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The comparison of the efficacy of swine FMD vaccine emulsified with oil adjuvant of ISA 201 VG or ISA 206 VG 被引量:4
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作者 Dong Li Chunxue Zhou +6 位作者 Daliang She Pinghua Li Pu Sun xingwen bai Yingli Chen Baoxia Xie Zaixin Liu 《Journal of Biosciences and Medicines》 2013年第3期22-25,共4页
The Seppic Company developed a new adjuvant Montanide ISA 201 VG, the upgraded version of Montanide ISA 206 VG, which keep the advantage and added some chemical components on the basis of ISA 206 to improve the cellul... The Seppic Company developed a new adjuvant Montanide ISA 201 VG, the upgraded version of Montanide ISA 206 VG, which keep the advantage and added some chemical components on the basis of ISA 206 to improve the cellular responses. The aim of the study is to compare the efficacy of swine FMD (foot-and-mouth) vaccine emulsified with oil adjuvant of ISA 201 or ISA 206 respectively. The pigs were vaccinated with FMD vaccine emulsified with inactive FMD type O antigen and adjuvant ISA 201 or ISA 206 respectively, according to 2.0 ml (1/1 dose), 0.67 ml (1/3 dose), 0.22 ml (1/9 dose) to calculate their PD50. The sera were collected from the vaccination of the day 0, 3, 7, 14, 21, 28 and the ELISA FMD type O antibody were detected. Furthermore, the PD50 were calculated after the pigs were challenged with virulent FMDV type O on 28 days post vaccination. The ELISA antibody titers of 201vaccine were significantly higher than that of 206 (except the third time). The fifty percent of protection dose (PD50) of 201 vaccine (PD50 = 15.59) was higher than that of 206 vaccine (PD50 = 10.05). The above data showed that the efficacy of the FMD vaccine emulsified with ISA 201 was better than which with ISA 206. 展开更多
关键词 SWINE FMD VACCINE ADJUVANT ISA 201 ISA 206 Immune EFFICACY
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一株O型口蹄疫病毒在C57BL/6小鼠和原代细胞的传代及其全序的测定和分析 被引量:3
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作者 龚婷 黄书伦 +10 位作者 查晶晶 孙普 马雪青 白兴文 袁红 曹轶梅 李坤 张婧 卢曾军 刘在新 李平花 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1413-1420,共8页
【目的】旨在成功建立FMDVC57BL/6小鼠的实验感染模型。【方法】采用体内和体外循环适应传代的方法,选取一株对C57BL/6小鼠不敏感FMDVO/HK/CHA/99MF4,将其在C57BL/6小鼠(体内)和胎猪肾原代细胞FPK(体外)进行多次循环适应传代。【结果】... 【目的】旨在成功建立FMDVC57BL/6小鼠的实验感染模型。【方法】采用体内和体外循环适应传代的方法,选取一株对C57BL/6小鼠不敏感FMDVO/HK/CHA/99MF4,将其在C57BL/6小鼠(体内)和胎猪肾原代细胞FPK(体外)进行多次循环适应传代。【结果】成功获得一株对C57BL/6小鼠敏感的FMDVO/HK/CHA/99MF4C5株。【结论】本研究成功建立了FMDV突变株感染C57BL/6小鼠的实验动物模型,为未来FMD疫苗效力的评估和致病性相关的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 小鼠 细胞 循环传代 全序的测定与分析
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口蹄疫病毒非结构蛋白3AB双抗体夹心ELISA方法的建立 被引量:2
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作者 付元芳 何伟 +10 位作者 孙普 杨林 包慧芳 曹轶梅 白兴文 李平花 李冬 陈应理 刘磊 卢曾军 刘在新 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2357-2366,共10页
抗原纯净度是口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)灭活疫苗质量检验的一项重要内容,一般采用疫苗2–3次免疫动物后,检测非结构蛋白(Non-structural protein,NSP)抗体是否阳转,判断疫苗抗原的纯净度。文中旨在建立定量检测FMD灭活疫苗抗... 抗原纯净度是口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)灭活疫苗质量检验的一项重要内容,一般采用疫苗2–3次免疫动物后,检测非结构蛋白(Non-structural protein,NSP)抗体是否阳转,判断疫苗抗原的纯净度。文中旨在建立定量检测FMD灭活疫苗抗原中NSP 3AB含量的ELISA方法,为疫苗质量控制提供参考方法。利用口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)NSP 3A单克隆抗体和辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)标记的3B单克隆抗体,建立定量检测NSP 3AB含量的双抗体夹心ELISA检测方法。采用原核表达并纯化的3AB蛋白作为标准品,标准品系列稀释,绘制标准曲线,以标准品与未加抗原的阴性对照吸光值(OD)的比值大于2.0的标准品最低浓度为最低检测限。标准品浓度介于4.7–600.0 ng/mL之间时,测得的OD值与浓度呈线性相关,回归曲线呈直线,相关系数R2=0.99,确定最低检测限为4.7 ng/mL。检测12份未纯化灭活抗原中3AB蛋白含量介于9.3–200.0 ng/mL之间;而纯化后的病毒抗原中3AB蛋白残留量低于最低检测限;33份来自不同厂家的成品疫苗抗原中9份疫苗抗原3AB蛋白含量在9.0–74.0 ng/mL之间,其余24份疫苗抗原中3AB蛋白残留量低于最低检测限。检测3AB蛋白含量的双抗体夹心ELISA方法能够特异、敏感地检测疫苗抗原中的3AB蛋白含量,为疫苗质量控制与纯净度检验提供了一种可供选择的检测方法。 展开更多
关键词 口蹄疫 非结构蛋白 定量ELISA 疫苗抗原纯净度
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3A蛋白104–115位氨基酸缺失口蹄疫A型标记病毒的构建 被引量:1
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作者 李平花 马雪青 +5 位作者 袁红 袁子文 孙普 白兴文 卢曾军 刘在新 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期907-915,共9页
【目的】构建一株含3A非结构蛋白104–115位氨基酸缺失的口蹄疫A型标记病毒,分析其生物学特性和发展标记疫苗的潜力。【方法】采用融合PCR技术,在当前流行毒株A/Sea-97/CHA/2014全长感染性克隆p QAHN中引入3A104–115位氨基酸的缺失,构... 【目的】构建一株含3A非结构蛋白104–115位氨基酸缺失的口蹄疫A型标记病毒,分析其生物学特性和发展标记疫苗的潜力。【方法】采用融合PCR技术,在当前流行毒株A/Sea-97/CHA/2014全长感染性克隆p QAHN中引入3A104–115位氨基酸的缺失,构建全长重组质粒。全长质粒经NotI线化后转染表达T7RNA聚合酶的稳定细胞系,拯救标记病毒。RT-PCR、序列分析、间接免疫荧光和Western blotting鉴定标记病毒。噬斑表型和一步生长曲线分析标记病毒的生物学特性,并用实验室开发的针对3A优势表位(AEKNPLE)的阻断ELISA方法分析其区分亲本和标记病毒感染的动物。【结果】成功拯救到一株含3A 104–115位氨基酸缺失的口蹄疫A型标记病毒,3A表位的缺失没有影响标记病毒的噬斑表型和一步生长曲线。3A单抗阻断ELISA可以明显区分标记病毒和亲本病毒感染的动物。【结论】本研究构建的3A蛋白104–115位氨基酸缺失的标记病毒可以作为发展口蹄疫鉴别诊断疫苗的候选毒株,用于我国未来口蹄疫A型的有效防控。 展开更多
关键词 3A蛋白 104-115位氨基酸缺失 口蹄疫A型 标记病毒 构建
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