肺炎克雷伯菌噬菌体裂解酶的研究进展

随着耐药性肺炎克雷伯菌的增多,噬菌体的潜力逐步被发掘。裂解酶在噬菌体裂解宿主菌时起到了重要作用,作为外源纯化蛋白使用时,防控效果更为显著。现有研究中,针对革兰阳性菌噬菌体裂解酶的表达更多,因其不具有革兰阴性菌细胞壁外层的肽聚糖层,而对肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌等革兰阴性菌的噬菌体裂解酶研究仍较为罕见。但已有研究表明,多种策略可以克服其肽聚糖层带来的阻碍。本文主要综述了近年来用于防控肺炎克雷伯菌的噬菌体裂解酶及其作用机制和防控优势,旨对其后续研究提供思路。

不同提取方式对山楂果渣可溶性膳食纤维结构及功能特性的影响

山楂提取多酚后剩余果渣中含有丰富的膳食纤维。为了有效利用山楂资源,该文采用微波辅助酶解法(microwave-enzymatic extraction of soluble dietary fiber,MSDF),酶解法(enzymatic extraction of soluble dietary fiber,ESDF),碱法(alkaline extraction of soluble dietary fiber,NSDF)提取山楂果渣可溶性膳食纤维(water-soluble dietary fiber,SDF),并比较3种提取方式对SDF的理化、结构和功能特性的影响。结果表明,MSDF与ESDF单糖成分以半乳糖醛酸和阿拉伯糖为主,NSDF葡萄糖含量最高,其次是半乳糖醛酸。采用傅里叶红外光谱、X-射线衍射和扫描电镜分析发现,3种方法获得的SDF结构都符合天然纤维素Ⅰ型结晶结构,糖类特征官能团。MSDF质地疏松,呈雪花状,更有利于膳食纤维的保水性、吸附性。MSDF的DPPH自由基清除率半抑制浓度为0.07 mg/mL,持水力和持油力分别为2.69 g/g和0.51 g/g,优于ESDF和NSDF。体外降糖降脂实验表明,3种方法提取的山楂SDF都具有较好的α-淀粉酶的抑制能力,胆固醇吸收能力和牛磺胆酸钠结合能力等,其中MSDF降血糖、降血脂效果优于其他2种方法制备的SDF。因此,微波辅助酶法与酶法和碱法相比,具有SDF提取率高,DPPH抗氧化性高,功能特性好等优点。该研究结果可为阐明山楂果渣膳食纤维理化特征及功能特性提供数据支撑,对山楂高附加值产品开发具有重要意义。

山楂多酚微胶囊制备及理化性质分析

为改善山楂多酚稳定性,提高生物利用率,以β-环糊精、乳清分离蛋白和阿拉伯胶为复合壁材,山楂多酚为芯材,通过喷雾干燥法制备了山楂多酚微胶囊,分析了微胶囊的粒径、表观形貌、稳定性、缓释性及抗氧化性。结果表明,最佳制备工艺为芯壁比1:3(v/v),进风温度165℃,乳化时间11.4 min,在此优化条件下山楂多酚微胶囊的包埋率为94.45%±1.03%,载药量为17.99%±0.20%。微胶囊平均粒径为6.77μm,颗粒完整,近似球形,在胃液中具有良好的稳定性,肠液中有良好的释放性能,模拟胃液消化2 h后山楂多酚与山楂多酚微胶囊释放率分别为13.38%和9.75%,肠液消化6 h后释放率分别为95.99%和72.53%。包埋后抗氧化性和稳定性均有明显提升,山楂多酚对DPPH、OH、O_(2)^(-)自由基清除率IC50值分别为12.669μg/mL,1.131、0.581 mg/mL;山楂多酚微胶囊分别为0.939μg/mL,0.129、0.546 mg/mL。光照10 d,山楂多酚与山楂多酚微胶囊的保留率分别为64.99%和86.74%,温度80℃时的保留率分别为70.77%和88.77%,无包装下贮藏28 d的山楂多酚及山楂多酚微胶囊保留率分别为73.48%和91.15%。以上结果表明微胶囊技术可以改善山楂多酚的稳定性及缓释性,提高山楂多酚抗氧化性,可作为改善山楂多酚加工稳定性的有效方法。

地衣芽孢杆菌复合桑叶提取物对虾夷扇贝的益生作用

为探明地衣芽孢杆菌复合桑叶提取物对虾夷扇贝的益生作用,试验共设4个投喂组:对照组中虾夷扇贝投喂基础饲料,地衣芽孢杆菌添加组中投喂添加地衣芽孢杆菌的基础饲料,桑叶添加组中投喂添加桑叶提取物的基础饲料,联合添加组中投喂同时添加地衣芽孢杆菌、桑叶提取物2种物质的基础饲料。投喂试验共持续30 d,每10 d取样测定虾夷扇贝的消化酶和免疫酶活性。投喂试验结束后,通过注射哈维氏弧菌的方式对各组虾夷扇贝进行攻毒试验。投喂试验结果显示,联合添加组虾夷扇贝的消化酶及免疫酶活性最高,而对照组最低。表明联合添加组虾夷扇贝的消化能力、磷酸酶响应能力以及抗氧化能力明显高于其他处理组。攻毒试验结果显示:联合添加组虾夷扇贝的累积死亡率最低,对照组虾夷扇贝的累积死亡率最高,地衣芽孢杆菌添加组和桑叶添加组虾夷扇贝的累积死亡率差异不显著;联合添加组虾夷扇贝消化道中弧菌最少,对照组虾夷扇贝消化道中弧菌最多,联合添加组虾夷扇贝对弧菌的抑制效果更明显。试验结果表明,地衣芽孢杆菌与桑叶提取物联合施用时协同增效,对虾夷扇贝的益生作用更明显。

常见海洋动物皂苷生物活性的研究进展

皂苷是一类甾体或三萜的糖苷类化合物,以疏水性三萜或甾醇为主链,亲水性碳水化合物链是皂苷的特征[1]。皂苷主要可以分类为甾体皂苷、三萜皂苷、螺甾皂苷和呋甾皂苷[2]。皂苷广泛分布于高等植物中,许多中草药如人参、甘草、柴胡和桔梗等的主要有效成分都含有皂苷[3],由于皂苷具有多种生物活性,其在制药、食品和营养保健品等行业领域占有重要地位[4-6]。

乳酸对成骨样细胞成骨表型及碱性磷酸酶基因表达的影响研究

目的明确聚乳酸降解终产物乳酸对细胞成骨表型和基因表达的影响机理,为聚乳酸支架的精确设计提供参考意义。方法配制乳酸浓度为8、16、22、27 mmol/L的培养基,将不含乳酸培养基作为对照组,检测培养基的pH和渗透压。利用培养基培养大鼠成骨样细胞Ros17/2.8,观察细胞形态,测定细胞Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和骨钙素含量,盐酸四环素染色钙结节并定量分析。采用实时定量PCR法检测细胞ALP mRNA表达。结果与对照组相比,随着乳酸浓度增加,培养基pH下降,渗透压升高,成骨样细胞形态改变,数量减少。低浓度乳酸组(8、16 mmol/L)的Ⅰ型胶原量都显著高于对照组,其余组与对照组相比无显著差异。含乳酸组的细胞ALP活性都低于对照组,并且乳酸浓度越高,细胞ALP活性越低。含乳酸组的骨钙素量与对照组之间没有显著差异。随着乳酸浓度增加,含乳酸组细胞所形成的钙结节阳性面积减少,都低于对照组。低浓度乳酸组(8、16 mmol/L)的细胞ALP mRNA表达量都低于对照组。结论聚乳酸降解终产物乳酸可抑制细胞ALP mRNA的表达,降低ALP活性。随着乳酸浓度增加,乳酸抑制作用增强,最终降低细胞的成骨矿化能力。此外,乳酸不会抑制细胞分泌I型胶原和骨钙素。

吸附法去除饲料中霉菌毒素的研究进展

以黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素为主的霉菌毒素不仅直接损害农产品及饲料质量,还严重威胁着人体健康和经济发展。在众多治理方法中,吸附法是目前最为有效且被广泛应用的一种方法。本文综述了近年来霉菌毒素吸附剂种类、主要吸附剂改性方法、霉菌毒素检测和评价方法的研究进展,并对未来吸附剂的开发与研究、霉菌毒素检测和评价方法的发展等进行了展望。

运营地铁隧道管片修复加固技术研究

文中以在建隧道加固项目为例,对管片加固技术进行研究,提出了两种合理有效的修复技术,基本覆盖地铁隧道变形收敛过大和隧道控制保护区有其他施工作业、突发抢修加固事件以及收敛变形较小等施工情况。

多重PCR法检测鲜切哈密瓜中3种食源性致病菌

建立可同时检测鲜切哈密瓜中的单增李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7的多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。根据单增李斯特菌inl A基因、鼠伤寒沙门氏菌inv A基因、大肠杆菌O157:H7的wzy基因设计3对特异性引物。对多重PCR反应体系中的引物浓度、退火温度、Mg2+浓度、d NTP浓度进行了优化,并确定适宜的多重PCR反应体系及反应条件。结果表明:25μL反应体系,10×PCR buffer为2.5μL,Mg Cl2(25 mmol/L)为3.5μL,d NTPs(2.5 mmol/L)为2μL,inl A基因上下游引物(5μmol/L)为1μL,inv A基因上下游引物(5μmol/L)为1μL,wzy基因上下游引物(5μmol/L)为2μL,单增李斯特菌DNA模板为1μL,鼠伤寒沙门氏菌DNA模板为1μL,大肠杆菌O157:H7 DNA模板为1μL,ex Taq DNA聚合酶(5 U/L)为0.3μL,加dd H2O补足25μL。反应条件为95℃预变性3 min;94℃变性30 s,53.9℃退火30 s,72℃延伸30 s,32个循环;72℃延伸10 min。鲜切哈密瓜中人工接种的目标菌的灵敏度为单增李斯特菌2.7×104 CFU/g,大肠杆菌O157:H7 3.3×104 CFU/g以及鼠伤寒沙门氏菌3.8×104 CFU/g。该技术可为快速检测鲜切哈密瓜中病原菌污染度及其控制提供参考依据。

噬菌体在防控畜禽细菌性感染中的应用

近年来,因持续饲喂或滥用抗生素而引起的耐药性、药物残留和食品安全等问题日益严重,尤其是多重耐药和泛耐药菌的出现严重威胁着人类的健康。因此,寻找一种安全、高效的抗生素替代品是保障动物源食品安全、提高动物健康水平,及促进社会发展的必然需求。噬菌体是一类能够侵染细菌、真菌、放线菌等微生物的病毒总称,与传统抗生素相比,噬菌体具有存在广泛、特异性强、安全和研发成本低等优势。人类关于噬菌体的研究报道由来已久,但是随着抗生素和化学抗菌药物的大量出现,噬菌体在欧美等发达国家的研究一度中断,直至20世纪80年代,由于多重耐药菌的出现,人类又重新重视噬菌体的研究,随着现代生物技术的发展,噬菌体已广泛应用到人类疫病防控、动植物病原菌清除及保障食品安全等方面,已成为人类对抗细菌性感染的利器。作者简述了噬菌体生物学特性、噬菌体疗法优缺点,以及防控猪、鸡的大肠杆菌、沙门氏菌、弯曲杆菌等常见细菌性感染方面的研究,以期为动物生产应用提供理论依据。

卵黄抗体饲料添加剂在畜牧及水产养殖病害防控中的研究进展

2020年起,我国饲料中全面禁止添加抗生素,以减少滥用危害。卵黄抗体因具有获取方便、可高效抑制病原微生物且绿色无污染的优势而受到人们的广泛关注。文章通过对卵黄抗体的理化特性、防控病原微生物的作用机制,以及作为饲料添加剂在畜牧及水产养殖病害防控中的研究进展进行综述。同时讨论了卵黄抗体饲料添加剂在工业化生产中存在的一些问题,旨在进一步推动其在无抗养殖中的应用。

一株产肠毒素大肠杆菌短尾噬菌体分离与鉴定

以产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K88为宿主菌,从养殖场污水中分离出一株短尾裂解性噬菌体vB_EcoP_E21。该噬菌体可侵染多株大肠杆菌,一般生物学特性分析表明最佳感染复数为0.1,潜伏期和爆发期均为20 min,裂解量为370 PFU·cell-1;对氯仿不敏感,可在40~60℃,pH 4.0~10.0条件下保持较高活性;全基因组测序结果表明其基因组长度为58536 bp,(G+C)%含量为46.89%,含66个开放阅读框,其中23个为已知编码序列;不含tRNA、溶源基因、毒力因子和抗生素耐药基因;噬菌体终末端酶大亚基和主要衣壳蛋白系统发育树同源性分析结果显示,该大肠杆菌噬菌体与变形杆菌(Proteus)噬菌体P16-2532、PM87、pPM 01和Saba亲缘关系较近,但无法侵染变形杆菌属(Proteus spp.)标准菌株。

创业失败学习有助于提升连续创业意向吗?——基于认知视角的框架研究

从认知视角出发,基于经验学习理论和心理所有权理论,构建了创业失败学习—创业能力—连续创业意向理论模型。研究发现:创业能力在创业失败学习与连续创业意向中起中介作用;失败归因调节失败学习的成效,其中内部归因正向调节创业失败学习与创业能力的关系,外部归因负向调节创业失败学习与创业能力的关系;心理所有权在创业能力与连续创业意向之间具有正向调节作用。在上述结论的基础上,对未来研究进行了展望。

变电站接地极换土法的接地降阻效率研究

通过对接地极换土法接地电阻的精确计算,对接地极换土法的接地降阻效率进行了研究。依据复合接地网接地电阻的计算方法,提出了换土后接地网接地电阻的一种接地极等效直径变换计算法,基于该方法,从置换土的土壤电阻率和换土半径两方面对换土后的降阻效率进行了研究。研究表明,置换土土壤电阻率越低,换土半径越大,接地电阻降低越明显,但降低并不成比例。换土法等效于增加了接地极直径,理想情况下其接地降阻效率仅接近5%,降阻效率并不明显,故在变电站接地网接地电阻值不满足安全要求时不建议专门采用该降阻措施。当现场有足够的低电阻率土壤时,推荐采用低电阻率土壤回填,当无足够的低电阻率土壤时,应优先考虑采用降阻剂或离子接地极等其他接地降阻措施。

情绪释放联合经皮穴位电刺激防治高致吐风险化疗恶心呕吐的效果研究

目的探讨情绪释放疗法联合经皮穴位电刺激对肿瘤高致吐风险化疗患者恶心呕吐的影响。方法选取肿瘤高致吐风险化疗患者120例,依据患者入院就诊顺序,按照数字随机表的编码分为对照组和试验组,每组各60例,对照组患者在常规治疗护理基础上,予经皮穴位电刺激疗法,试验组在对照组基础上给予情绪释放疗法。干预14d后比较两组患者的恶心呕吐程度、焦虑、抑郁、压力和生活质量的情况。结果干预后试验组患者化疗后恶心呕吐的程度明显低于对照组,试验组化疗第14天的焦虑、抑郁、压力得分明显低于对照组,试验组生活质量得分明显高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论情绪释放疗法联合经皮穴位电刺激可有效防治高致吐风险化疗恶心呕吐的发生,改善焦虑、抑郁程度,降低患者的知觉压力水平,提高患者生活质量。

动植物蛋白比恒定的饲料中发酵豆粕对刺参生产性能、消化酶和非特异性免疫的影响

以鱼粉、发酵豆粕、豆粕、玉米蛋白粉为动植物蛋白源设计了6种动植物蛋白比为13的等氮等脂配合饲料,进行为期40 d的刺参养殖试验,研究饲料中发酵豆粕对刺参生产性能、体壁营养成分、消化酶和非特异性免疫的影响。结果显示:饲料中发酵豆粕含量对刺参生产性能指标(增重率、特定生长率、体壁重)和体壁粗蛋白质含量均影响显著(P<0.05)。饲料中发酵豆粕含量为16%时,增重率、特定生长率、体壁重达到最大值。肠道中的胃蛋白酶、胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、体腔液中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和总抗氧化能力均受饲料中发酵豆粕含量的显著性影响(P<0.05),而饲料中发酵豆粕含量对体壁干物质、粗脂肪、粗灰分和体壁系数的影响不显著。

鲜切果蔬中4种病原微生物多重PCR检测技术

研发可同时检测鲜切果蔬中的单核细胞性李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157:H7的多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。根据单核细胞性李斯特菌inl A基因、鼠伤寒沙门菌inv A基因、大肠杆菌O157:H7 wzy基因、金黄色葡萄球菌nuc基因设计及筛选出4对引物。对多重PCR体系及条件进行优化。该方法对单核细胞性李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157:H7的检出限分别为3.5×10~6、1.6×10~5、2.4×10~5、4.8×10~5 CFU/m L。将优化的多重PCR方法对不同接种量富集后验证,结果表明,经过9 h富集后,该方法检出限为1 CFU/m L。该方法在鲜切莴苣、鲜切黄瓜、鲜切木瓜、鲜切哈密瓜中应用同样可扩增出4条目标菌。因此,利用所建立的多重PCR方法对鲜切果蔬中侵染的病原菌检出限可达到1 CFU/g。该方法相较于传统的培养检测方法具有节约大量的劳力、试剂、时间等优点,检测时间也由原来的5~7 d缩短至9~11 h,对于企业或分析检验中心大批量样品的监测具有指导意义。

猪源产肠毒素大肠杆菌疫苗的研究进展

仔猪腹泻是全球集约化猪场的高发疾病之一,给养猪业造成了巨大的经济损失。产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是导致新生仔猪和断奶仔猪腹泻的主要致病菌,菌毛黏附素和肠毒素是其重要的致病因子。接种疫苗是仔猪腹泻最有效的防治方法,然而ETEC疫苗有明显的地域局限性和安全性问题。因此,研制安全、高效且适用性广的ETEC疫苗对畜禽养殖业具有重要意义。近年来在ETEC疫苗的研制方面已取得了重大进展,出现多种亚单位疫苗、基因工程疫苗和弱毒疫苗。本文对ETEC的致病机制及相关疫苗的研究进行简要介绍。

食物中L-肉碱含量及其测定方法的研究进展

L-肉碱即左旋肉碱,是促进脂肪转化为能量的必需营养素,它具有调节脂代谢、提高抗氧化和免疫能力等功能,对于人类的健康和疾病预防具有重要的作用。本文在概述L-肉碱生理功能的基础上,对食物中L-肉碱含量及L-肉碱测定方法进行系统综述,为正确认识L-肉碱、科学合理地利用食物中L-肉碱资源提供基础理论依据,为获得一种简单、快速、准确、特异性强的L-肉碱测定方法并应用于实践提供参考数据。

成纤维生长因子4在妊娠早期牛胎盘组织的分布及表达特点

成纤维生长因子4(FGF4)是在哺乳动物胚胎发育过程中第一个被发现的FGF分子,在促进滋养层细胞的增殖方面具有广泛的作用。已经证实,FGF4是小鼠早期胚胎发育过程中的一个重要因子,异常表达会影响早期胚胎的发育,并影响小鼠胎盘的发育及功能。截至目前,有关FGF4在牛胎盘发育过程中的表达尚无报道。本试验运用石蜡切片HE、PAS、免疫荧光染色技术和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对妊娠早期牛胎盘组织结构特征及胎盘组织中FGF4的细胞定位和mRNA表达规律进行研究。结果显示,在所检测的各胎龄胎盘的羊膜、子叶及肉阜组织均检测到Fgf4 mRNA,各部位表达量依区域和孕龄而异;在牛胎盘块的单核滋养层细胞、滋养层巨细胞、肉阜上皮、子宫内膜上皮及子宫腺等部位的细胞质均观察到FGF4阳性反应,滋养层巨细胞及子宫腺上皮呈强染色。可见,在妊娠早期的牛胎盘组织存在FGF4及其mRNA,随着胎龄的增加其表达量在胎儿胎盘(子叶)表现为先降低而后增高的规律,而在母体胎盘(肉阜组织)则呈现先逐渐升高然后降低的趋势。