【目的】分析细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)2个Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因EGR-07243和EGR-07244的生物信息学特性,并进行原核表达,以期检测EGR-07243和EGR-07244蛋白的免疫原性。【方法】利用PCR扩增EGR-07243、EGR-0724...【目的】分析细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)2个Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因EGR-07243和EGR-07244的生物信息学特性,并进行原核表达,以期检测EGR-07243和EGR-07244蛋白的免疫原性。【方法】利用PCR扩增EGR-07243、EGR-07244基因全长序列,采用生物信息学软件对EGR-07243、EGR-07244蛋白的理化性质、结构特点及亲缘进化关系进行分析;构建重组质粒pET32a-EGR-07243、pET32a-EGR-07244并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用SDS-PAGE检测蛋白的表达,并通过Western blotting对蛋白进行抗原性分析。【结果】EGR-07243基因全长228 bp,编码75个氨基酸,蛋白分子式为C 686 H 1146 N 228 O 292 S 63,相对分子质量约19258,含有3个B细胞抗原表位,理论等电点为5.30,脂肪系数为17.98,亲水性为0.714,为稳定蛋白;EGR-07244基因全长228 bp,编码75个氨基酸,蛋白分子式为C 675 H 1124 N 228 O 287 S 56,相对分子质量约18800,含有3个B细胞抗原表位,理论等电点为5.32,脂肪系数为20.61,亲水性为0.689,为稳定蛋白。二者氨基酸序列相似性为72.00%。二者与绦虫属的功能结构域氨基酸序列一致性为95%以上,亲缘关系极近;而与人的功能结构域氨基酸序列一致性为46.3%,亲缘关系较远。通过双酶切鉴定及测序分析证明,pET32a-EGR-07243、pET32a-EGR-07244重组质粒构建成功。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后成功诱导表达蛋白,Western blotting结果显示,2种蛋白能被感染原头蚴的犬阳性血清识别且不被健康犬血清识别,表明其均具有良好的反应原性。【结论】EGR-07243和EGR-07244蛋白能够作为预防细粒棘球绦虫感染的疫苗免疫靶点,结果为抗包虫病疫苗候选分子的筛选提供了试验材料。展开更多
目的 考察局限性前列腺癌(localized prostate cancer,LPC)患者的治疗选择[手术、放疗或观察等待/积极监测(watchful waiting or active surveillance,WW/AS)]与自我报告的主观生存预期的关系,同时确定患者主观生存预期的影响因素。方法...目的 考察局限性前列腺癌(localized prostate cancer,LPC)患者的治疗选择[手术、放疗或观察等待/积极监测(watchful waiting or active surveillance,WW/AS)]与自我报告的主观生存预期的关系,同时确定患者主观生存预期的影响因素。方法 前瞻性纳入2019年3月至2022年1月在浙江省台州医院门诊和住院诊疗的180例LPC患者。根据治疗方案不同,将患者分为手术组(n=103)、放疗组(n=54)和WW/AS组(n=23)。所有患者填写问卷,内容包括受试者选择的治疗方案(手术、放疗或WW/AS)、基于此方案的生命预期(LE2)、如不进行治疗的生命预期(LE_(1)),ΔLE=LE_(2)-LE_(1)。比较治疗和不治疗前列腺癌时患者主观生存期望的差异、选择不同治疗方案的患者主观生存期望的差异(ΔLE),采用多元线性回归分析模型考察患者主观生存预期长短的影响因子。结果 如果不接受任何治疗,33.3%的患者主观生存预期不足5年,只有5.0%的患者主观生存期望超过20年;而选择积极治疗的患者主观生存预期低于5年的仅占3.3%,超过20年的占53.9%。未调整LE前,手术组和放疗组ΔLE均高于WW/AS组,差异有统计学意义(P<0.05)。调整LE后,手术组和放疗组ΔLE均高于WW/AS组,差异有统计学意义(P<0.05)。年龄和所选择的治疗方案是主观生存预期差异的影响因子。结论 大多数LPC患者在不接受治疗的情况下低估了生存预期,而在接受手术或放疗的情况下高估了生存预期。这些不切实际的主观生存预期可能会导致治疗过度,决策后悔,并降低治疗后的生活质量。展开更多
文摘【目的】研究甲基二乙醇胺(MDEA)与不同二元胺混合后配方的吸收再生性能。【方法】在体积分数12%的CO_(2)和88%的N_(2)模拟烟气环境下,以MDEA为主剂,分别添加乙二胺(EDA)、1,3-丙二胺(DAP)、3-甲氨基丙胺(MAPA)、羟乙基乙二胺(AEEA)、 N, N-二甲基乙二胺(DMEDA)和N,N-二甲基-1,3-丙二胺(DMPDA)作为活化剂。在总胺质量分数为40%的条件下,以主剂与活化剂的质量比1∶1、2∶1、3∶1配置化学吸收剂。通过比较鼓泡吸收和油浴再生实验,得到不同吸收剂的吸收速率、再生速率和循环容量,筛选出性能优良的吸收剂配方。【结果】MDEAEDA体系在MDEA与EDA的质量比1∶1时吸收性能最佳;MDEA-DMEDA体系在MDEA与DMEDA的质量比2∶1时再生性能最佳,循环容量达到1.7 mol/kg;MDEA-AEEA体系在MDEA与AEEA的质量比1∶1时整体性能达到最优,循环容量可以达到1.49 mol/kg。【结论】研究结果可为工业上混合胺液的配方优选提供理论依据。
文摘【目的】分析细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)2个Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因EGR-07243和EGR-07244的生物信息学特性,并进行原核表达,以期检测EGR-07243和EGR-07244蛋白的免疫原性。【方法】利用PCR扩增EGR-07243、EGR-07244基因全长序列,采用生物信息学软件对EGR-07243、EGR-07244蛋白的理化性质、结构特点及亲缘进化关系进行分析;构建重组质粒pET32a-EGR-07243、pET32a-EGR-07244并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用SDS-PAGE检测蛋白的表达,并通过Western blotting对蛋白进行抗原性分析。【结果】EGR-07243基因全长228 bp,编码75个氨基酸,蛋白分子式为C 686 H 1146 N 228 O 292 S 63,相对分子质量约19258,含有3个B细胞抗原表位,理论等电点为5.30,脂肪系数为17.98,亲水性为0.714,为稳定蛋白;EGR-07244基因全长228 bp,编码75个氨基酸,蛋白分子式为C 675 H 1124 N 228 O 287 S 56,相对分子质量约18800,含有3个B细胞抗原表位,理论等电点为5.32,脂肪系数为20.61,亲水性为0.689,为稳定蛋白。二者氨基酸序列相似性为72.00%。二者与绦虫属的功能结构域氨基酸序列一致性为95%以上,亲缘关系极近;而与人的功能结构域氨基酸序列一致性为46.3%,亲缘关系较远。通过双酶切鉴定及测序分析证明,pET32a-EGR-07243、pET32a-EGR-07244重组质粒构建成功。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后成功诱导表达蛋白,Western blotting结果显示,2种蛋白能被感染原头蚴的犬阳性血清识别且不被健康犬血清识别,表明其均具有良好的反应原性。【结论】EGR-07243和EGR-07244蛋白能够作为预防细粒棘球绦虫感染的疫苗免疫靶点,结果为抗包虫病疫苗候选分子的筛选提供了试验材料。