肝星状细胞特异性Grk2基因敲除小鼠模型的制备及鉴定

目的利用Cre-loxP基因敲除技术建立肝星状细胞特异性G蛋白偶联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)基因敲除小鼠模型,为研究GRK2在肝星状细胞中的生物学功能提供动物模型基础。方法将loxP标记的Grk2基因小鼠(Grk2^(fl/fl))和Lrat-Cre工具鼠进行多次繁殖,建立肝星状细胞特异性Grk2基因敲除(Grk2^(ΔHSC))小鼠模型。观察和分析小鼠的生长繁殖情况;通过PCR反应鉴定flox和Cre基因型;免疫荧光双染检测肝星状细胞中GRK2表达;Western blot检测小鼠肝星状细胞及肺、脾、肾脏、心脏组织中GRK2蛋白表达;HE染色观察肝脏及肺、脾、心脏、肾脏组织学形态。结果成功鉴定Grk2^(ΔHSC)小鼠基因型;两组小鼠体质量、繁殖能力无明显差异;免疫荧光双染及Western blot结果表明,Grk2^(ΔHSC)小鼠的肝星状细胞中GRK2蛋白水平明显低于对照组小鼠,Grk2^(ΔHSC)小鼠肺、脾、肾脏和心脏组织中GRK2蛋白表达与对照组相比无明显变化;HE染色结果显示,Grk2^(ΔHSC)小鼠肝脏及主要组织结构与Grk2^(fl/fl)相比差异无显著性,可用于后续研究。结论本研究应用Cre-loxP技术成功构建了肝星状细胞特异性Grk2基因敲除小鼠,为进一步研究GRK2在肝脏中的作用提供了优良工具。

导杆可视化椎间孔成形技术治疗腰椎间盘突出症

目的探讨导杆可视化椎间孔成形技术治疗腰椎间盘突出症的临床效果。方法将76例采用经皮椎间孔镜髓核摘除术治疗的腰椎间盘突出症患者按照手术方法不同分为导杆可视组(采用导杆可视化椎间孔成形技术治疗,39例)和TESSYS组(采用经皮椎间孔内窥镜脊柱系统技术治疗,37例)。比较两组手术指标、疼痛VAS评分、ODI。结果患者均获得随访,时间6~13个月。住院时间两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。术中透视次数及手术时间导杆可视组少(短)于TESSYS组(P<0.05)。疼痛VAS评分及ODI两组术后3 d、末次随访均较术前降低(P<0.05);术后各时间两组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论导杆可视化椎间孔成形技术治疗腰椎间盘突出症可以减少术中透视次数,缩短手术时间,提高椎间孔成形效率和准确性,是一种安全高效的椎间孔镜技术。

非衍生化-QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定鱼肉中9种生物胺

目的建立一种基于Qu ECh ERS前处理技术快速测定鱼肉中9种生物胺(biogenic amines,BAs)含量的超高效液相色谱-串联质谱法,解决衍生化方法操作复杂、条件严格、重现性差等问题。方法样品经乙腈提取、C18和N-丙基乙二胺(primary secondary amine,PSA)净化后,采用Waters HSS T3色谱柱(100 mm×3.0 mm,1.8μm)进行分离,以0.5%甲酸水和0.1%甲酸乙腈为流动相体系进行梯度洗脱,流速为0.3m L/min。采用电喷雾电离(electrospray ionization,ESI)正离子模式,多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式检测,标准曲线外标法定量。结果9种生物胺化合物在1.0~100.0μg/L质量浓度范围内线性良好,相关系数(r^(2))在0.9959~0.9998之间,方法检出限(limits of detection,LODs)和定量限(limits of quantitation,LOQs)分别为0.02和0.05 mg/kg。3个浓度水平下,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)在1.2%~3.6%(n=6)之间,回收率在75.1%~105.6%之间。结论该方法操作便捷、分析时间短、准确度和灵敏度高,适用于鱼肉中9种生物胺化合物的测定。

高龄大鼠心室肌间质弹性纤维和胶原纤维的结构分布特征及其机制

目的探讨高龄大鼠心室肌间质弹性纤维和胶原纤维的结构分布特征及其机制。方法青年SD大鼠(24周)和高龄SD大鼠(104周)各5只,小动物超声检测心功能,采用改良Weigert弹力纤维染色、免疫组织化学、免疫荧光和Western blotting,分别检测心室肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维及蛋白、弹性纤维及蛋白、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达变化。结果高龄大鼠心室肌间质Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白丰富,包绕心肌细胞周围,与青年大鼠相比,高龄大鼠心室肌间质胶原蛋白含量明显增多(P<0.05)。高龄大鼠心室肌间质弹性纤维分布广泛,与青年大鼠比较,高龄大鼠心室肌间质弹性纤维数量和弹性蛋白水平均明显减少(P<0.05)。高龄大鼠心室肌MMP-2和MMP-9水平增高,且与弹性蛋白水平呈相互消长关系。高龄大鼠心室肌TIMP-2水平随年龄增加而降低。结论高龄大鼠心室肌间质胶原纤维数量和弹性纤维数量存在相互消长的关系。随年龄的增长大鼠心室肌间质TIMP-2和弹性纤维含量减少,同时胶原纤维与弹性纤维比例失调。

18F-FDG PET/CT双时相显像联合薄层CT扫描对孤立性肺结节的诊断价值

目的研究孤立性肺结节(SPN)18 F-脱氧葡萄糖(18 F-fluorodeoxyglucose,18 F-FDG)PET/CT影像特征,评价PET/CT双时相显像联合薄层CT扫描对SPN的诊断价值。方法34例SPN患者,其中男24例,女10例,年龄44~70岁。所有患者均同期行^18F-FDG PET/CT显像及延迟显像,且每个病灶均进行薄层CT扫描后重建,PET/CT图像由3位有经验的放射专业医师和核医学专业医师对病灶的形态学特点及最大标准摄取值(maximum standardized uptake value,SUV max)和SUV max变化率(ΔSUV)综合分析后做出诊断,所有患者最终均经组织病理学证实,并用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价SUVmax、ΔSUV和SUVmax联合薄层CT对SPN的诊断效能。结果34例患者中恶性病变24例,其中腺癌13例(1例细支气管肺泡癌),鳞癌7例,小细胞肺癌1例,3例病理类型不详;良性病变10例,其中结核2例、炎性假瘤3例、隐球菌感染1例、错构瘤1例,非特异性炎症3例,PET/CT诊断SPN的灵敏度、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值分别为:95.83%(23/24)、40%(4/10)、79.41%(27/34)、79.31%(23/29)和80%(4/5);SUV max对SPN诊断效能的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.721最佳诊断阈值为SUV max≥3.16(灵敏度81.63%,特异性71.20%,准确性78.48%),SUVmax+CT的AUC为0.856,其诊断SPN的灵敏度、特异性及准确性分别为87.73%、79.62%和83.65%,SUVmax+CT的AUC大于SUV max的AUC,差异有明显统计学意义(Z=4.38,P<0.05),ΔSUV的AUC为0.498,无诊断价值。结论^18F-FDG PET/CT显像对孤立性肺结节(SPN)的定性诊断有较高的灵敏度(95.83%)和准确性(79.41%),但特异性较低(40%),SUV max最佳诊断阈值为≥3.16,ΔSUV不能作为单独诊断SPN的指标,SUV max联合薄层CT形态学特征,可有效提高诊断SPN的准确性。

结合激光雷达观测与模式模拟的雾霾区域传输分析

以一次2015年1月3日至5日发生在中国中东部地区的严重雾霾事件为例,综合地基微脉冲激光雷达观测和WRF-Chem模式模拟的方法,揭示雾霾事件过程中的气溶胶颗粒物的跨区域传输特征。研究表明,徐州站点的激光雷达探测到1~3km的外来颗粒物输入,在两次输入过程中,对当地总的气溶胶光学厚度贡献分别为43%和69%。WRF-Chem模式能够有效模拟预报PM2.5浓度,但实测浓度为高值的区域出现低估现象。徐州地区在冬季易受来自山东西部、河南东部以及安徽北部的污染物的影响而引发雾霾,该区域需加强协作、联防联控。近年来我国冬季高空的风向具有规律性,且风速在逐年加快,雾霾从华北地区向华东地区的传输可能将变成常态。

我国货币政策传导的动态变化与新常态下调控优化

借助可变系数的结构VAR模型,考虑外生冲击的波动性,对1996—2016我国货币政策传导的动态变化进行了分析。结果显示,随着我国经济逐步进入新常态,货币冲击对GDP的短期和中期影响显著降低;比较而言,货币冲击对通货膨胀的影响要明显大于对经济增长的影响;利率变动对我国经济发展会产生较明显的负向冲击,但总体波动幅度不大。我国货币政策传导变化的主要原因在于我国经济结构等方面的深刻变化。

轮毂轴承摩擦力矩的影响因素分析及其优化研究

轮毂轴承摩擦力矩的大小直接影响传动系阻力的大小和整车油耗。以某前驱车型驱动轮轮毂为研究对象,对轮毂轴承摩擦力矩影响因素进行了理论研究,用台架试验定量分析了密封圈、负游隙、润滑脂三个关键因素对该轮毂轴承摩擦力矩的影响。试验结果表明,该轮毂轴承摩擦力矩有较大的改善空间。针对三个关键因素进行优化后,进行了NEDC整车综合油耗试验。结果表明:优化轮毂轴承后的整车油耗值降低了0.13L/100km。

生活垃圾焚烧烟气中重金属排放水平及影响因素分析

通过对浙江省生活垃圾焚烧炉排放烟气中重金属的监测,分析生活垃圾焚烧烟气中重金属排放水平。结果表明,汞及其化合物的检出率最高,为95.7%,其次为铬和锰,检出率均为60%,且在不同的焚烧炉中重金属排放浓度差异较大,检出率最低的为铊和镉,且排放浓度均较低;焚烧炉排放烟气中汞及其化合物、镉+铊及其化合物、锑+砷+铅+铬+钴+铜+锰+镍及其化合物排放浓度均低于国标排放限值,最大占标率分别为76%、4%、21.9%。焚烧烟气中的重金属含量与焚烧垃圾中的重金属含量有关,烟气通过废气处理设施,可有效地减少重金属等污染物的排放。

铌铁中硅的重量法测定影响因素探讨

通过对重量法测定铌铁中硅分析所使用的坩埚、熔剂用量、熔融温度等对测定结果的影响进行了试验研究,确定了重量法测定铌铁中硅的最佳分析条件,提高了铌铁中硅元素测定的准确度。利用优化后的分析条件对铌铁标样进行了准确度、精密度和比对试验,相对标准偏差<3%,测定值与认定值一致。

不同剂量右美托咪定联合舒芬太尼用于妇科腹腔镜术后静脉自控镇痛的效果和安全性

目的探讨不同剂量右美托咪定(Dex)联合舒芬太尼(SF)对妇科腹腔镜术后自控镇痛的效果和安全性。方法选择2020年1—12月腹腔镜妇科术后行患者自控静脉镇痛(PCIA)者95例,根据Dex剂量不同分为C组31例、D1组32例、D2组32例。3组术后均行PCIA,C组给予SF 1μg/kg,D1组和D2组在C组基础上分别联合Dex 0.5和1μg/kg。评价3组麻醉清醒后(T0)、术后2 h(T1)、术后6 h(T2)、术后12 h(T3)、术后24 h(T4)血流动力学变化,以及疼痛视觉模拟评分(VAS)、Ramsay镇静评分、舒适度评分(BCS);记录镇痛泵按压次数、有效次数、泵注总量;评价围术期总睡眠时间和睡眠障碍指数(SPI)评分,并观察不良反应情况。结果T1~T3时,D1组和D2组的收缩压、舒张压、心率及VAS评分低于C组,且D2组低于D1组(P<0.05)。D1组和D2组术后24 h镇痛泵按压次数、有效次数、泵注总量低于C组(P<0.05)。T1~T3时,D1组和D2组BCS、Ramsay镇静评分高于C组,且D2组高于D1组(P<0.05)。手术当日,D2组总睡眠时间较D1组、C组长,D1组较C组长;SPI评分较D1组、C组低,D1组较C组低(P<0.05);D1组和D2组术后谵妄、恶心呕吐、寒战发生率低于C组(P<0.05)。结论Dex可增强妇科腹腔镜术后的镇痛、镇静效果,且血流动力学稳定,有较高的睡眠质量与舒适度,推荐PCIA时Dex与SF联合使用的最佳剂量为1μg/kg。

蛋白酶体抑制剂MG132对急性髓系白血病细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨蛋白酶体抑制剂MG132对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞增殖与凋亡的影响。方法 qRT-PCR检测9株血液肿瘤细胞株内ADRM1 mRNA表达。利用shRNA干扰HL60细胞内ADRM1表达,将不同浓度的MG132作用于ADRM1干扰前后的HL60细胞24 h,CCK-8法检测各组细胞增殖与活力;Western blot检测各组细胞内ADRM1、UCH37蛋白表达;流式细胞仪分析不同浓度MG132作用下,HL60、NB4细胞凋亡情况。结果血液肿瘤细胞株内ADRM1 mRNA表达上调。成功构建ADRM1 shRNA与scrambled shRNA HL60细胞株。ADRM1基因干扰及给予MG132后,各实验组细胞增殖抑制,活力下降,此时细胞内ADRM1、UCH37蛋白表达下调。随着MG132浓度提高,HL60、NB4细胞凋亡增加;MG132对HL60细胞的促凋亡作用强于NB4细胞。结论血液肿瘤细胞株内ADRM1 mRNA过表达;ADRM1蛋白下调后,UCH37蛋白亦下调,细胞增殖抑制;MG132通过下调ADRM1、UCH37蛋白表达,诱导AML细胞凋亡,抑制细胞增殖与活力;MG132对不同分型AML细胞的促凋亡作用存在个体差异。

体外膜肺氧合用于羊水栓塞患者的临床进展

羊水栓塞(amniotic fluid embolism,AFE)是一种严重危害母婴健康的急性分娩期全身过敏反应综合征,体外膜肺氧合技术(extracorporeal membrane oxygenation,ECMO)是一项用于极危重患者呼吸循环体外支持的技术,可打破多器官衰竭的恶性循环,为病因可逆的AFE患者争取心肺功能恢复的时间,改善其预后。但由于ECMO在临床应用过程中存在出血、血栓栓塞、多脏器功能衰竭等多种并发症,而AFE的临床表现之一是弥散性血管内凝血和难以控制的产后出血,所以ECMO在AFE抢救中的应用仍存在一定争议。目前尚无相关文献提出ECMO应用于AFE患者的具体禁忌证,相关前瞻性临床研究的发展亦因AFE发病率低、起病急骤、进展迅速、死亡率高的特点而受到限制,建立于1990年的世界体外生命支持组织致力于收集全球ECMO治疗患者的医疗数据,其中与AFE相关的数据内容在未来可能给出建议。

双亚苄基哌啶RA190阻滞HL60细胞于G0/G1期并诱导细胞凋亡

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是具有明显遗传异质性的临床侵袭性疾病。靶向异常基因治疗是当前研究热点。黏附调节分子1(adhesion regulating molecule 1,ADRM1)亦被称为hRpnl3(human Rpn13),是26S蛋白酶体亚单位19S调节颗粒上两个主要泛素受体之一,决定26S蛋白酶体结构不对称性。该蛋白在多细胞真核生物内高度保守,在生命过程中可能发挥重要功能。有研究表明[1-3],ADRM1在肝癌、胃癌、急性白血病等多种恶性肿瘤中过表达,下调ADRM1蛋白水平可明显抑制肿瘤细胞增殖,促进其凋亡。因此,ADRM1可能成为肿瘤治疗靶点。

基于微流控方法提高致密油渗吸采出程度

致密储层成藏机理复杂、孔喉细小等特点,使得这类储层的开发极具挑战。自发渗吸是致密储层开采过程中的一个重要机理,值得重点关注。根据实际岩心的孔隙结构,利用聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)和玻璃薄片设计制作了模拟芯片,结合微流控泵以及高清晰显微镜,对捕捉的图片利用ImageJ软件进行数据处理,可以直接观察到渗吸过程的油水分布,并计算出渗吸采出程度。基于设计的两种孔径分布不同的芯片以及裂缝结构,研究了不同类型的表面活性剂对渗吸采出程度的影响。研究表明:平均孔喉半径越大的芯片,渗吸采出程度越高;裂缝的存在提高了渗吸效果;表面活性剂降低了流体的界面张力,减小黏附功和附加阻力,从而提高渗吸采出程度。

乡村振兴视角下富硒蔬菜产业发展升级路径研究——以江西省赣州市为例

2019年5月20日,习近平总书记实地考察赣州市于都县梓山富硒蔬菜产业园,对赣州市发展蔬菜产业给予充分肯定,并指出“一定要把富硒这个品牌打好”[1]。把赣南富硒蔬菜等特色农业打造成富民产业是赣南实施乡村振兴、提升农业国际竞争力的必然选择,不仅是富裕农民钱袋子、提升赣南区域品牌的需要,而且有利于健康国民的菜篮子、有效对接粤港澳大湾区健康消费需求,满足广大人民群众对健康、美好生活的向往。赣州市第六次党代会报告指出,要加强富硒农产品开发,打响赣南富硒农产品品牌,全域创建富硒绿色有机农产品基地。本文从乡村振兴视角出发,通过梳理全国绿色蔬菜产业发展的历程和趋势,立足赣南富硒蔬菜产业发展的现状和短板,总结了赣州市富硒蔬菜产业水平提升的路径。

价格因素对新能源汽车推广的影响研究

运用Bass模型探究价格因素对新能源汽车推广的影响。首先,在基础Bass模型中引入价格影响函数f 1、f 2,并利用价格数据确立价格影响函数中p r(t)表达式;其次,利用非线性最小二乘法(NLS)根据2006—2019年新能源汽车历史销量数据对基础模型和改进模型的拟合精度进行检验,得出引入f 2形式的Bass模型更适用于新能源汽车的市场规模研究;最后,使用改进模型对2020—2025年我国新能源汽车未来市场表现进行短期预测,并分析价格因素的影响机制。研究发现2020年我国新能源汽车累计年销量可实现500万辆的规划目标,2025年累计年销量却与规划目标相差甚远。价格优惠在新能源汽车2.0时期起到很好的促进作用,而3.0时期效用甚微。

湖南省某县稻田土壤重金属污染特征及来源解析

以湖南省某县稻田土壤样品为研究对象,分析Cd、Pb、Cr、As、Hg的污染特征及来源。利用单污染指数法、综合污染指数法、地累积指数法和潜在生态危害指数法评估稻田土壤的污染状况及生态风险,结合地统计信息绘图技术、条件推理树模型和主成分分析法研究湖南省某县稻田土壤中重金属的来源。结果表明:该县稻田土壤Cd、Pb、Cr、As、Hg的平均含量分别为0.729、49.9、79.2、19.8、0.244 mg·kg-1。综合污染指数大于3的重污染点位数占14.2%,轻污染及以上点位数占74.9%,说明该区域稻田土壤受到一定程度的重金属污染。综合潜在生态危害指数均值为84.9,总体处于轻微污染水平,其中Cd对综合潜在生态危害的贡献率为65.97%。结合空间差值研究发现高Cd分布区主要位于该县工业基地周边,结合条件推理树模型建立,发现该稻田中重金属Cd的来源主要与企业距离有关,此外,单位农田畜禽粪便承载量、距离工矿企业距离、反映投入品添加量的粮食均对Cd的污染具有贡献作用。结合主成分分析,Cd、Pb污染主要与工业污染源及交通运输有关,As、Hg污染主要与居民活动、生活及工业废弃物堆放及污灌有关,Cr主要与自然活动有关。湖南省该县重金属总体处于轻微污染水平,其中Cd是该农田生态风险的主要来源,Cd污染主要与工业污染源有关。

桃花坞木刻年画文化意象在服装设计中的应用

苏州桃花坞木刻年画是人类文明发展史上的一朵奇葩,是南方年画的代表,历史悠久,也是我国江南地区关于“年文化”的一个重要文化意象,具有深厚精神底蕴和艺术价值。通过分析不同时代背景下桃花坞木刻年画的题材风格,解读其多层次的文化意象,发掘其美学意义和多元性,将桃花坞木刻年画与时俱进,探索在现代服装设计中的装饰语言并得到合理的应用,让年画重返生活。

设施番茄和黄瓜田土壤中农药残留及其对蚯蚓的急性风险

为评价设施蔬菜田土壤中残留农药对蚯蚓的急性危害风险,在山东省济阳县蔬菜基地,分别选择番茄和黄瓜连作种植区,于产中、产后及后茬产中三个时期采集耕层土壤,应用超高效液相色谱串联质谱法评估土样中噻虫嗪、噻虫胺、多菌灵、吡虫啉、阿维菌素、噻唑膦、甲基异柳磷、克百威和三羟基克百威的残留,并通过风险商值法评价其对蚯蚓的急性风险。结果表明:在39个设施番茄土壤中,噻虫嗪、噻虫胺和吡虫啉的检出率(检出浓度均值)均较高,分别为90%(0.107mg·kg^-1dw)、 79%( 0.100mg·kg^-1dw)和 49%( 0.233mg·kg^-1dw);在 30个设施黄瓜土壤中,噻虫嗪(63%,1.18mg·kg^-1dw)和吡虫啉(57%,0.126mg·kg^-1dw)的检出率和检出浓度均值均较高。在95%的番茄土样及97%的黄瓜土样中,目标农药对蚯蚓的急性风险商值小于1。在3例土壤中发现风险商值大于1,包括2例吡虫啉和1例噻虫胺,应用风险商值逆推,吡虫啉和噻虫胺对蚯蚓的土壤安全阈值分别为1.07和0.593 mg·kg^-1dw。研究表明,所调查区域设施蔬菜土壤中目标农药对蚯蚓的急性风险总体较低,对于高风险农药应监测其土壤残留浓度,确保低于安全阈值。