猪伪狂犬病病毒gG、gE和TK基因多重PCR检测方法的建立及应用

建立准确鉴别猪群伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)野毒株和基因缺失疫苗株高效多重PCR方法,对PRV gG、gE和TK基因保守区域设计合成特异性引物,优化反应体系和条件,建立多重PCR鉴别检测方法,对临床样品进行检测应用。结果成功建立了鉴别PRV gG、gE和TK基因缺失疫苗株和野毒株感染的多重PCR检测方法,该方法对PRV gG、gE和TK基因可进行特异性扩增,对猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒和猪副猪嗜血杆菌等相关病原均无扩增,对携带gG、gE和TK混合阳性质粒的最低检测限为2.5×10^(-5) ng/μL,具有良好的重复性。用该方法检测53份猪组织样品,检出PRV野毒感染的样品7份,与国标方法和单一PCR法检测结果符合率为100%。建立的猪伪狂犬病病毒野毒株和基因缺失疫苗株多重PCR鉴别检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,在生产中可快速、高效鉴别猪群PRV野毒感染和基因缺失疫苗免疫,可为PRV的快速鉴别检测、流行病学调查和防控提供技术支持。

氮添加和刈割条件下羊草光合-CO_(2)响应过程及模型比较研究

草原植物光合作用受氮添加和刈割等草原管理措施的影响。依托内蒙古草甸草原的氮添加(0、2、5、10、20和50 g N·m^(-2)·a^(-1))和刈割(刈割和非刈割)交互处理的野外控制试验,测定其优势物种羊草的光合-CO_(2)响应过程。探究直角双曲线模型、非直角双曲线模型、直角双曲线修正模型和Michaelis-Menten模型对叶片光合-CO_(2)响应曲线的拟合效果,以及光合特性对氮添加和刈割的响应。结果表明:非直角双曲线模型拟合的初始羧化效率和光呼吸速率最接近实测值;直角双曲线修正模型对CO_(2)饱和点、CO_(2)补偿点和最大净光合速率的拟合效果最好;直角双曲线修正模型的拟合优度最高;适度氮添加能提高羊草净光合速率、水分利用效率、最大净光合速率、初始羧化效率和CO_(2)饱和点并降低CO_(2)补偿点,提升羊草对CO_(2)的利用效率;随CO_(2)浓度的升高,氮添加浓度为20 g N·m^(-2)·a^(-1)并刈割的羊草净光合速率增幅较大,具有较高的最大净光合速率、CO_(2)饱和点、水分利用效率和较低的CO_(2)补偿点。综上,非直角双曲线模型和直角双曲线修正模型较适用于氮添加和刈割条件下羊草的CO_(2)响应曲线拟合,在内蒙古草原施氮20 g N·m^(-2)·a^(-1)并刈割最有助于提高羊草光合能力,有利于增大生态系统固碳量。

人类活动影响下蒙辽农牧交错区的生态系统服务空间格局

以蒙辽农牧交错区为研究区,通过InVEST模型,计算其2000年~2019年的产水量、土壤保持、碳固持和生物多样性保护等4种生态系统服务指标,分析各生态系统服务指标的空间分布格局及空间自相关性,探讨人类活动对蒙辽农牧交错带生态系统服务空间格局的影响。结果表明,2000年~2019年研究区产水量空间差异明显,呈现出东南高西北低的分布格局;20年间土壤保持呈现增加趋势;碳固持量整体偏低,生态系统多样性保护服务量较高,但也存在空间异质性。4种服务均呈现不同程度的空间自相关性,具有空间聚集性;2000年和2010年产水量的Moran's I分别为0.6765、0.6823,空间聚集性最强;生物多样性保护的Moran's I提高最明显,从2010年增长至大于0.7,具有较强的空间聚集性。

细辛多糖的提取工艺优化及细胞衰老保护作用

目的:优化细辛多糖的提取工艺,研究细辛多糖对血管平滑肌细胞衰老的保护作用。方法:Box-Behnken响应面法优化多糖提取参数,AKTA explorer 100层析系统分级纯化多糖,利用形态学观察、MTT法、衰老β-半乳糖苷酶染色法评估细辛多糖对依托泊苷诱导大鼠主动脉平滑肌细胞衰老的保护作用。结果:细辛多糖的最佳提取条件为:提取温度90℃,提取时间2.37 h,液料比40∶1 mL/g,最大多糖得率为10.20%。细胞实验中,细辛多糖预处理明显减轻依托泊苷诱导所致的细胞衰老形态变化,提高细胞活力,下调衰老β-半乳糖苷酶活性水平。结论:细辛多糖的最佳提取工艺被确定,细辛多糖可明显抑制依托泊苷诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞衰老和凋亡,对心血管疾病有保护作用。

强降雨作用下生态袋护坡入渗规律模型试验研究

为研究强降雨下使用生态袋支护边坡中植物的防护作用,在两种坡度下的强降雨边坡模型试验中分别设置有植被生态袋支护与无植被生态袋支护,测量强降雨过程中边坡不同位置(坡面,坡顶,坡底)的体积含水量变化与孔隙水压力分布,分析不同条件的强降雨作用下生态袋护坡的入渗规律。试验结果表明:①无植被生态袋支护不同位置的入渗速率排布为:坡面>坡顶>坡底。有植被生态袋支护不同位置入渗速率大都相近,并且整体速率快于同条件下的无植被生态袋支护。②有植被生态袋支护的体积含水量突变速率因根茎-土交界面流动带来更多入渗土体的雨水而变得更快。③有植被生态袋支护孔隙水压力整体提升速率因坡面较慢发展的暂态饱和区而变慢,孔隙水发展慢会有利于边坡的稳定,但此效果在坡比较高边坡并不明显。④结合实际工程与本次试验结果可以确定一个适用生态袋支护的坡度值范围,并提出生态袋支护下边坡受降雨危害的一些预警方法。研究结论对于使用生态袋的强降雨条件下边坡治理维护具有重要的理论指导价值与实际意义。

基于三轴试验生态袋加筋土邓肯-张模型参数研究

实际工程中,含水率的变化对土的性质影响较大,为了确定含水率对生态袋加筋土的力学特性和邓肯-张模型参数的影响规律,以不同含水率生态袋加筋土为研究对象,通过三轴压缩试验,研究生态袋加筋土邓肯-张模型参数随含水率的变化规律。试验结果表明:(1)不同含水率下生态袋加筋土应力-应变关系曲线均呈现双曲线特征,选取轴向应变为15%的偏应力作为破坏强度值,试验得出,破坏强度随着含水率的增加而减小;(2)含水率的变化对生态袋加筋土邓肯-张模型参数均有着不同程度的影响,随着含水率增加,黏聚力呈二次函数关系减小,内摩擦角、K值和n值均呈线性关系减小,破坏比变化区间范围为(0.828~0.990);(3)初始切线模量反映了土体在应力-应变关系曲线初始阶段抵抗变形的能力。生态袋加筋土的初始切线模量随着含水率的增长而减小,同时获得初始切线模量随含水率变化的经验公式;(4)通过对试样尺寸效应分析,表明了本文研究结论的适用性。上述研究结论为生态袋护坡工程的设计和数值模拟提供一定的理论依据和参数支持。

北五味子多糖提取工艺优化及其对LPS刺激巨噬细胞线粒体膜电位的保护作用

目的:提取北五味子多糖,研究其体外抗氧化活性及对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞线粒体膜电位的保护作用。方法:通过热水浸提法及四因素三水平正交分析法L9(3^4)提取北五味子多糖,对比北五味子多糖与维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(VE-TPGS)的体外抗氧化活性,利用LPS构建巨噬细胞损伤模型,通过活性氧(ROS)、JC-1细胞染色实验研究北五味子多糖对ROS的抑制作用及对细胞线粒体膜电位的保护作用。结果:北五味子多糖提取工艺为:料液比1∶40 g/mL,提取次数3次,提取时间3.0 h,提取温度为90℃,在此条件下多糖最高得率为10.72%,北五味子多糖总糖含量为84.28%±2.03%,葡萄糖含量为30.26%±1.12%;北五味子多糖清除DPPH自由基的IC50值为602.52μg/mL,清除羟自由基的IC50值为34.24μg/mL,北五味子多糖1600μg/mL时,总抗氧化能力达到(0.28±0.01)mmol/mg。细胞实验表明北五味子多糖能够降低LPS诱导巨噬细胞的活性氧的水平,抑制细胞线粒体膜电位下降。结论:北五味子多糖在体外具有较强的抗氧化活性,能够抑制LPS诱导巨噬细胞中活性氧水平进而发挥其对线粒体膜电位的保护作用。

一种新型两开关高增益DC/DC变换器

高增益DC/DC变换器被广泛应用于生产生活中,而现有电路拓扑的电压增益往往有限,为此提出了一种新型两开关高增益变换器。与现有变换器拓扑相比,所提拓扑在器件数量基本不变的情况下实现了更高的电压增益。分析了变换器的工作原理和相关性能,并与现有电路拓扑进行了比较分析,最后搭建了实验样机进行验证,实验结果证明了所提变换器的有效性和可行性。

北虫草多糖提取工艺优化及其细胞氧化损伤保护作用

目的:优化北虫草多糖的提取工艺,研究北虫草多糖对血管平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用L9(34)正交实验法优化多糖提取工艺,利用羟自由基法、DPPH自由基法和FRAP法检测北虫草多糖清除自由基的能力。在细胞水平上构建过氧化氢诱导细胞氧化损伤模型,采用MTT法、ROS细胞染色法评估北虫草多糖对过氧化氢诱导大鼠主动脉平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。结果:北虫草多糖的最佳提取条件为:提取温度90℃,料液比1∶30 g/mL,提取次数3次,提取时间3.0 h,最高得率为7.94%±0.16%。在多糖浓度为1.6 mg/mL时对羟自由基和DPPH自由基的清除能力以及总抗氧化能力分别为75.57%±1.39%、80.23%±2.75%和(0.22±0.01)mmol/mg。细胞实验表明北虫草多糖可显著抑制过氧化氢诱导细胞内ROS生成,提高细胞存活率。结论:成功优化北虫草多糖提取工艺,北虫草多糖具备良好的体外清除自由基的活性,对由氧化应激所导致的心血管疾病中起到很好的防治意义。

基于生态系统服务权衡的城市增长边界划定——以大连市为例

划定城市增长边界对协调城市扩张与生态环境保护之间的矛盾具有积极作用。以大连市为例,提出基于生态系统服务、多情景决策的城市增长边界划定流程,在评估2017-2019年产水量、土壤保持、碳固持、生境质量及生态休闲5种生态系统服务的基础上,利用有序加权平均(OWA)算子权衡生态系统服务并筛选生态红线保护区作为城市扩张限定边界的划定依据,最后,基于2010年、2015年和2020年大连市土地利用数据,通过GeoSOS-FLUS模型模拟2030年大连市城市增长边界。研究结果表明:2017-2019年大连市5种生态系统服务量年均值中等偏低,呈东北高、西南低的分布格局;生态红线保护区面积占研究区总面积的17.49%,连续分布于大连市东北部、分散分布于西南部;2030年城市增长面积占市域面积的15.71%,集中分布于该市西南部,划定结果呈现“组团型”城市网络,与大连市未来发展模式吻合。该研究可为大连市及其他类似城市增长边界的合理划定与管控提供借鉴。

不同坡比条件下生态袋防护边坡降雨入渗试验研究

以张家口某粉质黏土边坡为原型,设计了两种坡比(42°,59°)在特大暴雨(140.4mm/12h)条件下使用生态袋防护的降雨边坡模型试验。观测边坡各主要位置的体积含水率、孔隙水压力的变化趋势,分析不同坡比边坡的强降雨入渗规律以及生态袋对边坡的防护效果。结果表明:以坡体中相同位置达到饱和的时间为界,42°坡比比59°坡比的边坡饱和速度快32%;比较两种坡比条件下的入渗速率,均是坡面最快,坡底次之,坡顶最慢;生态袋在强降雨条件下能够起到防护作用,边坡各位置体积含水率的增长速率在降雨中后期都会受到不同程度的遏制,并且生态袋在较缓边坡的防护作用更好;强降雨条件下,较缓边坡坡底的体积含水率与孔隙水压力峰值变化率最大,说明较缓边坡的坡底更易受到雨水侵蚀,是需要进行滑坡防护的重点。

一种混合开关电容和开关电感的新型均衡电路

储能系统中相互串联的多个储能元件之间的容量差异,会导致整个储能系统的有效容量下降。基于开关电容的主动均衡电路可以有效应对容量差异。然而,传统开关电容均衡电路的均衡速度较慢,而串并联开关电容均衡电路则需使用较多的开关器件。针对该问题,本文提出了一种混合开关电容和开关电感的新型均衡电路,并对电路中开关电容和开关电感的工作模态进行了详细的分析。最后,搭建了新型均衡电路的样机及实验平台,验证了电路的可行性,并证明其与传统开关电容均衡电路相比具有更快的均衡速度。

生态袋包裹粉质黏土三轴试验研究

研究基于Mohr-Coulomb强度破坏准则,推导出生态袋张力所产生的附加粘聚力的计算公式,分析附加粘聚力影响因素。通过生态袋包裹粉质黏土进行三轴试验,试验结果表明:在不同的围压下,生态袋的包裹均提高了试样的抗剪强度;试样在有生态袋包裹的情况下,内摩擦角近乎不变,而粘聚力得到了提高,粘聚力的大小是未包裹生态袋试样的1.39倍,证实了生态袋的作用在于增加了一个附加粘聚力;通过理论公式计算得到的附加粘聚力数值与试验值相吻合,可以通过公式预测生态袋抗剪强度,为生态袋设计提供重要参考。

Banxia Xiexin Decoction(半夏泻心汤)Combined with Afatinib in Treatment of Advanced Gallbladder Cancer:Case Report and Literature Review

Gallbladder cancer(GBC)is a malignancy of biliary tract which is infrequent in developed countries but common in some specific geographical regions of developingCurrently,GBC has a low early diagnosis rate and an extremely poor prognosis,leading to major problems for treatment of GBC.Liver invasion and metastasis one of the main causes of its poor prognosis,with its average overall survival of 6 months.