鉴别猪圆环病毒2型和3型双重TaqMan MGB探针FQ-PCR检测方法研究

建立一种快速、特异鉴别检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重TaqMan MGB探针FQ-PCR方法,本研究以PCV2的Rep蛋白和PCV3的Cap蛋白基因作为靶基因,各设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,经优化各反应条件和进行敏感性、特异性、重复性和干扰性试验,建立鉴别检测PCV2/PCV3的双重FQ-PCR方法。结果显示:该方法可特异性扩增PCV2、PCV3核酸,与猪伪狂犬病病毒(PRV)等8种病原及阴性对照无交叉反应,特异性较强;对PCV2和PCV3阳性质粒标准品的最低检出限均可达10 copies/μL,敏感性较高;PCV2/PCV3批内/批间重复试验变异系数(CV)值均在3%以下,表明方法稳定性、重复性较好;干扰性试验表明在两种病毒阳性质粒起始模板相差较大时该方法不会影响对其中任一病毒核酸的检出和准确定量。对42份临床疑似PCV感染样品检测结果与PCV2、PCV3基因测序结果符合率100%。本研究建立的双重FQ-PCR方法具有敏感性高达10 copies/μL、特异性强、在同一反应体系中能同时快速鉴别检测PCV2、PCV3等优点,可用于临床PCV2/PCV3感染的快速鉴别检测。

院外心脏骤停患者良好神经功能预测因素与决策树预测模型构建

目的探讨院外心脏骤停(OHCA)患者良好神经功能预测因素并构建决策树预测模型。方法回顾性分析2018年1月至2022年12月沧州市中心医院急诊重症监护病房(EICU)收治的117例OHCA并行心肺复苏(CPR)成功患者的临床资料。根据心脏骤停后3个月时的格拉斯哥-匹兹堡脑功能分级将患者分为良好神经功能组(1~2级)和不良神经功能组(3~5级)。通过单因素及多因素Logistic回归分析识别OHCA患者3个月良好神经功能的预测因素,并基于预测因素构建决策树预测模型。应用受试者工作特征曲线下面积(AUC)评估决策树预测模型的区分度,校准曲线评估决策树预测模型预测结局与观察结局的一致性,决策曲线分析评估决策树预测模型的临床实用性。结果29.1%(34/117)的OHCA患者具有良好神经功能。与不良神经功能组相比,良好神经功能组患者多接受旁观者CPR(χ^(2)=4.81,P=0.028)、可除颤心律比例高(χ^(2)=8.74,P=0.003)、CPR持续时间短(Z=3.36,P=0.001)、肾上腺素用量低(Z=4.69,P<0.001)及血乳酸水平低(Z=3.83,P<0.001)。单因素Logistic回归分析结果显示,旁观者CPR(OR=0.34,95%CI 0.13~0.92,P=0.033)、可除颤心律(OR=0.20,95%CI 0.07~0.63,P=0.006)、CPR持续时间(OR=1.08,95%CI 1.02~1.14,P=0.010)、肾上腺素用量(OR=1.64,95%CI 1.28~2.09,P<0.001)及血乳酸(OR=1.20,95%CI 1.09~1.33,P<0.001)为OHCA患者良好神经功能的独立预测因素。多因素Logistic回归分析结果显示,可除颤心律(OR=0.25,95%CI 0.06~0.95,P=0.041)、CPR持续时间(OR=1.07,95%CI 1.00~1.14,P=0.047)、肾上腺素用量(OR=1.95,95%CI 1.29~2.94,P=0.001)及血乳酸(OR=1.13,95%CI 1.01~1.26,P=0.042)为OHCA患者良好神经功能的独立预测因素。决策树预测模型预测OHCA患者良好神经功能的AUC为0.829(95%CI 0.745~0.912),其敏感度为70.6%,特异度为86.7%。校准曲线图表明决策树预测模型的预测结局与观察结局相一致。决策曲线分析证实决策树预测模型的临床可用性良好。结论可除颤心律、CPR持续时间、肾上腺素用量及血乳酸为OHCA患者良好神经功能的预测因素,决策树模型可预测OHCA患者良好神经功能。

猪流行性腹泻病毒微滴式数字PCR定量检测方法的建立及初步应用

旨在建立一种敏感性高、特异性强、重复性好的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)定量检测方法。本研究根据GenBank登录的PEDV(MK862249.1)M基因序列保守区设计合成特异性引物对和探针;通过对反应体系和反应条件的优化,成功建立了可用于检测PEDV的荧光定量PCR(fluorescent quantitative real-time PCR,FQ-PCR)方法,将自行建立的FQ-PCR方法的引物对/探针用来确定ddPCR方法;对ddPCR方法进行敏感性、特异性、重复性和初步应用试验。结果显示:自行建立的FQ-PCR方法在敏感性、重复性等方面均优于行标FQ-PCR方法;根据自行设计的FQ-PCR方法建立的ddPCR方法最低检测极限为0.15 copies·μL^(-1),敏感性高于行业标准(SN/T 1699—2017)FQ-PCR方法(1.0×10^(1)copies·μL^(-1));模板浓度为1.0×10^(0)~1.0×10^(4)copies·μL^(-1)时,具有良好的线性关系(R 2>0.99);批内、批间变异系数(CV%)为1.52%~7.40%;对猪丁型冠状病毒、猪伪狂犬病毒等11种对照病毒核酸检测结果均为阴性;分别用建立的ddPCR方法、行业标准FQ-PCR方法对150份临床样品进行PEDV核酸检测,ddPCR方法对行业标准FQ-PCR方法检测阳性样品的检测符合率为10^(0)%。本研究成功建立的PEDV ddPCR检测方法可用于临床上PEDV感染的早期检测和定量检测,为PEDV核酸标准物质的研制提供了定量手段。

非洲猪瘟病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

建立一种特异、敏感、快速的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,用于非洲猪瘟病毒(ASFV)和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)的鉴别诊断。针对ASFV的B646L基因和HP-PRRSV的NSP2基因分别设计特异性引物/探针对,经优化反应体系、反应程序等反应条件,建立一种基于探针技术的FQ-PCR方法,验证方法的敏感性、特异性和重复性,对130份临床样品进行检测,并与OIE检测方法(ASFV)及国标方法(HP-PRRSV)进行比较分析。本研究成功建立的ASFV和HP-PRRSV二重FQ-PCR检测方法在10^(-1)~10^(5) copies/μL模板范围内有良好的线性关系;对ASFV和HP-PRRSV基因出现阳性扩增,但对猪日本乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲经典株(VR2332株)、健康猪脾脏等7种病原核酸样品对照未出现扩增;批内、批间试验变异系数在0.53%~3.14%,重复性良好;对ASFV和HP-PRRSV的最低检测模板浓度均为10 copies/μL;利用建立的二重FQ-PCR方法对130份临床样品进行检测,检测结果与OIE检测方法(ASFV)及国标方法(HP-PRRSV)完全一致。本研究成功建立了鉴别ASFV和HPPRRSV二重FQ-PCR检测方法,为ASFV和HP-PRRSV的鉴别诊断提供了快速、敏感、特异且能满足临床检测需求的检测方法。

根区施用生物炭和脱硫石膏提高盐碱土壤质量及向日葵产量

为了靶向消减根区土壤盐碱障碍和定向培育健康沃土,该研究在内蒙古河套灌区开展田间小区试验,设置沙土覆盖种植孔(S)、条施生物炭+沙土覆盖种植孔(B+S)、条施生物炭+脱硫石膏覆盖种植孔(B+G)3个处理,对比分析0~20 cm和>20~40 cm土层土壤质量及向日葵产量差异。结果表明:根区施用生物炭和脱硫石膏改变了0~40 cm土壤水溶性离子组成,主要表现为增加Ca^(2+)含量而降低Na~+含量。与S处理相比,B+S和B+G处理显著降低了0~40 cm土壤钠吸附比(sodium adsorption ratio,SAR)和>20~40 cm土层pH值,增大了土壤脱盐率(Ds);B+S和B+G处理还增加了0~40 cm土壤有机质(OM)、硝态氮(NO_(3)^(-)-N)、有效磷(available phosphorus,AP)和速效钾(AK)含量,为向日葵出苗和生长提供了良好的土壤环境。此外,B+S和B+G处理通过调理盐碱指标(SAR,D_s,Ca^(2+)和Mg~(2+))和肥力水平(AK,NO_(3)^(-)-N和OM)来提高土壤质量,二者基于全数据集的土壤质量指数(SQI)比S处理分别增大了35.7%和88.5%。但相比之下,B+G处理在这两个方面的作用效果要优于B+S处理,因而获得了最高籽粒产量。可见,在根区条施生物炭和脱硫石膏覆盖种植孔相结合可提高盐碱地土壤质量和向日葵产量,为河套灌区盐碱地改良利用提供技术支撑。

急诊床旁超声教学在住院医师培训课程中的应用

目的分析急诊床旁超声教学对住院医师临床综合能力的影响。方法选取2021年1月至2023年6月百色市人民医院的60名新入科住院医师为研究对象,通过随机数字表法分为对照组(n=30)和观察组(n=30)。所有新入科医师进入超声科后均由高年资医师培训指导,培训2周,每天8 h。对照组全天跟随导师在诊室培训;观察组上午在诊室培训,下午跟随导师参加急诊床旁超声检查。比较两组医师培训后的理论考核成绩、操作技能考核成绩、临床思维能力评分以及教学满意度。结果两组培训后的理论考核成绩比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组操作技能考核成绩、临床思维能力评分、自主学习能力和教学满意度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在诊室培训教学中融入急诊床旁超声教学能够显著提高住院医师的操作技能、临床思维、自主学习能力,值得推广。

数学师范生实践能力的目标体系构建和实施路径探索——以唐山师范学院为例

为推动乡村教育的高质量发展,适应中小学课改和人工智能时代的需求,为基础教育培养“四有”好老师,该文基于对唐山市基础教育、唐山师范学院数学专业师范生及其培养过程的调研分析,对照《中小学教师职业能力标准》,建构数学专业师范生实践能力的二级目标体系,探索形成助力师范生实践能力提升和职业发展的协同育人路径。

虢国墓地出土麻织品保护修复

本研究针对河南三门峡虢国墓地M2009出土的麻织品中的主要文物麻裤、麻褂的保护修复过程进行相对全面而细致的阐述。以保存现状和病害分析为依据,制定以物理方法为主的保护修复方案。采用从清理、清洁(包括消毒以及有针对性的清洁措施等)到平复修整、形制复原、包装与保存等一系列合理的修复程序和操作方法进行操作实施,使这批麻织品得到了很好的保护,为以后进一步研究提供了保障。同时,总结了这次文物修复过程中的经验,如对于结构疏松的麻织物清洗力度的把控度、平整定形中的要点,以及对于文物形制确定的再认识等,为进一步可能实施的保护修复保存了一手资料,也为麻织品文物的研究及保护修复提供了宝贵的参考经验。

ELN基因对血管疾病影响的研究进展

ELN基因位于7q11,参与全身各处细胞外基质中弹性蛋白的合成。血管壁的弹性和抗张能力主要由90%的弹性蛋白和10%的微纤维共同组成的弹性纤维赋予,ELN基因的缺失或异常改变对血管壁的弹性和抗张能力都有显著影响,进而导致以动脉狭窄为特征的不同程度心血管疾病的发生。故本文就近年来国内外对主动脉瓣上狭窄、Williams综合征、收缩期高血压、颅内动脉瘤的研究进展进行简要总结,为探明相应疾病的发病机制以及临床诊疗方向提供切入点及参考。

猪伪狂犬病病毒疑似感染人的实验室诊断及分析

为给人感染伪狂犬病病毒(PRV)来源分析及其感染机理研究提供相关信息,对一例疑似感染PRV患者的血清、脑脊液、拭子及其工作猪场的病猪血清、组织等样品进行病原学、血清学检测及病毒分离,对其工作猪场开展流行病学调查,并采集患者同事血清样品进行PRV抗体检测。结果显示:病人样品经数字PCR检测均为PRV核酸阳性;病人发病后5~90 d内的血清样品均为PRV gB抗体阳性,gE抗体发病后18 d转为阳性并一直持续到发病后90 d;病人同事均未表现临床症状,其血清样品PRV gB抗体阳性率为22.2%,gE抗体均为阴性;从病人工作猪场的病猪样品中分离到PRV,且样品经荧光定量PCR核酸检测及ELISA抗体检测均检出阳性;病人工作猪场为PRV阳性场,病人及PRV gB抗体阳性同事均有直接接触病猪史。结果表明,患者感染的PRV来自其工作猪场猪群的可能性较大,人感染后表现出和动物感染相似的抗体消长规律。PRV对公共卫生的影响及其感染机制需进一步关注和研究。

西尼罗热国内外疫情形势与防控

西尼罗热是人兽共患虫媒病,1937年首发于非洲乌干达,1990年代前主要呈散发或小规模流行,1999年传入美国首次进入西半球后,短短几年扩散至全美,其暴发流行引起了人们极大关注。近20年该病在世界各国频频暴发,造成人、马、鸟类的大量感染及死亡,严重威胁人类和动物的健康及生命安全,为此被世界卫生组织(WHO)列为全球重大流行病之一。本文对该病的病原特性、血清型和基因型、宿主、传播媒介、传播方式、临床表现、发病率和病死率、流行季节、诊断方法、疫苗和药物等方面进行了简单介绍,对国内外疫情形势及我国的传入传播风险进行了分析,并提出了该病的防控应对措施,以期为我国科学防控该病提供依据。

湖州明代邵南夫妇合葬墓出土丝织品研究

墓葬出土丝织品是研究古代丝绸技艺和社会文化生活的重要证据。浙江湖州在明代中期已是中国丝绸的重点产区,除湖丝甲天下外,生产的丝绸品种也极其丰富。湖州明代邵南夫妇合葬墓出土丝织品,是湖州地区目前出土的保存最完整、最有代表性的明代丝织品实物资料。本文对该墓出土的丝绸服饰及所用面料进行重点考察,从服饰品类、丝织品种、丝绸纹样类别等角度开展了服饰形制研究、面料工艺分析与纹样复原研究,为后续的文物保护与复原提供了重要依据。该墓出土的男女服饰种类齐全,丝织品种基本涵盖明代丝绸的典型品种,丝织品纹样题材广泛、构图巧妙,呈现出敦厚温柔的明代丝绸风貌,出土丝织品反映出明代中后期杭嘉湖地区丝织品的技艺与服用特征,也为研究浙江地区的丝绸技艺与服饰文化提供了宝贵信息。

非洲马瘟暴发的情境分析与防控对策

非洲马瘟(African horse sick,AHS)是一种由库蠓叮咬马科动物传播的虫媒病毒病,可造成严重动物福利问题和产业经济影响。该病过去主要在撒哈拉以南的非洲国家或地区呈地方流行,2020年泰国首次报道发生。鉴于类似虫媒疫病(特别是反刍动物蓝舌病)的全球分布正在不断扩大,AHS跨境传播和流行的风险日益增加。在评估AHS传入风险时应重点考虑已知媒介物种的分布变化、本地媒介物种的潜在作用、病毒通过脊椎动物宿主传播、病毒通过媒介昆虫移动传播以及疫苗株毒力返强等问题。一旦发现病毒传入,应尽快采取淘汰病马、追踪动物、免疫疫苗、阻断媒介与宿主间循环等措施。为保护马产业健康发展,应重点调查特定库蠓传播AHS的媒介能力,建立标准化马科动物移动数据库使疫病建模更为准确,开发更加有效和实用的防治方法使动物免于被叮咬,并考虑建立符合世界动物卫生组织(WOAH)认可标准的疫苗库。本文通过综述AHS在无疫国家或地区可能发生的情境以及西方发达国家的防控经验和应对措施,以期为我国兽医管理和技术人员、马科动物相关行业从业人员提供一定的借鉴。

2012-2021年潜在不适当用药的研究热点与趋势分析

目的 通过文献计量学的方法,定量和定性分析潜在不适当用药(PIM)研究的进展,并预测PIM研究的热点和趋势,为我国开展PIM研究提供参考。方法 检索Web of Science核心数据库与PIM相关的研究文献,在文献计量在线分析平台和CiteSpace5.8.R3软件上分析文献的发表趋势,并对研究结果进行可视化分析,通过gCLUTO软件总结PIM的研究热点。结果 关于PIM的研究,2012-2021年的年发文量整体呈持续增长的趋势;美国的发文量最多(241篇);澳大利亚悉尼大学为发文量最多(59篇)的研究机构;来自爱尔兰科克大学的O’Mahony D教授发文量最多(23篇);PIM的研究涉及57个学科领域,其中老年学发文量最多(384篇);期刊International Journal of Clinical Pharmacy的发文量最多(61篇);期刊Journal of the American Geriatrics Society的总被引频次最高(1 197次)。PIM的研究热点主要集中在PIM的标准研究、PIM的安全性与经济性研究、PIM的风险因素研究、慢病患者的PIM研究、抗精神病药物的PIM研究、药师参与PIM管理的研究、肿瘤姑息治疗中的PIM研究7个方面。结论 PIM研究的热度一直在上升,国家与机构间合作不紧密,需要增进合作。未来我国药师关于PIM的研究重点可能在PIM标准的深度本土化、PIM的干预与精准用药指导、专病专药的PIM管理等方面。

脓毒性休克病人皮肤花斑评分联合乳酸对急性皮肤衰竭的预测价值

目的:探究皮肤花斑评分联合乳酸预测脓毒性休克病人急性皮肤衰竭(ASF)的效果。方法:采用便利抽样的方法,收集2020年7月—2021年12月收入急诊监护室的123例脓毒性休克病人,按照其是否发生急性皮肤衰竭分为急性皮肤衰竭组(n=30)和非急性皮肤衰竭组(n=93),并对两组资料进行比较,应用受试者工作特征(ROC)曲线下面积分析皮肤花斑评分联合乳酸对急性皮肤衰竭的预测价值。结果:皮肤花斑评分联合乳酸的ROC曲线下面积为0.931,灵敏度为0.867,特异度为0.957,Youden指数为0.824。结论:皮肤花斑评分联合乳酸可以有效预测脓毒性休克病人急性皮肤衰竭的发生,可为急诊科医务人员早期监测并干预脓毒症病人皮肤衰竭发生提供借鉴。

凤丹牡丹花粉和花药壁营养成分分析及评价

为探明凤丹牡丹花粉、花药壁的营养成分,从而更好地发挥其营养价值,本研究采用凯氏定氮法、电感耦合等离子体发射光谱、高效液相色谱、氨基酸分析仪等对凤丹花粉和花药壁蛋白质、矿物质元素、维生素C、水解氨基酸及游离氨基酸进行了系统地分析和评价。结果表明,凤丹花粉中蛋白质含量高达40.68%(初开期),水解氨基酸总量为355.65 mg·g^(-1)(初开期),花药壁中蛋白质和水解氨基酸的总量虽仅为花粉的一半,但二者必需氨基酸与总氨基酸的比值均为40%左右,属优质蛋白来源。36种游离氨基酸检测结果显示,花药壁中总游离氨基酸含量稍高,但花粉中必需氨基酸、蛋白氨基酸及鲜甜氨基酸含量更高。矿物质元素分析结果表明,凤丹花粉、花药壁含有丰富的常量和微量元素,尤以K、Ca、Mg、Fe、Zn等元素含量较高,是开发高钾低钠和补铁补锌的佳品。Vc测定结果显示,凤丹花粉和花药壁中Vc含量较高,可作为Vc补充剂。同时考察了凤丹花粉、花药壁不同采收时期及破壁对检测成分含量的影响,结果显示二者更适合在初开期采收,且破壁对花粉、花药壁营养成分检测无显著影响。综上,凤丹花粉、花药壁含有丰富的营养成分,本研究将为其资源开发和利用奠定基础。

4种农药对呼和浩特市榆绿毛萤叶甲室内毒力测定及田间防效评价

为筛选出防治榆绿毛萤叶甲Pyrrhalta aenescens的有效药剂,为在园林植物害虫防治中合理使用杀虫剂提供指导。本文选用园林植物害虫防治中常用的4种杀虫剂进行室内毒力测定和田间防效试验。结果表明,甲氨基阿维菌素苯甲酸盐对榆绿毛萤叶甲2~3龄幼虫的毒力最高,LC_(50)为1.401 mg/L。高效氯氰菊酯次之,印楝素的毒力最低,LC_(50)为39.279 mg/L。田间药效试验表明,施药3 d后,稀释500倍的3%高效氯氰菊酯悬浮剂和3%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂的防效最好,分别为91.22%和89.49%。施药5 d后,4种杀虫剂对榆绿毛萤叶甲的防效为85.67%~91.97%,无明显差异。研究结果为榆绿毛萤叶甲的防治提供了理论指导。

1例妊娠晚期合并浆细胞性乳腺炎慢性伤口的护理

总结1例妊娠晚期合并浆细胞性乳腺炎(PCM)慢性伤口保守治疗的护理体会。结合患者的病情及特殊性进行综合评估,造口治疗师团队介入处理,针对本病例采用多学科协作讨论制定个性化伤口管理方案:对伤口进行保守性锐器清创联合清创胶、针对孕妇后期考虑哺乳选择个性化方案控制感染、针对乳汁等伤口渗液进行综合管理、进行伤口疗效评估、对患者进行疼痛及心理护理,5 d后恢复母乳喂养,31 d后伤口基本愈合。

油页岩半焦堆放对周围环境的影响

以可能影响周围生态环境的油页岩半焦特性为研究对象,分别测试了油页岩半焦的放射性、重金属离子溶出性能及挥发份。实验结果表明,油页岩半焦放射性核素限量满足GB6566-2010《建筑材料放射性核素限量》国家标准。油页岩半焦在水中和盐中重金属离子均符合GB15618-1996《土壤环境质量标准》中关于重金属离子的规定。油页岩半焦堆场路面周围土壤中重金属元素含量与正常土壤无太大区别。油页岩厂周围空气中,SO_(2)、NOx、H_(2)S、NH3、非甲烷总烃等常见的空气污染物符合国家相关标准。

A型塞内卡病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用

为建立基于VP2蛋白、VP3蛋白检测猪塞内卡病毒A(SVA)抗体血清学方法。本研究扩增SVA VP2基因和VP3基因(VP23基因),基因全长1569 bp,并与原核表达载体pGEX-6p-1构建重组载体,IPTG诱导表达可溶性rVP23蛋白,经蛋白酶切除标签蛋白得到sVP23蛋白,分子量约为58 kDa。通过矩阵优化、确定临界值、敏感性分析、特异性鉴定,建立了SVA抗体间接ELISA方法。该方法的S/P临界值标准为0.35,批内批间变异系数均小于7%,与中和试验结果符合率为95.49%。上述结果表明,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于塞内卡病毒血清抗体检测和流行病学调查。