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抗CD133单链抗体/白喉毒素DAB389融合蛋白的基因构建、表达、纯化及鉴定
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作者 程金章 杨景朴 +5 位作者 仲炜 王海涛 赵胤 陈俊俊 王宗贵 牙韩盛 《中国实验诊断学》 2018年第9期1632-1635,共4页
目的构建抗CD133单链抗体(scFV)/白喉毒素DAB389融合蛋白,在大肠杆菌里表达,并鉴定及纯化。方法采用PCR的方法,扩增融合基因DAB389-Linker-CD133(scFV),并插入到原核表达载体pET28a中,构建了重组表达载体pET28a-DAB389-CD133,融合蛋白在... 目的构建抗CD133单链抗体(scFV)/白喉毒素DAB389融合蛋白,在大肠杆菌里表达,并鉴定及纯化。方法采用PCR的方法,扩增融合基因DAB389-Linker-CD133(scFV),并插入到原核表达载体pET28a中,构建了重组表达载体pET28a-DAB389-CD133,融合蛋白在BL21(DE3)中表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定,通过Ni柱纯化目的蛋白,获得了纯度达95%的DAB389-Linker--CD133(scFV)融合蛋白。Western blot鉴定蛋白活性。流式细胞仪检测能否与CD133抗原特异性结合。结果扩增的片段与理论值一致,序列分析正确;纯化得到纯度为95%的重组蛋白。Western blot分析能特异性地与抗白喉抗体结合。流式细胞仪检测能与CD133抗原特异性结合。结论成功构建了抗CD133单链抗体(scFV)/白喉毒素DAB389融合蛋白,具有结合抗原和免疫毒素双重活性,为进一步靶向治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 CD133单链抗体 白喉毒素 融合蛋白
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Chemoresistance of CD133+ cancer stem cells in laryngeal carcinoma 被引量:12
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作者 yang jing-pu LIU Yan +3 位作者 ZHONG Wei YU Dan WEN Lian-ji JIN Chun-shun 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2011年第7期1055-1060,共6页
Background Mounting evidence suggests that tumors are histologically heterogeneous and are maintained by a small population of tumor cells termed cancer stem cells. CD133 has been identified as a candidate marker of c... Background Mounting evidence suggests that tumors are histologically heterogeneous and are maintained by a small population of tumor cells termed cancer stem cells. CD133 has been identified as a candidate marker of cancer stem cells in laryngeal carcinoma. This study aimed to analyze the chemoresistance of CD133+ cancer stem cells. 展开更多
关键词 CD133 cancer stem cells Hep-2 cells laryngeal carcinoma
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