地方院校食品科学与工程专业创新型人才培养模式探索

创新能力是本科学生应该具备的素养。以果蔬贮藏与加工课程为例,通过优化教学内容、改善理论和实践教学模式,实施科教和校企结合的教学模式和多方实践能力考核方式,构建创新型和应用型人才培养模式。

三种伞形科蔬菜作物棕榈酰基转移酶基因家族的鉴定与分析

在全基因组水平鉴定胡萝卜(Daucus carota)、芹菜(Apium graveolens)、香菜(Coriandrum sativum)3种伞形科蔬菜作物的棕榈酰基转移酶(protein S-acyltransferase,PAT),对其家族成员进行生物信息学和表达分析,为深入探究该类蛋白在3种伞形科作物生长发育及抵御逆境胁迫中的作用提供参考。利用Basic Local Alignment Search Tool(BLAST)和hmmsearch程序,从胡萝卜、芹菜、香菜基因组中筛选、鉴定PAT家族成员;利用TBtools绘制PAT基因染色体分布图;利用Expasy分析PAT蛋白的等电点、分子量;利用TMHMM-2.0预测PAT蛋白跨膜区;利用CELLO v.2.5、WoLF PSORT预测PAT蛋白的亚细胞定位情况;利用MEGA6构建系统发育进化树;利用MEME分析PAT蛋白保守基序;基于荧光定量PCR实验结果及转录组数据,利用TBtools绘制基因表达热图,分析PAT基因的组织表达特性及胁迫响应情况。结果表明,在胡萝卜、芹菜及香菜基因组中各存在27、25、27个PAT基因,分别命名为DcPAT 1~27、AgPAT 1~25、CsPAT 1~27。这些PAT成员不均匀地分布于染色体上,理化性质存在差异,且均为跨膜蛋白。系统进化分析将伞形科及来源于其他物种的PAT蛋白分为7个类群(Group1~7),伞形科作物PAT蛋白在7个类群中均有分布。结构分析表明,所有的PAT蛋白均含有DHHC-CRD结构域,该序列内的保守氨基酸残基在不同物种间已发生变异。荧光定量PCR和转录组数据分析表明,PAT基因在胡萝卜、芹菜、香菜不同组织间的表达水平有差异,但有部分成员在不同组织间均呈现高水平或低水平表达,另有部分DcPAT基因在盐胁迫和低温胁迫处理后,表达水平发生改变。

胡萝卜4CL基因家族的鉴定及分析

旨在全基因组水平上鉴定胡萝卜4CL基因,揭示该基因家族成员的理化性质、系统进化、基因结构、组织表达模式及胁迫响应情况,为胡萝卜4CL的功能研究和利用奠定基础。基于AMP结合结构域(PF00501)的隐马尔可夫模型文件,利用HMMER软件对胡萝卜蛋白质数据库进行检索,获得胡萝卜4CL基因(命名为Dc4CL);利用ProtParam分析Dc4CL的理化性质;利用MEGA6对Dc4CL进行系统进化分析;使用GSDS2.0、MEME分析Dc4CL的基因及蛋白结构;利用荧光定量PCR技术对Dc4CL的组织表达模式及胁迫响应情况进行研究。结果表明,胡萝卜基因组中存在12个4CL基因,分别为Dc4CL1~Dc4CL12。Dc4CL基因开放阅读框(ORF)长度为1350~3363 bp,编码蛋白质长度为449~1120 aa,编码蛋白的分子质量和等电点分别为48.92~123.73 ku和5.34~8.82。系统进化分析表明,Dc4CL与其他来自水稻、拟南芥、二穗短柄草、高粱、大白菜的4CL蛋白可分为两个类群。结构分析表明,Dc4CL基因外显子数目为4~11个,其蛋白序列中均含有BoxⅠ(SSGTTGLPKGV)和BoxⅡ(GEICIRG)两个保守序列。荧光定量PCR结果表明,Dc4CL3、Dc4CL12在胡萝卜叶片及肉质根中均有表达,而Dc4CL8主要在叶片中表达,盐胁迫和低温胁迫均使Dc4CL3、Dc4CL8、Dc4CL12的表达降低。总之,胡萝卜的12个Dc4CL基因在影响4CL蛋白功能的关键位点处具有保守性,而在其他位置上存在一定的差异,且部分成员在逆境胁迫应答过程中可能发挥了一定的作用。

“以问题为导向”的食品感官鉴定教学改革探讨

通过对2015、2016级食品科学与工程专业以及2016、2017级食品营养与检测专业的学生进行"以问题为导向"线上线下相结合的方式教学,确立了如何高效进行课堂教学,充分调动学生学习主动性,使学生能真正学到并掌握知识的教学模式。通过让学生参与科研实践项目,充实教学内容,以及考核方式多样化进行学习效果综合评价,取得了良好的教学效果,也为培养应用型人才打下了基础。

应用型本科院校食品科学与工程专业实践教学保障体系的探索

实践教学是食品科学与工程专业教学体系的重要组成部分,也是培养学生创新意识、专业意识和科学素养所必需的教学环节。结合我校实际,从实践教学课程体系、实践教学方法、实践教学队伍建设、实践教学监督管理及反馈体系等方面阐述了实践教学保障体系构建与探索。

鳞柄小奥德蘑凝集素的提取及性质研究

以鳞柄小奥德蘑粉为试材,采用磷酸缓冲溶液浸提凝集素,倍比稀释法测定其热稳定性、耐盐性、糖特异性和对多种血红细胞的凝集能力;以凝血活力为指标,采用单因素试验和正交实验优化了鳞柄小奥德蘑凝集素的提取工艺,以期研究鳞柄小奥德蘑凝集素的最佳提取工艺及其凝血活性。结果表明:鳞柄小奥德蘑凝集素可凝集兔、鸡、羊和人的血红细胞,对兔血红细胞的凝集能力最强,凝集能力无物种专一性和血型专一性;具有一定的耐热性和耐盐性,80℃及以上温度处理可显著降低其凝集能力,且随着处理时间的延长,凝集能力逐渐降低,80℃处理50 min或90℃处理10 min,凝集能力消失;含0~0.8 mol·L-1 NaCl的0.01 mol·L-1磷酸缓冲溶液对其凝集能力无显著性影响;特异性糖为N-乙酰-D-半乳糖胺。鳞柄小奥德蘑凝集素的最佳提取工艺为浸提液种类0.01 mol·L-1磷酸缓冲溶液,料液比1∶15 g·mL-1,浸提时间2 h,浸提液pH 7.0。

Cloning and expressing a recombinant human tissue inhibitor of metalloproteinase-2(TIMP-2)in methylotrophic yeast Pichia pastoris and its characterizations

To obtain human tissue inhibitor of metalloproteinase-2(TIMP-2)cDNA and the secretory expression of TIMP-2 gene in Pichia pastoris,we designed and synthesized a 618 base pairs artificial gene coding for the TIMP-2 with a computer-aided design method using a standard chemical synthesis technique,which was composed of frequently used codons in the highly expressed Pichia pastoris genes.Then the synthetic gene encoding TIMP-2 was checked by means of dideoxynucleotide sequencing.The verified gene of TIMP2 was cloned to the Escherichia coli-yeast shuttle vector of pPIC9 to construct a recombinant plasmid pPIC9-T2.The plasmid was transformed into GS115 cells of the methylotrophic yeast,Pichia pastoris by electroporation,and we got the expression cell through phenotype selection and induction with methanol.Separation,purification,and bioactivity analysis of the expressed products were performed.