韭菜根系分泌物对苦瓜枯萎病菌的化感作用

为探究韭菜根系分泌物对苦瓜枯萎病菌的化感作用,本研究以‘山东雪韭6号’韭菜和苦瓜枯萎病菌为试验材料,水培法收集韭菜根系分泌物,采用菌丝生长速率和孢子萌发法研究韭菜根系分泌物对苦瓜枯萎病菌的化感作用;利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)鉴定根系分泌物组成成分,筛选可能的主效化感物质,进一步通过体外抑菌试验验证其化感作用,明确主效化感物质。结果表明,随着韭菜根系分泌物浓度的升高,苦瓜枯萎病菌的菌落直径和孢子萌发数均呈先降后升的趋势,当分泌物浓度为3.22 mg/mL时,抑制作用最大,满足化感作用低浓度促进、高浓度抑制的特性。通过GC-MS鉴定出韭菜根系分泌物中的主要成分为酚类、酯类、烷烃类、醇类、烯类、芳香类,可能的化感物质为邻苯二甲酸二丁酯、2,4-二叔丁基苯酚、2,2’-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚)。通过体外抑菌试验证实这3种物质对苦瓜枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发都有不同程度的化感抑制作用,且抑菌效果为2,4-二叔丁基苯酚>邻苯二甲酸二丁酯>2,2’-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚),明确其为化感物质。由此可知,韭菜根系分泌的主效化感物质对苦瓜枯萎病菌有显著的化感抑制作用,这为苦瓜间套轮作韭菜防控苦瓜枯萎病和研制植物源抑菌剂提供了理论依据和技术支撑。

超临界流体色谱法和高效液相色谱法分离肾上腺素对映异构体

采用高效液相色谱(HPLC)法与CO_2超临界流体色谱(SFC)法,均使用Chiralpak AD-H色谱柱,建立并比较了2种肾上腺素对映体的拆分方法。HPLC法以正己烷∶异丙醇∶甲醇∶三氟乙酸∶乙醇胺(88∶7∶5∶0.2∶0.1)为流动相,SFC法以CO_2∶甲醇(含0.2%三氟乙酸和0.1%乙醇胺)(90∶10)为流动相,检测波长均为280 nm。分别考察了改性剂种类及比例变化对拆分的影响,推测了2次出峰顺序反转现象的机制,并测定了3批肾上腺素样品中的对映体含量。肾上腺素及其对映异构体在HPLC法与SFC法中的分离度为2.95和1.86,均在0.01~0.10 mg/ml范围内线性关系良好。甲醇作为有机改性剂有利于对映体的洗脱和分离;酸碱改性剂同时加入可获得更佳的分离效果。HPLC和SFC法均可应用于肾上腺素对映异构体的拆分及定量,其中SFC法更加简便、高效、绿色环保。