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有氧运动调节circRNAs m6A甲基化修饰改善高脂饮食小鼠心脏病理性重塑研究
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作者 徐祖杰 马哲莹 +1 位作者 张冰 田振军 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2024年第2期63-76,共14页
目的:通过甲基化RNA免疫沉淀测序(MeRIP-seq)和转录组测序(RNA-seq)绘制N6-甲基腺苷(m6A)修饰图谱,探讨环状RNA(circRNAs)m6A甲基化修饰在有氧运动改善高脂饮食小鼠心脏病理性重塑中的作用。方法:C57BL/6J野生型小鼠随机分为正常饮食安... 目的:通过甲基化RNA免疫沉淀测序(MeRIP-seq)和转录组测序(RNA-seq)绘制N6-甲基腺苷(m6A)修饰图谱,探讨环状RNA(circRNAs)m6A甲基化修饰在有氧运动改善高脂饮食小鼠心脏病理性重塑中的作用。方法:C57BL/6J野生型小鼠随机分为正常饮食安静(normal diet-sedentary,ND-SED)组、正常饮食运动(normal diet-exercise,ND-EX)组、高脂饮食安静(high-fat diet-sedentary,HFD-SED)组和高脂饮食运动(high-fat diet-exercise,HFD-EX)组。ND-SED组和ND-EX组小鼠给予普通饲料喂养,HFD-SED组和HFD-EX组小鼠给予60%脂肪供能高脂饲料喂养12周后,ND-EX组和HFD-EX组小鼠进行8周有氧运动。运动干预结束后,检测小鼠体重、体脂含量和心功能。采血、取心脏,检测血清TC和TG含量,酶联免疫吸附测定检测心脏组织TG含量,RT-qPCR检测m6A调节因子,Western blot检测METTL3和FTO蛋白表达,比色法检测心脏组织m6A RNA甲基化含量,MeRIP-seq检测HFD-SED组和HFD-EX组小鼠心脏circRNAs m6A甲基化修饰,SRAMP预测发生m6A甲基化差异和表达差异的circRNA甲基化位点,MeRIP-qPCR验证其m6A水平。结果:8周有氧运动显著降低了高脂饮食小鼠体重和体脂含量,提高了左心室射血分数和短轴缩短率,抑制心脏纤维化和脂质沉积,改善心脏病理性重塑。有氧运动可以显著降低高脂饮食小鼠心脏m6A甲基化水平,甲基转移酶METTL3在其中发挥了重要作用。MeRIP-seq显示,HFD-SED组和HFD-EX组小鼠心脏受m6A修饰的circRNAs大部分都只具有1个m6A修饰位点,且m6A circRNAs主要来自重叠区和外显子。与HFD-SED组比较,HFD-EX组小鼠心脏有13个circRNAs发生了甲基化上调,19个circRNAs发生了甲基化下调,两组差异甲基化的circRNAs大部分来源于重叠区,长度主要富集在1~10000 bps,大部分位于1号、7号和13号染色体上。RNA-seq显示,与HFD-SED组比较,HFD-EX组小鼠心脏有40个circRNAs发生差异表达,其中22个显著上调,18个显著下调。MeRIP-seq和RNA-seq联合分析发现,只有circRNA_4614|Chr7:127484542_127486889_+(以下简称“circRNA_4614”)同时发生m6A甲基化差异和表达差异,其m6A水平和表达水平均显著上调。SRAMP预测显示,circRNA_4614存在8个潜在的m6A位点,其中1个位点具有非常高置信度,2个位点具有高置信度。MeRIP-qPCR验证显示,与HFD-SED组比较,HFD-EX组小鼠心脏circRNA_4614的m6A水平显著上调,其趋势与MeRIP-seq测序结果一致。结论:有氧运动可以显著降低高脂饮食小鼠心脏m6A甲基化水平,调节心脏circRNAs表达谱和m6A修饰谱。circRNA_4614介导的m6A修饰在有氧运动改善肥胖性心脏重塑中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 环状核糖核酸 有氧运动 N6-甲基腺苷甲基化 肥胖 心脏病理性重塑
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Trx1 抑制内质网应激参与运动改善心梗后骨骼肌质量减少 被引量:4
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作者 蔡梦昕 齐文溥 +1 位作者 徐祖杰 田振军 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2020年第11期73-83,共11页
目的:探讨运动调节硫氧还蛋白1(thioredoxin,Trx1)表达改善心肌梗死(心梗,myocardial infarction,MI)诱导的骨骼肌氧化应激和内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),抑制骨骼肌细胞凋亡,改善骨骼肌质量减少的可能机制,为研究运... 目的:探讨运动调节硫氧还蛋白1(thioredoxin,Trx1)表达改善心肌梗死(心梗,myocardial infarction,MI)诱导的骨骼肌氧化应激和内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),抑制骨骼肌细胞凋亡,改善骨骼肌质量减少的可能机制,为研究运动改善心衰诱导骨骼肌萎缩的病理分子机制及筛选相关治疗靶点提供实验依据。方法:3月龄C57B6L小鼠,随机分为假手术组(Sham)、心梗组(MI)和心梗运动组(ME),每组8只。MI和ME组小鼠结扎左冠状动脉前降支建立心梗模型,Sham组小鼠只开胸不结扎,作为对照。ME组小鼠进行6周有氧运动训练。训练结束后,检测胫骨前肌相对质量、肌细胞横截面积、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和抗氧化能力,检测肌组织肌肉环指蛋白1(muscle ring finger-1,MuRF1)、肌萎缩盒F因子(muscle atrophy F-box,MAFbx)、Trx1、硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin interacting protein)和ERS相关蛋白表达及细胞凋亡现象。H2O2处理C2C12细胞,进行Trx1重组蛋白(TXN)或/和Trx1抑制剂(PX-12)干预,检测ERS相关蛋白表达和细胞凋亡水平。结果:与Sham组相比,MI组小鼠胫骨前肌肌肉相对质量和细胞横截面积显著下降(P<0.01),ROS和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平显著升高(P<0.01),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性显著降低(P<0.01),MuRF1、MAFbx、TXNIP、ASK1、GRP78、磷酸化IRE1α、ATF6、CHOP、cleaved Caspase12(c-Casp-12)和JNK蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01),Trx1蛋白表达和Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.01),TUNEL阳性细胞显著增加(P<0.01);与MI组相比,运动显著增加心梗小鼠肌肉相对质量(P<0.01)和细胞横截面积(P<0.05),降低ROS和MDA水平(P<0.05),提升SOD活性(P<0.01),下调MuRF1、MAFbx、TXNIP、ASK1、磷酸化IRE1α、ATF6、ATF4、CHOP和c-Casp-12蛋白表达(P<0.05,P<0.01),上调Trx1和GRP78蛋白表达(P<0.01),降低骨骼肌细胞凋亡现象(P<0.05)。正常细胞PX-12或TXN干预可显著上调ATF6、GRP78和c-Casp-12蛋白表达(P<0.01);H2O2可显著增加C2C12成肌细胞TXNIP、ATF6、GRP78、CHOP和c-Casp-12蛋白表达和细胞凋亡水平(P<0.01);TXN干预可降低H2O2处理细胞中ATF6、GRP78和CHOP蛋白表达和细胞凋亡水平(P<0.01),PX-12干预显著增加H2O2处理细胞凋亡水平(P<0.01),降低TXN的有效保护效应。结论:有氧运动可遏制心梗诱导的骨骼肌质量减少现象,其机制可能与降低蛋白降解,上调Trx1表达改善ERS水平抑制细胞凋亡有关。Trx1改善ERS水平可能是其抑制细胞凋亡的途径之一。 展开更多
关键词 内质网应激 硫氧还蛋白1 骨骼肌 心肌梗死 有氧运动
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氢水干预对反复力竭运动大鼠骨骼肌氧化应激损伤及细胞自噬的影响 被引量:2
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作者 徐祖杰 谷红娣 田振军 《陕西师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期116-121,共6页
为探讨氢水干预对反复力竭运动大鼠骨骼肌氧化应激损伤及细胞自噬的影响,将3月龄雄性SD大鼠30只,体重180~210g,随机分为安静组(C),力竭对照组(EX),力竭氢水组(EH),每组10只。EX和EH组均进行4周反复力竭运动,运动初始速度为15m/min,每5mi... 为探讨氢水干预对反复力竭运动大鼠骨骼肌氧化应激损伤及细胞自噬的影响,将3月龄雄性SD大鼠30只,体重180~210g,随机分为安静组(C),力竭对照组(EX),力竭氢水组(EH),每组10只。EX和EH组均进行4周反复力竭运动,运动初始速度为15m/min,每5min递增5m/min,至35m/min,运动直至力竭,5d/周,共4周。EH组大鼠于运动前30min给予氢水干预,记录大鼠力竭运动时间。透射电子显微镜观察骨骼肌超微结构变化。检测血清SDH和CK活性,骨骼肌SOD活性、MDA含量和T-AOC水平。Western blotting方法检测骨骼肌mTOR、pmTOR、LC3B-2和P53等自噬相关蛋白表达。结果表明:与EX组比较,氢水干预后,EH组骨骼肌组织超微结构损伤和线粒体肿胀程度均明显减轻,力竭运动时间显著延长(P<0.05)。血清SDH活性显著升高(P<0.05),CK活性显著降低(P<0.05),骨骼肌SOD活性和总抗氧化能力显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.01),mTOR和p-mTOR蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01),LC3B-2和P53蛋白表达显著降低(P<0.05)。氢水干预可显著改善反复力竭运动导致的大鼠骨骼肌超微结构损伤、氧化应激损伤及细胞过度自噬现象,提高骨骼肌抗氧化能力和运动耐力。 展开更多
关键词 氢水 力竭运动 骨骼肌 氧化应激 自噬
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骨骼肌心磷脂酰基转移酶1的运动强度变化特征及其对氧化应激和线粒体自噬的影响 被引量:2
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作者 徐祖杰 田振军 《中国体育科技》 CSSCI 北大核心 2020年第1期75-80,F0003,共7页
目的:探讨骨骼肌心磷脂酰基转移酶1(acyl-CoA:lysocardiolipin acyltransferase-1,ALCAT1)表达变化的运动强度特征及不同强度运动对骨骼肌氧化应激和PINK1/Parkin介导的线粒体自噬的影响,为运动抑制ALCAT1重塑的强度筛选和耐力训练诱导... 目的:探讨骨骼肌心磷脂酰基转移酶1(acyl-CoA:lysocardiolipin acyltransferase-1,ALCAT1)表达变化的运动强度特征及不同强度运动对骨骼肌氧化应激和PINK1/Parkin介导的线粒体自噬的影响,为运动抑制ALCAT1重塑的强度筛选和耐力训练诱导线粒体自噬的发生机制提供实验依据。方法:雄性C57BL/6J野生型小鼠,随机分为安静对照组(C组)、60% VO2max运动强度组(SE组)、76% VO2max运动强度组(ME组)和85% VO2max运动强度组(HE组),每组8只。SE组以8 m/min、ME组以12 m/min、HE组以18 m/min进行跑台运动,坡度为0°,60 min/天,5天/周×4周。4周运动结束24 h后取材,分离腓肠肌,RT-qPCR检测骨骼肌ALCAT1 mRNA表达,Western blotting检测骨骼肌ALCAT1、MFN2、PINK1、Parkin、LC3、P62、SOD1和SOD2蛋白表达,酶活性试剂盒检测骨骼肌氧化应激指标,线粒体呼吸仪测定骨骼肌线粒体呼吸功能。结果:1)与C组比较,SE、ME和HE组小鼠骨骼肌ALCAT1 mRNA与蛋白表达和P62蛋白表达均显著降低,MDA含量、MFN2蛋白表达、LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、ST3和RCR值均显著升高;2)与C组比较,SE和ME组小鼠骨骼肌PINK1、Parkin、SOD1、SOD2的蛋白表达以及T-AOC含量、T-SOD活性均显著增加,HE组不具有显著性;3)与ME组比较,HE组小鼠骨骼肌ALCAT1 mRNA与蛋白表达和MDA含量均显著升高,PINK1、Parkin、SOD1、SOD2蛋白表达和T-AOC含量、T-SOD活性以及ST3、RCR值均显著降低。结论:1)骨骼肌ALCAT1表达变化呈现明显的运动强度特征,4周不同强度运动均可抑制骨骼肌ALCAT1表达,提高线粒体呼吸功能,其中76% VO2max运动强度效果更显著;2)60% VO2max和76% VO2max运动强度可以激活骨骼肌氧化-抗氧化系统,提高PINK1/Parkin介导的线粒体自噬,85% VO2max运动强度可显著增加骨骼肌氧化应激水平,但对骨骼肌抗氧化能力和PINK1/Parkin介导的线粒体自噬无显著影响。 展开更多
关键词 运动 骨骼肌 心磷脂酰基转移酶1 氧化应激 线粒体自噬
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精表处预养护沥青路面耐磨耗性能研究 被引量:3
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作者 谢安 严智英 +3 位作者 邓志刚 廖根宝 徐祖杰 黄维蓉 《科技通报》 2021年第1期99-104,共6页
为研究新型精表处预养护沥青路面的耐磨耗性能,以自制高性能胶结料和三种粒径的玄武岩为原材料研究了不同集料粒径、油石比以及胶结料洒布量对精表处沥青路面层耐磨性能的影响,对不同试件进行4个周期的磨耗试验,测定了不同磨耗周期下精... 为研究新型精表处预养护沥青路面的耐磨耗性能,以自制高性能胶结料和三种粒径的玄武岩为原材料研究了不同集料粒径、油石比以及胶结料洒布量对精表处沥青路面层耐磨性能的影响,对不同试件进行4个周期的磨耗试验,测定了不同磨耗周期下精表处试件的质量损失、构造深度和摩擦系数。试验结果表明,经过精表处技术处理后的路面改善效果较好,精表处试件经过4个周期磨耗后表面状态仍较好,具有较好的抗滑、耐磨性能。推荐2#玄武岩细集料(粒径0.3~1.18 mm)油石比为1∶(2~3),胶结料洒布总量为0.65 kg/m2;3#(粒径0.6~2.36 mm)油石比为1∶(3~4),胶结料洒布总量为0.75 kg/m2;1#玄武岩细集料(粒径1.18~4.75 mm)油石比为1∶(4~5),胶结料洒布总量为0.95 kg/m2。 展开更多
关键词 早期病害 预养护 精表处 沥青路面
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The Effect of Alumina Content on Fracture Property of All-ceramics Zirconia
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作者 张东姣 LIAO Yunmao +4 位作者 LI Aijie1 xu zujie SONG Dawei WANG Qi 陈新民 《Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science)》 SCIE EI CAS 2013年第1期73-78,共6页
The purpose of the present study was to evaluate the effect ofA1203 content on the fracture property of all-ceramics ZrO2. To improve the all-ceramics ZrO2 restoration mechanics properity ,96 samples containing 0,5,10... The purpose of the present study was to evaluate the effect ofA1203 content on the fracture property of all-ceramics ZrO2. To improve the all-ceramics ZrO2 restoration mechanics properity ,96 samples containing 0,5,10 and 15 wt% of A1203 particles were prepared by cold isostatic pressing (200 MPa) and 1 550 ℃ sintered .The phase was analyzed by X-ray diffraction analysis and the bulk densities of the samples were made using Archimedes principle. Samples were randomly divided into four groups. In each group, 24 specimens were prepared so that the angle between notch and specimen's long axis is 90° and 60°. Notch depths were 1 mm for all samples. Samples were loaded with three-point bending method. 90° cut samples were used to measure fracture toughness while 60°cut samples were used to observe fracture curve by taking points on the fracture extension path under microscope, plotting points on coordinates, generating fitting curve by software "Origin", and analyzing the microstructure of the specimen fracture surfaces by scanning electron microscopy (SEM).The results show that the increment ofA1203 has insignificant effect on the densification of all-ceramic ZrO2.XRD analysis shows that the specimen is comprised of t-ZrO2 and a- A1203 before fracture while fracture surface is m-ZrO2, t-ZrO2 and a-A1203. ZrO2 containing 10% A1203 has the optimum mechanical properties and unconspicuous crack propagation and distribution. The observations may provide a reference for the materials selection, shaoe design, and production orocess of all-ceramic crown and bridge. 展开更多
关键词 ZRO2 A1203 all-ceramics NOTCH fracture load fracture curve microstructure
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