亡中的作用。方法qRT-PCR方法检测高糖中lncRNA H19本底表达;Western blot检测高糖中肾足细胞结构性相关蛋白Nephrin、Podocin表达;Western blot及免疫荧光方法检测细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达水平;qRT-PCR检测转染Ad lncRNA H19及si lncRNA H19后lncRNA H19的mRNA表达,细胞转染分别设置:(1)对照组(不做处理)、lncRNA H19过表达阴性对照组、lncRNA H19过表达组;(2)对照组(不做处理)、lncRNA H19干扰阴性对照组和lncRNA H19干扰组(si-lncRNA H19-1、si-lncRNA H19-2、si-lncRNA H19-3);Western blot检测转染Ad lncRNA H19及si lncRNA H19后NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平,细胞转染分别设置:(1)对照组(不做处理)、高糖组、lncRNA H19过表达对照+高糖组、lncRNA H19过表达+高糖组;(2)对照组(不做处理)、高糖组、lncRNA H19干扰对照+高糖组、lncRNA H19干扰+高糖组。结果(1)与对照组(不做处理)相比,lncRNA H19在高糖诱导肾足细胞损伤过程中呈低表达(P<0.05),而lncRNA H19低表达可调控细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达增高(P<0.05),lncRNA H19表达与细胞焦亡相关蛋白表达两者呈负相关;(2)与对照组(不做处理)相比,在高糖诱导肾足细胞损伤过程中,肾足细胞结构蛋白Nephrin、Podocin表达水平降低(P<0.05);(3)与lncRNA H19过表达对照+高糖组相比,过表达lncRNA H19后,缓解高糖诱导肾足细胞焦亡,细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β呈低表达(P<0.05);(4)与lncRNA H19干扰对照+高糖组相比,干扰lncRNA H19后,促进高糖诱导足细胞焦亡,而焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β呈高表达(P<0.05)。结论在高糖诱导足细胞焦亡过程中lncRNA H19具有可调控细胞焦亡相关蛋白表达,为未来治疗糖尿病肾病提供一定的理论依据。

山东省城镇化质量时空演变及障碍度分析

从人口城镇化、经济城镇化、社会城镇化、空间城镇化、生态城镇化5个方面构建城镇化质量指标体系,采用熵值法确定指标权重,对山东省2011—2020年的城镇化质量进行了综合测度,利用Arc—GIS软件对山东省城镇化质量发展的时空特征进行了分析,最后引入障碍度模型,用以研究影响山东省城镇化质量的障碍因素。结果表明:(1)从省级尺度城镇化质量时序变化来看,2011—2020年山东省城镇化质量总体呈上升趋势,子系统层面的城市化质量多年平均值为:社会城镇化>空间城镇化>人口城镇化>经济城镇化>生态城镇化。(2)从市级尺度城镇化质量空间演变来看,2011—2020年山东省各地区城镇化质量持续提高,内部差异逐步缩小,逐渐形成以济南和青岛为“双核心”的区域聚集发展格局和“东高西低”的城镇化质量格局。(3)从山东省城镇化质量障碍度分析来看,建成区面积(C_(11))、每万人高等学校在校学生数(C_(9))、社会消费品零售总额(C_(7))是影响山东省城镇化质量的主要障碍因子,并依此提出相应对策建议。

miR-488-3p靶向调控RAP1A在同型半胱氨酸介导肝细胞自噬的作用研究

目的探讨微小RNA(miR-488-3p)通过靶向调控RAS癌基因家族成员RAP1A在同型半胱氨酸介导肝细胞自噬中的作用。方法体外常规培养人正常肝细胞(HL-7702),并给予100μmol/L Hcy干预24 h,采用Western blot检测肝细胞自噬相关蛋白LC3、p62和RAP1A的表达水平,qRT-PCR检测肝细胞中miR-488-3p和RAP1A的表达;转染miR-488-3p inhibitor和mimics后,qRT-PCR和Western blot分别检测miR-488-3p的转染效率及其对LC3和p62蛋白表达的影响;TargetScan预测miR-488-3p与RAP1A基因相关性,Western blot检测miR-488-3p下游潜在靶蛋白(RAP1A)的表达改变;Pearson相关系数对肝细胞中miR-488-3p表达水平与自噬相关蛋白水平进行相关性分析。结果与Control组相比,Hcy组肝细胞自噬相关蛋白LC3、RAP1A和miR-488-3p的表达水平升高(P<0.01),而p62表达明显降低(P<0.01);同时,转染miR-488-3p inhibitor和mimics后,与NC-inhibitor组比较,miR-488-3p inhibitor组中LC3和RAP1A蛋白的表达水平显著降低(P<0.01),p62表达明显升高(P<0.01);而与NC-mimics组相比,miR-488-3p mimics组中LC3和RAP1A蛋白表达水平明显增加(P<0.01),p62表达降低(P<0.01);进一步机制研究表明RAP1A是miR-488-3p的下游靶基因并受其正向调控。Pearson相关性分析发现,miR-488-3p的表达水平与LC3(r=0.9329,P=0.0002)蛋白表达呈正相关,而与p62(r=-0.8086,P=0.0083)表达则呈负相关。结论miR-488-3p在Hcy介导的肝细胞中高表达,可通过靶向调控RAP1A的表达促进肝细胞自噬。

跳出专业视阈谈大学物理课与微积分的糅合教学

针对学生对微积分在物理教学中运用较差、造成物理学习困难的问题,明晰物理教学内容与微积分的关联度,以及学生对微积分掌握运用的实际状况,提出将大学物理与高等数学微积分再学习的融合.以此促进教师教育观念的转变,加强对协同教育的拓展理解,提升学生对物理及微积分知识的学习效果.教学实践对比结果表明,糅合教学后,教师的教学观念逐渐由教书任务向人才培养转变;对比上届同专业试卷,微积分部分得分率提升28%.

心室复极空间不一致性表示方法的探讨

本文采用二次样条小波变换提取心电信号的特征点 ,从羊心脏表面 6 4通道的心电信号中 ,提取各通道的QT间隔和兴奋恢复间隔 (ARI) ,分别求出二者以极差法、标准差法和变异系数定义的离散度 ,通过统计检验P值 ,比较三种方法定义的QT和ARI离散度在心肌缺血前后的变化 .发现三种定义的QT离散度 ,在心肌缺血前后都不具有显著性差异 ,并以变异系数离散度的P值最大 .而心肌缺血使得ARI离散度明显增加 ,三种定义的ART离散度在心肌缺血前后都具有显著性差异 ,以变异系数离散度的P为最小 ,可见三种方法定义的离散度均有效 ,而变异系数离散度较极差法。

基于主成分分析法识别不同产地防风和黄芩

在中草药现代化的进程中,识别不同产地的中草药对于中医药的发展十分重要。利用傅里叶变换红外光谱仪测量不同产地黄芩和防风的红外光谱,选取指纹特征区域400~3500 cm^-1的红外光谱,经过预处理、归一化建立基于主成分分析的识别模型。结果表明,防风中三个主成分能代表99.99%的指纹区变量信息,黄芩中三个主成分能代表99.70%的指纹区变量信息。样本在主成分及主成分得分值空间中的分布情况,不仅实现了对不同产地防风、黄芩的识别,还可以通过样本的分布疏密度反映样本的亲缘关系。基于主成分分析原理建立的数学模型可以高效地识别不同产地防风和黄芩,为中草药鉴别提供了有效的参考。

沟通在专业健康照护者实施安宁疗护中的作用及研究进展

以医护人员为主的专业健康照护者与患者及家属的沟通在安宁疗护中发挥着重要作用。有效的医患沟通可以引导终末期患者及其家属树立正确的医疗观,减少过度医疗,改善终末期患者生活质量。简述了安宁疗护相关沟通语境、安宁疗护中沟通主体及沟通现状,分析出以医护人员为主的专业健康照护者在安宁疗护的诊断和临终关怀的沟通语境中所遇到的问题及挑战,并对制定有效的沟通措施作了展望。

高铁酸钾氧化降解间甲酚的动力学分析

以焦化废水中典型污染物间甲酚为对象,采用烧杯实验,确定水溶液中高铁酸钾〔Fe(Ⅵ)〕氧化降解间甲酚的最佳反应条件,并建立化学反应动力学模型。实验结果表明,当Fe(Ⅵ)和间甲酚的物质的量比为8,溶液pH=9,温度为14℃时,反应180 s后间甲酚的去除率为91.84%。前30 s的反应过程符合准一级反应动力学模型,反应速率常数k=0.062 7,磷酸盐会抑制Fe(Ⅵ)对间甲酚的氧化降解。

Fe(Ⅱ)、Fe(Ⅲ)和Fe(Ⅵ)活化过硫酸盐氧化降解水中的菲

分别采用Fe(Ⅱ)、Fe(Ⅲ)和Fe(Ⅵ)活化过硫酸盐(PS)氧化降解水中的菲,考察了反应pH、药剂投加量及氧化时间等因素的影响,并对比了不同价态铁活化PS对菲的氧化降解效果。在反应pH为8、n(菲)∶n(Fe)∶n(PS)为1∶2∶2的优化条件下,反应60 min后Fe(Ⅱ)-PS和Fe(Ⅲ)-PS体系对菲的去除率分别为65.11%和55.86%。在Fe(Ⅵ)-PS体系中,在Fe(Ⅵ)单独氧化时间为5 min、反应pH为7、n(菲)∶n(Fe(Ⅵ))∶n(PS)为1∶2∶2的优化条件下,反应60 min后Fe(Ⅵ)-PS体系对菲的去除率可达83.37%,优于其他两种体系和单独Fe(Ⅵ)氧化体系。Fe(Ⅵ)可有效活化PS,除自由基(SO_(4)^(-)·和·OH)作用外,高价态铁可能增加了体系的氧化能力。

不同教学模式中大学物理仿真实验应用研究

为了进一步提高物理仿真实验线上教学质量,探究了仿真实验的发展历程,对比分析了仿真实验在传统混合教学模式和线上教学模式中的不同作用,研究了仿真实验在2种教学模式课前预习、课堂教学和课后复习等过程应用环节的区别与联系,同时对学习通等线上平台与仿真实验教学结合的应用模式进行了探讨.研究结果可为各高校开展线上仿真实验教学、评估教学效果提供参考.

考虑焊接缺陷的焊接接头疲劳寿命评估方法研究

焊接缺陷的存在会大大减少焊接构件的疲劳寿命,由于其多样性和复杂性,以往的方法很难定量的评估它对疲劳寿命的影响。基于美国ASME标准中的结构应力法,提出了两种评估方法,即直接裂纹法和等效裂纹法,分别针对可直接测出初始尺寸的缺陷和无法测出初始尺寸的缺陷,并分别验证了这两种方法的有效性。实验结果表明,这两种方法可以较为准确地评估含有焊接缺陷构件的疲劳寿命。

Fe(Ⅵ)/Fenton体系协同去除焦化废水中菲和氟离子

为考察Fe(Ⅵ)/Fenton体系对焦化废水中有机物和无机物的协同降解效果,选取典型三环类多环芳烃菲和氟离子为研究对象,采用荧光技术,考察不同pH条件下Fe(Ⅵ)对菲的氧化去除效果,以及在弱酸性条件下Fe(Ⅵ)/Fenton体系对菲、氟离子以及菲与氟离子的协同去除效果。结果表明,弱酸性条件下Fe(Ⅵ)对菲的去除率稍差于中性及碱性条件,但该条件下Fe(Ⅵ)/Fenton体系可提高菲的降解率至79%。任何pH条件下缓冲溶液均有利于Fe(Ⅵ)对菲的去除。Fe(Ⅵ)/Fenton体系可协同菲去除氟离子,氟离子去除率可达到39%。对菲的去除主要以氧化作用为主,对氟离子的去除主要以吸附作用为主,且Fenton试剂的用量少,过程中无需调节pH值。

“合科举于学校”:中国近代史学的酝酿

清末新政期间,科举改制与新式学堂兴办都深刻影响了中国传统史学的转型。科举与学堂均倡导史学发挥维护皇权、经世致用、沟通中外的作用,且都将《御批通鉴辑览》《御批通鉴纲目》《九通》等史书列为主要参考书目。取得新章功名的进士、举人,既有中学根柢又略涉西学,暂时补足新式学堂教员之缺。新学制诞生以后,史学实际教学情况却与章程设想有很大差距。学堂的课艺、试题亦与科举新章试题相仿,科举出身的史学教习也难以彻底转变教学方式。甚至清政府倒台后,科举史论试题仍长期在各类考试中出现,深远影响了史学的学院化、专业化进程。

皮肤衰竭的概念分析

目的通过对皮肤衰竭的概念内容、属性、先决条件、结果、正反面案例进行分析,梳理皮肤衰竭概念的组成部分,区分皮肤衰竭和压力性损伤,为护理工作者能有效识别皮肤衰竭、制订护理干预措施提供参考。方法系统检索中国知网、万方数据库、中国生物医学文献数据库、Embase、OVID等国内外数据库,以Walker和Avant概念分析法为框架进行分析讨论。结果共纳入51篇文献,从概念属性、正反案例、前因等7个方面进行介绍。明确概念在临床中的应用,且进行了深度探究,总结疾病的评估内容、影响因素以及压力性损伤鉴别等。结论阐明皮肤衰竭的概念,能够帮助护理人员在有效识别皮肤衰竭的前提下,发挥预见性思维,积极制订护理干预措施,提高以患者为中心的医疗救治。