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鹅源新城疫病毒ZJI株基因组cDNA克隆的序列修饰
被引量:
1
1
作者
刘玉良
胡顺林
+7 位作者
张艳梅
吴艳涛
刘秀梵
Rmer-Oberdrfer Angela
weits jutta
Lange Martina
黄勇
龙进学
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期1-6,共6页
将鹅源新城疫病毒ZJI株全基因组cDNA克隆通过酶切切下包含T7启动子区域和转录载体的片段,将其自身环化后获得约6.5kb的质粒。设计引物,利用基因定点突变技术,在此质粒上T7启动子与NDV Leader序列之间突变插入额外的3个G碱基,将此突变最...
将鹅源新城疫病毒ZJI株全基因组cDNA克隆通过酶切切下包含T7启动子区域和转录载体的片段,将其自身环化后获得约6.5kb的质粒。设计引物,利用基因定点突变技术,在此质粒上T7启动子与NDV Leader序列之间突变插入额外的3个G碱基,将此突变最终引入到原基因组cDNA克隆中。应用RT-PCR技术从尿囊液中扩增NDV基因组F/HN基因区域部分片段,利用限制性内切酶BsmB I将扩增片段连接,最终将原cDNA克隆中相应片段替换下。测序结果表明,原基因组cDNA克隆中特定位置碱基插入突变成功,F/HN基因区域碱基突变均得以纠正。以上cDNA克隆的修饰与替换为该毒株的反向遗传研究打下了基础。
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关键词
鹅源新城疫病毒
基因定点突变
基因组cDNA克隆
改造
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职称材料
题名
鹅源新城疫病毒ZJI株基因组cDNA克隆的序列修饰
被引量:
1
1
作者
刘玉良
胡顺林
张艳梅
吴艳涛
刘秀梵
Rmer-Oberdrfer Angela
weits jutta
Lange Martina
黄勇
龙进学
机构
扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室
德国Friedrich-Lffler研究所国家动物病毒病研究中心分子生物学实验室
出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期1-6,共6页
基金
国家自然科学基金项目(No.39893290)
国家"973"项目(No.G19990199)
文摘
将鹅源新城疫病毒ZJI株全基因组cDNA克隆通过酶切切下包含T7启动子区域和转录载体的片段,将其自身环化后获得约6.5kb的质粒。设计引物,利用基因定点突变技术,在此质粒上T7启动子与NDV Leader序列之间突变插入额外的3个G碱基,将此突变最终引入到原基因组cDNA克隆中。应用RT-PCR技术从尿囊液中扩增NDV基因组F/HN基因区域部分片段,利用限制性内切酶BsmB I将扩增片段连接,最终将原cDNA克隆中相应片段替换下。测序结果表明,原基因组cDNA克隆中特定位置碱基插入突变成功,F/HN基因区域碱基突变均得以纠正。以上cDNA克隆的修饰与替换为该毒株的反向遗传研究打下了基础。
关键词
鹅源新城疫病毒
基因定点突变
基因组cDNA克隆
改造
Keywords
Newcastle disease virus of goose origin, Site-directed mutagenesis, Genomic cDNA clone, Modification
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鹅源新城疫病毒ZJI株基因组cDNA克隆的序列修饰
刘玉良
胡顺林
张艳梅
吴艳涛
刘秀梵
Rmer-Oberdrfer Angela
weits jutta
Lange Martina
黄勇
龙进学
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
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