剔除CCR5基因供者小鼠细胞加重急性移植物抗宿主疾病

目的评价供者CCR5在经过强化预处理的骨髓移植动物模型受者体内的作用,为今后的异基因造血干细胞移植的临床应用提供科学依据。方法经过致死剂量照射的BALB/C小鼠接受异基因C57BL/6小鼠骨髓移植。根据回输的细胞不同分为4组:B6CCR5KO组,受者接受C57BL/6CCR5-/-小鼠骨髓和脾脏细胞;B6WT组,受者接受野生型C57BL/6小鼠骨髓细胞;B6CCR5KOBMC组,受者只接受C57BL/6CCR5-/-小鼠骨髓细胞;B6WTBMC组,受者只接受野生型C57BL/6小鼠骨髓细胞。结果较之B6WT组,B6CCR5KO组小鼠以更快的速度死于急性GVHD;其受者体内的CD8+T细胞更大量的增殖;其T细胞恢复后产生更多的IFN-γ和TNF-α,并且由于其T细胞有丝分裂原刀豆素水平处于较高水平从而进一步促进T细胞增殖,提示CCR5的作用之一是下调参与排异反应的供者CD8+T细胞的增殖。组织学评价提示移植剔除CCR5基因受者细胞的小鼠肾脏出现了病理损伤并且肝脏存在更为严重的病理变化。结论剔除CCR5基因的异基因骨髓移植使GVHD发病率增加,供者CD8+T细胞在受者体内增殖增加以及肝肾损害加重,提示CCR5在异基因骨髓移植中起着重要作用。

重组人催乳素(rhPRL)在huPBL/SCID嵌合模型中对人直肠癌的治疗效应及免疫机理初探

通过体内实验进一步证实rhPRL对机体免疫功能的调节作用,以及用于过继细胞免疫治疗的可能性。我们选用CB17 SCID纯系小鼠,腹腔注入人结肠腺癌细胞(HT29),2小时后腹腔注入尼龙毛纯化的人淋巴细胞(T/NK细胞),同时开始进行rhPRL治疗,并设HBSS对照和rhIL-2治疗对照组。结果表明,rhPRL在体内外均无直接抗癌效应,反而可促进肿瘤生长。当SCID荷瘤鼠同时移植入人的T/NK细胞时出rhPRL可明显提高T/NK细胞的抗癌效果,生存期明显延长(P<0.05)。平均生存期由70.4天延至112.1天,在对照组全部死亡时(d105),rhPRL治疗组有60％存活,且在实验终止时(>160天)仍有40％存活。分析其抗癌机理发现,rhPRL体外可直接促进人T/NK细胞增殖,其分泌上清可抑制肿瘤生长,同时发现人T/NK细胞与HT29共育4小时中rhPRL亦可直接促进杀伤活性。

基因工程人催乳素(rhPRL)促进骨髓移植小鼠的造血重建

选用BACB/c鼠经致死放疗后行同基因骨髓移植(SBMT),在小鼠SBMT后腹腔注射rhPRL(10μg/次,隔日进行,共10次).结果显示,小鼠骨髓和脾脏中造血前体细胞(CFU-C和BFU-E)比例增加,外周血中WBC、RBC和PLT亦均有明显的时相提前,该剂量rhPRL无任何病理损伤和增长体重的作用,提示rhPRL在促进BMT造血重建有应用前景.