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利用噬菌体展示技术筛选草鱼呼肠孤病毒VP39蛋白相互作用多肽 被引量:1
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作者 龙晨 徐宁 +1 位作者 谢雅晴 吕利群 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期859-865,共7页
VP39是草鱼呼肠孤Ⅲ型病毒(GCRV GenotypeⅢ,GCRV-Ⅲ)S9基因编码的蛋白,为研究VP39蛋白在GCRV-Ⅲ感染草鱼细胞过程中行使的生物学功能,将克隆VP39基因序列并构建原核表达载体pET32a-VP39,通过原核表达得到VP39-HIS融合蛋白;利用VP39蛋... VP39是草鱼呼肠孤Ⅲ型病毒(GCRV GenotypeⅢ,GCRV-Ⅲ)S9基因编码的蛋白,为研究VP39蛋白在GCRV-Ⅲ感染草鱼细胞过程中行使的生物学功能,将克隆VP39基因序列并构建原核表达载体pET32a-VP39,通过原核表达得到VP39-HIS融合蛋白;利用VP39蛋白溶液免疫小鼠,制备鼠抗VP39多克隆抗体,通过Western Blot对抗体进行评估;利用制备的多克隆抗体探究GCRV-Ⅲ感染细胞过程中VP39蛋白表达动力学;利用噬菌体展示技术筛选与VP39蛋白特异性结合的多肽序列并进行分析。SDS-PAGE电泳结果显示,VP39-HIS融合蛋白可良好溶于PBS中,蛋白大小约为39 kD;Western Blot检测表明实验所制备的VP39多克隆抗体在1﹕10000稀释比例下,既能识别原核表达的VP39-HIS融合蛋白,也能识别GCRV-Ⅲ感染CIK细胞后表达的VP39蛋白,具有良好的效价与特异性;在病毒侵染过程中,VP39前期表达量较少,在中后期大量表达;噬菌体展示技术筛选出两条多肽与VP39蛋白有高度亲和性,经过在NCBI上比对后发现草鱼基因组中有7个基因与筛出的多肽具有同源性,表明其可能与VP39存在相互作用。研究制备了鼠抗VP39多克隆抗体,为GCRV-Ⅲ的免疫学检测方法提供了新的路径;结合多肽的筛选也为VP39在GCRV-Ⅲ侵染过程中参与的生物学功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 Ⅲ型草鱼呼肠孤病毒 VP39蛋白 多克隆抗体 噬菌体展示技术
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微藻规模化培养与生物能源开发 被引量:13
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作者 谢雅清 郁彬琦 +2 位作者 靳翠丽 缪莉 周晓见 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期27-32,共6页
分析论述了微藻生产生物能源的潜力,以及微藻培养模式和技术对于生物能源生产的影响,具体包括:C、N、P及微量元素供给,光照、温度、盐度、植物激素添加等培养条件,光自养、异养、混合培养、光异养等营养方式,单段或二段培养方式,微藻培... 分析论述了微藻生产生物能源的潜力,以及微藻培养模式和技术对于生物能源生产的影响,具体包括:C、N、P及微量元素供给,光照、温度、盐度、植物激素添加等培养条件,光自养、异养、混合培养、光异养等营养方式,单段或二段培养方式,微藻培养与废气废水治理结合的配套培养模式等方面。 展开更多
关键词 微藻 生物能源 营养供给 培养条件 培养模式
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硅藻粘附性EPS提取方法的比较研究
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作者 于兆伟 谢雅清 +4 位作者 张珮璇 鲍金 孙陈炼 靳翠丽 周晓见 《应用海洋学学报》 CSCD 北大核心 2019年第4期592-599,共8页
底栖硅藻是可见光能照射到的水下表面生物膜中的主要污损生物,胞外多聚物(Extracellular Polymeric Substances,EPS)是硅藻生物膜形成和发育过程中的关键物质,可溶性EPS和粘附性EPS的提取方法不同,对粘附性EPS的分离提取仍没有统一的方... 底栖硅藻是可见光能照射到的水下表面生物膜中的主要污损生物,胞外多聚物(Extracellular Polymeric Substances,EPS)是硅藻生物膜形成和发育过程中的关键物质,可溶性EPS和粘附性EPS的提取方法不同,对粘附性EPS的分离提取仍没有统一的方法。本研究选用了4种方法提取底栖硅藻(Amphora sp.)粘附性EPS:30℃水浴处理、70℃水浴处理、福尔马林-NaOH处理和阳离子交换树脂处理,研究了不同分离方法条件下,Amphora sp.粘附性EPS中各主要成分的提取量。结果表明,粘附性EPS中各主要成分普遍受提取方法的影响,其中DNA含量变化幅度最大,其次是蛋白质、总糖和糖醛酸含量,硫酸基含量受提取方法的影响最小。低温水浴处理提取效率低,高温水浴处理可能影响EPS的后续分析,阳离子交换树脂提取粘附性EPS的效果较好,但对细胞的破坏最严重,福尔马林-NaOH处理提取的EPS总量最高,提取总糖、糖醛酸的效果最好,而且没有造成严重的细胞破裂。因此福尔马林-Na OH处理是相对均衡和高效的提取硅藻粘附性EPS的方法。 展开更多
关键词 海洋生物学 硅藻 粘附性EPS 提取 福尔马林-NaOH处理
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Clinical Research of Traditional Chinese Medicine Fumigation and Washing Combined with Rehabilitation Training in the Treatment of Post-Apoplexy Shoulder-Hand Syndrome
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作者 xie ya-qing MAO Zhong-nan +1 位作者 ZHANG Xiao-ling WANG Rui-rui 《World Journal of Integrated Traditional and Western Medicine》 2021年第6期52-57,共6页
Objective:To observe the clinical effect of traditional Chinese medicine fumigation and washing combined with routine rehabilitation training on post-stroke shoulder and hand syndrome(SHS).Comparing and analysing the ... Objective:To observe the clinical effect of traditional Chinese medicine fumigation and washing combined with routine rehabilitation training on post-stroke shoulder and hand syndrome(SHS).Comparing and analysing the effects of this treatment on the living ability of patients with post-stroke shoulder and hand syndrome.Methods:Fifty patients with post-stroke SHS who met the inclusion criteria were divided into observation group and control group by random number table method with 25 cases in each group.Both groups were given post-stroke secondary prophylactic drugs,while the control group was given routine rehabilitation training,20-30 minutes at a time,once a day,5 days a week,4 weeks as a course of treatment.On the basis of treatment in the control group,the observation group was combined with traditional Chinese medicine fumigation and washing,decocted with water to extract 3,000-4,000 ml juice,and added into the medicine bath bucket to soak the affected limb for 30-40 minutes,once a day,5 days a week,4 weeks as a course of treatment.The changes of upper limb edema degree,Numeric Rating Scale(NRS)score,Barthel index(MBI)and Fugl-Meyer Rating(FMA)scores before and after treatment were observed between the two groups,and the differences of clinical efficacy between the two groups were compared.Results:After treatment,the total effective rate in observation group was significantly better than that in control group(P<0.05).After treatment,the degree in upper limb edema in the two groups was significantly reduced(P<0.05),NRS score was decreased(P<0.05).Barthel index and FMA score were significantly increased(P<0.05),and the degree of upper limb edema and NRS score in the observation group were significantly lower than those in the control group(P<0.05).Barthel index and FMA score were significantly higher than those in the control group(P<0.05).Conclusion:The combination of traditional Chinese medicine fuming and washing with rehabilitation training has a better therapeutic effect on SHS,and the clinical efficacy of the former is more significant than that of single rehabilitation training.In clinical application,the former shows low cost,simple and easy operation,high acceptance by patients,and is conducive to promotion and use. 展开更多
关键词 Traditional Chinese medicine fumigation Rehabilitation training Shoulder-hand syndrome Post-apoplexy
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超越封闭的自我主体--雷蒙德·卡佛短篇小说《大教堂》的叙事进程 被引量:2
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作者 谢雅卿 《解放军外国语学院学报》 CSSCI 北大核心 2020年第2期135-141,158,共8页
在叙事进程理论框架下,本文通过对视觉与触觉的隐喻式解读,从多维层次反思雷蒙德·卡佛的短篇小说《大教堂》中因视觉理性造成的封闭主体性。在故事层面,“不稳定因素”的解决昭示了主人公走出自我封闭;在话语层面,“紧张因素”的... 在叙事进程理论框架下,本文通过对视觉与触觉的隐喻式解读,从多维层次反思雷蒙德·卡佛的短篇小说《大教堂》中因视觉理性造成的封闭主体性。在故事层面,“不稳定因素”的解决昭示了主人公走出自我封闭;在话语层面,“紧张因素”的解决代表了叙述者在认识论意义上的进步;在元文学层面,卡佛通过与理想读者的隐秘交流削弱自身权威,表达出对读者-作品这一互动模式的推崇,这也与极简主义写作理念相一致。 展开更多
关键词 雷蒙德·卡佛 大教堂 叙事进程 自我主体 无文学
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