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不同冻藏温度对小黄鱼贮藏期间品质变化的影响 被引量:4
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作者 马新悦 韩悦 +4 位作者 邓尚贵 郑斌 张小军 杨最素 许丹 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2023年第4期118-125,共8页
为探究超低温条件下的小黄鱼品质变化,该实验通过冻结曲线、总挥发性盐基氮(TVB-N)含量、持水力、Ca^(2+)-ATPase(Ca^(2+)-腺苷三磷酸酶)活性含量、羰基含量、总巯基含量以及冰晶形态等指标,综合表征-18、-25和-45℃等3种冻藏温度对小... 为探究超低温条件下的小黄鱼品质变化,该实验通过冻结曲线、总挥发性盐基氮(TVB-N)含量、持水力、Ca^(2+)-ATPase(Ca^(2+)-腺苷三磷酸酶)活性含量、羰基含量、总巯基含量以及冰晶形态等指标,综合表征-18、-25和-45℃等3种冻藏温度对小黄鱼品质变化的影响。结果表明-18、-25和-45℃组通过最大冰晶生成区域时间分别为230、95和60 min,超低温(-45℃)组用时最短;且-45℃冻藏下小黄鱼组织中的冰晶面积和直径比其他两组小、分布更均匀,150 d时,肌肉组织间隙均增大,而-18和-25℃两组间隙远大于-45℃组;冻藏200 d,-45℃组的小黄鱼TVB-N含量与羰基含量最小,分别为7.96 mg/100 g与30.60 nmol/mg prot;持水力、总巯基含量与Ca^(2+)-ATPase活性含量最高,分别为74.62%、0.36 mmol/g prot与4.78μmol/mg,显著优于-18和-25℃组(P<0.05)。随着贮藏时间的延长,各温度下的小黄鱼品质均变化,但超低温(-45℃)下的小黄鱼品质变化最缓。因此,超低温冻藏对长期贮藏小黄鱼的品质劣变有延缓作用,能更有效保持其食用价值。 展开更多
关键词 超低温 小黄鱼 冻藏 冰晶形态 品质变化
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小黄鱼低温贮藏过程中内源性蛋白酶活性及其水分变化 被引量:1
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作者 马新悦 韩悦 +4 位作者 邓尚贵 郑斌 张小军 杨最素 许丹 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期252-258,共7页
以小黄鱼(Larimichthys polyactis)为研究对象,测定组织蛋白酶、α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,AG)和β-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(β-acetylglucosaminidase,NAG)的酶活力,利用低场核磁共振(low-field nuclear magnetic resonance,LF-NMR)... 以小黄鱼(Larimichthys polyactis)为研究对象,测定组织蛋白酶、α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,AG)和β-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(β-acetylglucosaminidase,NAG)的酶活力,利用低场核磁共振(low-field nuclear magnetic resonance,LF-NMR)技术测定水分迁移,以质构、持水力为指标,探讨小黄鱼肉在-18、-25、-45℃冻藏(0~200 d)过程中酶活力和水分迁移以及品质变化规律。结果表明,随着冻藏时间的延长,3种温度下鱼肉的硬度、弹性和咀嚼性均出现大幅度下降趋势;组织蛋白酶B、H和L呈先下降后上升的变化趋势,-45℃组酶活性始终显著低于其他2组;AG和NAG活性显著上升;鱼肉总体水分含量(A)、结合水含量(A 21)、不易流动水含量(A 22)均减少,而自由水含量(A 23)增加;-45℃组鱼肉持水力下降速率最缓慢。该研究结果显示,小黄鱼在长期冻藏过程中超低温(-45℃)下能更好地保持鱼肉品质。 展开更多
关键词 小黄鱼 组织蛋白酶 水分迁移 超低温 低场核磁共振
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鳕鱼皮胶原蛋白肽在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制 被引量:5
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作者 陈锐 丁国芳 +6 位作者 杨最素 余方苗 黄芳芳 唐云平 张小军 陈思 梅光明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第19期154-161,共8页
目的:鳕鱼皮胶原蛋白肽(cod skin collagen peptide,CSCP)对肝损伤具有较好的保护作用,但其吸收机制尚不明确,本实验拟采用人结肠腺癌Caco-2细胞单层模型对CSCP在肠道中的吸收机制进行研究,为CSCP在动物肠道内的吸收机制提供依据。方法... 目的:鳕鱼皮胶原蛋白肽(cod skin collagen peptide,CSCP)对肝损伤具有较好的保护作用,但其吸收机制尚不明确,本实验拟采用人结肠腺癌Caco-2细胞单层模型对CSCP在肠道中的吸收机制进行研究,为CSCP在动物肠道内的吸收机制提供依据。方法:在进行转运实验前,先对CSCP在人工胃、肠液、不同pH值条件及在Caco-2细胞单层中的稳定性进行评价;采用CCK-8(cell counting kit-8)法确定CSCP在转运实验中的最高质量浓度,然后建立Caco-2细胞单层模型并测定跨膜电阻值和碱性磷酸酶活力以检验细胞单层的致密性、完整性和极化现象;考察转运时间、CSCP质量浓度、维拉帕米、MK-571、氧化苯砷和去氧胆酸钠对转运的影响,利用高效液相色谱法检测CSCP质量浓度并计算累积转运量和表观渗透系数。结果:在3h内,CSCP在人工胃、肠液及接近胃肠道pH值环境中基本保持稳定,转运过程中未见多肽发生水解。CSCP的转运具有时间和浓度依赖性,不受维拉帕米和氧化苯砷的影响,去氧胆酸钠和MK-571对CSCP的转运具有非常显著的促进作用(P<0.05)。结论:CSCP跨Caco-2细胞单层转运的机制为细胞旁路途径,其外排受到多药耐药蛋白的介导。 展开更多
关键词 鳕鱼皮 胶原蛋白肽 胃肠道稳定性 CACO-2细胞 转运机制
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青蛤酶解多肽对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用 被引量:20
4
作者 叶盛旺 杨最素 +5 位作者 李维 唐云平 黄芳芳 张小军 余方苗 丁国芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期185-191,共7页
研究酶解法制备的青蛤多肽(Cyclina sinensis peptides,CSP)对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。以RAW264.7巨噬细胞相对增殖率为指标,选用胃蛋白酶对青蛤肉进行酶解,酶解液经超滤、冷冻干燥后,采用噻唑蓝(methyl thiazolyltetrazolium,... 研究酶解法制备的青蛤多肽(Cyclina sinensis peptides,CSP)对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。以RAW264.7巨噬细胞相对增殖率为指标,选用胃蛋白酶对青蛤肉进行酶解,酶解液经超滤、冷冻干燥后,采用噻唑蓝(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)法筛选出增殖活性最高的组分进行免疫调节作用研究。采用MTT细胞增殖实验、倒置显微镜观察、中性红吞噬实验、硝酸根还原酶法及酶联免疫吸附检测法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定CSP-5对RAW264.7巨噬细胞的生长与增殖、细胞形态、吞噬能力、一氧化氮(nitric oxide,NO)分泌能力及细胞因子白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌能力的影响;同时还研究了CSP-5对巨噬细胞各周期分布的影响。结果表明,分子质量小于3 kDa的CSP-5对RAW264.7细胞的生长与增殖具有明显的促进作用,且主要作用于G0/G1期,对细胞吞噬能力、NO分泌能力和细胞因子分泌能力的提高具有显著的促进效果;形态学观察结果显示经CSP-5作用后巨噬细胞体积变大且长出较多伪足。由此可知,CSP-5具有激活巨噬细胞增强机体免疫力的潜在作用。 展开更多
关键词 酶解 青蛤多肽 RAW264.7巨噬细胞 免疫调节作用
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双齿围沙蚕多肽的制备及其抗肺癌A549细胞活性 被引量:7
5
作者 贾盈露 丁国芳 +4 位作者 杨最素 余方苗 郑媛媛 吴宗泽 陈锐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期27-35,共9页
探讨双齿围沙蚕酶解多肽制备的关键技术及其对肺癌A549细胞的作用。以增殖抑制率为指标,确定最佳酶种并根据单因素试验和正交试验确定其最佳酶解工艺。经超滤获得1~3 ku的酶解液,通过阴离子色谱、凝胶过滤色谱和制备色谱对其进行进一步... 探讨双齿围沙蚕酶解多肽制备的关键技术及其对肺癌A549细胞的作用。以增殖抑制率为指标,确定最佳酶种并根据单因素试验和正交试验确定其最佳酶解工艺。经超滤获得1~3 ku的酶解液,通过阴离子色谱、凝胶过滤色谱和制备色谱对其进行进一步的分离纯化。采用四甲基偶氮唑蓝法测定沙蚕多肽PAP对肺癌A549细胞的增殖抑制率并通过倒置显微镜、吖啶橙/溴化乙锭荧光染色及Hoechst荧光染色观察其细胞形态的变化。实验结果表明最佳酶种是碱性蛋白酶,其最佳酶解条件为:酶解温度50℃、pH 11、料液比1∶1(g/mL)、酶解时间6 h、加酶量300 U/g。经纯化获得的多肽命名为PAP,其氨基酸序列为Ile-Glu-Pro-Gly-Thr-Val-Gly-Met-Met-Phe,且PAP对A549细胞的作用呈时间与剂量依赖关系,作用后细胞出现了凋亡的形态学特征。因此,PAP能明显抑制肺癌细胞A549增殖,可以诱导其发生凋亡而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 双齿围沙蚕 多肽 抗肿瘤 A549细胞 细胞凋亡
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青蛤多肽的酶法制备及对前列腺癌DU-145细胞的抑制活性 被引量:4
6
作者 张亚茹 闫海强 +3 位作者 杨最素 余方苗 丁国芳 龚戬芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第11期167-174,共8页
探讨青蛤多肽的制备工艺及体外抗前列腺癌DU-145细胞的活性。以氨基氮含量为检测指标,筛选最优酶种类并进行正交试验以获取最佳酶解青蛤内脏酶解工艺。经超滤截留、琼脂糖凝胶层析、高效液相色谱分离纯化及噻唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazo... 探讨青蛤多肽的制备工艺及体外抗前列腺癌DU-145细胞的活性。以氨基氮含量为检测指标,筛选最优酶种类并进行正交试验以获取最佳酶解青蛤内脏酶解工艺。经超滤截留、琼脂糖凝胶层析、高效液相色谱分离纯化及噻唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)活性筛选得到含有5个氨基酸的多肽(Ile-Leu-Tyr-Met-Pro)。对所得多肽采用MTT法测定DU-145细胞增殖抑制率;采用倒置显微镜、Hoechst 33258染色及透射电子显微镜技术观察细胞形态学变化;采用荧光法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用线粒体膜电位检测DU-145细胞凋亡情况;采用免疫组织化学法检测非转移性克隆23型(nm23H1)蛋白的表达。结果表明:制备青蛤多肽最佳酶是木瓜蛋白酶,最佳酶解条件是料液比1:4、pH 7.0、加酶量1 500 U/g、温度45.0℃、酶解时间4 h;所得多肽对DU-145细胞的增殖具有明显的抑制作用,且呈时间与剂量依赖性;处理后的DU-145细胞出现凋亡的形态学特征;其质量浓度和细胞内ROS的表达量呈正相关关系;线粒体膜电位降低率从4.22%提高到25.07%;免疫组织化学法结果显示nm23H1蛋白的表达量增加。青蛤多肽能明显抑制DU-145细胞的增殖,并通过诱导其发生凋亡而发挥作用。 展开更多
关键词 青蛤 酶解 前列腺癌 细胞凋亡
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长鳍金枪鱼多肽制备及其对H2O2诱导的张氏肝细胞的保护作用 被引量:2
7
作者 艾杨洋 丁国芳 +4 位作者 杨最素 余方苗 唐云平 陈艳 黄芳芳 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第3期81-89,共9页
目的:以长鳍金枪鱼废弃物为原料提取多肽,探究其对H2O2诱导的张氏肝细胞的保护作用。方法:以H2O2诱导张氏肝细胞损伤建立细胞模型组,以相对增殖率为指标筛选长鳍金枪鱼废弃物最适酶种,通过正交试验确定最佳酶解条件。酶解产物经超滤、... 目的:以长鳍金枪鱼废弃物为原料提取多肽,探究其对H2O2诱导的张氏肝细胞的保护作用。方法:以H2O2诱导张氏肝细胞损伤建立细胞模型组,以相对增殖率为指标筛选长鳍金枪鱼废弃物最适酶种,通过正交试验确定最佳酶解条件。酶解产物经超滤、阴离子交换色谱、凝胶过滤色谱和反相高效液相色谱方法纯化分离得到多肽,用噻唑蓝(MTT)比色法对其每步分离效果进行评价。多肽活性的评价是利用试剂盒方法测定张氏肝细胞上清液中AST、ALT、MDA、ADH和SOD的含量,倒置显微镜观察细胞形态及流式细胞仪检测多肽对H2O2诱导后的张氏肝细胞凋亡的影响。结果:最适酶种为胰蛋白酶,最佳酶解条件为料液比1∶3(g/mL),pH 9,加酶量900 U/g,温度45℃,时间5 h。经一系列纯化后制成多肽,命名为长鳍金枪鱼多肽。其氨基酸序列为Gly-Ala-Pro-Gly-Glu-Arg-Gly-Ser-Lys-Cys-Phe-Lys。经长鳍金枪鱼多肽作用于H2O2诱导的张氏肝细胞后,ALT、AST、ADH和MDA含量下降,SOD含量上升。通过流式细胞仪检测发现晚期凋亡细胞相比于模型组减少明显。结论:利用酶解方法提取的长鳍金枪鱼多肽对H2O2损伤的张氏肝细胞具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 长鳍金枪鱼废弃物 多肽 H2O2损伤 张氏肝细胞 护肝
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文蛤寡肽对RAW264.7细胞的免疫调节作用 被引量:12
8
作者 叶蕾 阎洁 +5 位作者 张文 邹舒舒 叶盛旺 杨最素 余方苗 丁国芳 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期410-418,共9页
以RAW264.7细胞为实验模型,探讨文蛤寡肽(MMO)在体外的免疫调节作用。实验设立空白对照组、阳性药物组(脂多糖,LPS)及低、中、高浓度MMO组,采用MTT比色法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞周期变化,H.E染色观察细胞形态变化,中性红吞噬... 以RAW264.7细胞为实验模型,探讨文蛤寡肽(MMO)在体外的免疫调节作用。实验设立空白对照组、阳性药物组(脂多糖,LPS)及低、中、高浓度MMO组,采用MTT比色法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞周期变化,H.E染色观察细胞形态变化,中性红吞噬实验检测细胞吞噬能力,免疫荧光标记法观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达情况,硝酸根还原酶法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中一氧化氮、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)的含量。结果显示,MMO能促进RAW264.7细胞的增殖和分化。当MMO浓度为250μg/mL时,增强细胞吞噬能力、增加细胞周期中G1/G0期和G2/M期细胞、诱导iNOS刺激NO释放、促进IL-6和IL-1β分泌效果最为显著,表现出与LPS对RAW264.7细胞相似的激活作用。研究表明,MMO具有促使RAW264.7细胞活化,增强非特异性免疫的潜力。 展开更多
关键词 文蛤 寡肽 RAW264.7细胞 免疫调节
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文蛤寡肽对小鼠急性肝损伤的保护作用 被引量:10
9
作者 王佳佳 赵莎莎 +2 位作者 杨最素 余方苗 丁国芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第13期190-195,共6页
对文蛤寡肽(Meretrix meretrix oligopeptides,MMO)在小鼠急性肝损伤中的保护作用进行研究。首先通过酶解、超滤、Sephadex G-25柱分离技术从文蛤中分离纯化出具有肝修复作用的文蛤寡肽,经检测该目标肽的氨基酸序列为Gln-Leu-Asn-Trp-As... 对文蛤寡肽(Meretrix meretrix oligopeptides,MMO)在小鼠急性肝损伤中的保护作用进行研究。首先通过酶解、超滤、Sephadex G-25柱分离技术从文蛤中分离纯化出具有肝修复作用的文蛤寡肽,经检测该目标肽的氨基酸序列为Gln-Leu-Asn-Trp-Asp。然后建立四氯化碳(CCl_4)致小鼠急性肝损伤模型,测定小鼠肝脏指数;检测小鼠血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-glutamyltransferase,γ-GT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力及甘油三酯(triglyceride,TG)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;苏木精-伊红染色观察肝脏病理学改变;免疫组化法测定肝组织TNF-α、NF-κB蛋白表达量。结果表明:MMO组与模型组比较,小鼠肝指数显著降低(P<0.05);血清中ALT、AST、γ-GT活力显著降低(P<0.05),γ-GT活力最高降幅达到47.16%;SOD活力显著升高(P<0.05);TG、MDA水平显著降低(P<0.05),最高降幅分别达到31.88%和28.83%。;苏木精-伊红染色观察肝组织结构明显好转;TNF-α、NF-κB蛋白表达量显著降低。因此,MMO对CCl_4小鼠急性肝损伤有较为明显的保护作用。 展开更多
关键词 文蛤寡肽 四氯化碳 急性肝损伤
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文蛤寡肽对高脂饮食诱导小鼠肾损伤的修护作用 被引量:2
10
作者 王佳佳 叶蕾 +2 位作者 杨最素 余方苗 丁国芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第15期145-151,共7页
目的:研究文蛤寡肽(Meretrix meretrix oligopeptides,MMO)对高脂饮食诱导小鼠肾损伤的修护作用。方法:建立高脂饲料致小鼠慢性肾损伤模型,通过MMO灌胃30 d后,测定小鼠肾脏指数,检测小鼠血清甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total ... 目的:研究文蛤寡肽(Meretrix meretrix oligopeptides,MMO)对高脂饮食诱导小鼠肾损伤的修护作用。方法:建立高脂饲料致小鼠慢性肾损伤模型,通过MMO灌胃30 d后,测定小鼠肾脏指数,检测小鼠血清甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)浓度,以及小鼠肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,计算小鼠动脉粥样硬化指数(atherosclerosis index,AI),苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察小鼠肾脏病理学改变,免疫组化法测定肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转录生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)蛋白表达量。结果:MMO组与模型组比较,小鼠肾脏指数,血清中TG、TC、LDL-C浓度及AI显著下降,HDL-C浓度显著升高,肾组织匀浆中SOD、GSH-Px活力显著升高,MDA含量显著降低,HE染色观察肾组织结构明显好转,免疫组化结果显示MMO可降低肾损伤小鼠α-SMA、TGF-β1蛋白表达水平。结论:MMO对高脂饮食诱导的小鼠肾损伤有较为明显的修护作用。 展开更多
关键词 文蛤寡肽 高脂饲料 肾损伤 修护作用
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仁和解酲汤对急性酒精中毒小鼠肝损伤干预作用的实验研究 被引量:4
11
作者 汪丙柱 丁贤君 +4 位作者 杨最素 张蓉蓉 刘中良 谢琼 周国儿 《中国中医药科技》 CAS 2019年第4期512-515,共4页
目的:探讨仁和解酲汤对小鼠急性酒精中毒肝损伤的干预作用。方法:将32只雄性ICR小鼠分为正常组、模型组、阳性对照组(异甘草酸镁注射液腹腔注射)和中药组(仁和解酲汤灌胃) 4组,每组8只。实验7 d后处死小鼠取血清和肝组织进行生化指标的... 目的:探讨仁和解酲汤对小鼠急性酒精中毒肝损伤的干预作用。方法:将32只雄性ICR小鼠分为正常组、模型组、阳性对照组(异甘草酸镁注射液腹腔注射)和中药组(仁和解酲汤灌胃) 4组,每组8只。实验7 d后处死小鼠取血清和肝组织进行生化指标的检测,光镜观察肝组织形态学变化和免疫组化方法检测NF-κB(nuclear factor-kappa B,核转录因子-κB)蛋白的表达。结果:与模型组相比,中药组和阳性药物组均能降低血清ALT、AST水平,增强肝组织中SOD、GSH-PX、ADH和ALDH活性,降低MDA的含量;病理学观察可见中药组和阳性药物组酒精性损伤后肝组织的结构改善;免疫组化显示两药物组肝组织中NF-κB蛋白的表达较模型组下降。结论:仁和解酲汤对急性酒精中毒小鼠的肝损伤具有明显的保护作用,其机制与增强抗氧化应激、降低NF-κB蛋白的表达相关。 展开更多
关键词 仁和解酲汤 酒精性肝损伤 肝保护作用 氧化应激 NF-ΚB蛋白 小鼠
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Guizhifuling Pills alleviates CCl-induced liver fibrosis in mice via modulation of Nrf2/HO-1 and NF-κB signaling pathways
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作者 Xu Baogui Zheng Jiawen +2 位作者 Tian Xiaoxiao yang zuisu Ding Xianjun 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期233-234,共2页
Liver fibrosis is the common consequence underlying most chronic liver diseases.Guizhifuling(GZFL)pills are a traditional medicine described in Jin Gui Yao Lue,which has been confirmed to exert an anti-fibrotic effect... Liver fibrosis is the common consequence underlying most chronic liver diseases.Guizhifuling(GZFL)pills are a traditional medicine described in Jin Gui Yao Lue,which has been confirmed to exert an anti-fibrotic effect.However,underlying mechanisms of GZFL in liver fibrosis remain understood.The present study was aimed to investigate the protective effects and the underlying mechanism of GZFL on liver fibrosis.We established the carbon tetrachloride(CCl,)-model of mice to induce hepatic fibrosis. 展开更多
关键词 protective Liver HEPATIC
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Antihepatofibrotic effect of Guizhifuling pill(桂枝茯苓丸) on carbon tetrachloride-induced liver fibrosis in mice 被引量:4
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作者 XU Baogui ZHENG Jiawen +4 位作者 TIAN Xiaoxiao YUAN Falei LIU Zhongliang yang zuisu DING Xianjun 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CSCD 2022年第5期715-722,共8页
OBJECTIVE: To evaluate the protective effects and the underlying mechanism of Guizhifuling pill(桂枝茯苓丸, GZFL) on carbon tetrachloride(CCl4)-induced hepatic fibrosis in mice. METHODS: Male ICR mice by intraperitone... OBJECTIVE: To evaluate the protective effects and the underlying mechanism of Guizhifuling pill(桂枝茯苓丸, GZFL) on carbon tetrachloride(CCl4)-induced hepatic fibrosis in mice. METHODS: Male ICR mice by intraperitoneally administered with 20% CCl4(mixed 1∶4 in soybean oil) to induce liver fibrosis. Mice that underwent CCl4 were orally with GZFL. Using hematoxylin and eosin and Masson staining to examine the pathological changes in liver tissue. Serum biochemical parameters, antioxidant enzyme activity and proinflammatory cytokines was assessed. Nuclear factor-kappa B(NF-κB) pathway and nuclear factor-erythroid 2-related factor 2(Nrf2) family members were evaluated by Western blotting. RESULTS: Our findings indicated that GZFL could effectively suppress the progression of liver fibrosis in mice, which was determined based on the improvement in liver function and reduction of collagen deposition. GZFL treatment also decreased the level of cytokines and increased the activity of antioxidant enzymes in liver tissue. Moreover, GZFL exerted anti-inflammatory and antioxidant effects through regulating the Nrf2-mediated antioxidant system and inhibiting the NF-κB pathway. CONCLUSIONS: GZFL may prevent the progression of liver fibrosis by regulating the Nrf2/heme oxygenase-1 and NF-κB signaling pathways, thereby highlighting its role in the management of liver fibrosis. 展开更多
关键词 liver fibrosis NF-E2-related factor 2 heme oxygenase-1 NF-kappa B Guizhifuling pill
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青蛤免疫调节肽的酶解制备工艺研究 被引量:7
14
作者 叶盛旺 杨最素 +3 位作者 李维 唐云平 余方苗 丁国芳 《食品工业》 CAS 北大核心 2018年第5期1-4,共4页
为研究酶法制备具有免疫调节作用的青蛤多肽,以青蛤肉为原料,分别采用胰蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解,以小鼠巨噬细胞RAW 264.7的相对增殖率为指标,筛选出最佳酶种,再通过单因素试验和L_(16)(4~5)正... 为研究酶法制备具有免疫调节作用的青蛤多肽,以青蛤肉为原料,分别采用胰蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解,以小鼠巨噬细胞RAW 264.7的相对增殖率为指标,筛选出最佳酶种,再通过单因素试验和L_(16)(4~5)正交试验确定该酶的最佳酶解条件。结果表明:最佳酶种是胃蛋白酶,最佳酶解条件为p H2、温度42℃、料液比1︰10(g/m L)、加酶量1 600 U/g、时间8 h,所得酶解产物对RAW 264.7细胞的相对增殖率为76.15%。该工艺研究为青蛤免疫调节多肽的分离纯化及开发具有免疫调节作用的功能食品提供试验依据。 展开更多
关键词 青蛤 酶解 免疫调节肽 单因素试验 正交试验
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沙蚕蛋白酶的荧光标记及细胞摄取机制研究
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作者 杲亚许 丁国芳 +5 位作者 杨最素 余方苗 黄芳芳 唐云平 陈艳 陈锐 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第2期243-255,共13页
该文利用FITC对沙蚕蛋白酶(NAP)进行荧光标记,并通过薄层色谱法、红外光谱法、紫外光谱法及荧光光谱法对标记物进行表征,紫外分光光度法计算标记度。通过测定NAP与FITCNAP的酶促反应动力学参数来比较NAP在标记前后的活性,同时应用MTT法... 该文利用FITC对沙蚕蛋白酶(NAP)进行荧光标记,并通过薄层色谱法、红外光谱法、紫外光谱法及荧光光谱法对标记物进行表征,紫外分光光度法计算标记度。通过测定NAP与FITCNAP的酶促反应动力学参数来比较NAP在标记前后的活性,同时应用MTT法考察NAP标记前后对NCI-H1299细胞毒性的影响。流式细胞术研究NCI-H1299细胞摄取FITC-NAP的机制,荧光显微镜定性观察NCI-H1299细胞对FITC-NAP的摄取。结果表明,每分子标记物约含1.78分子FITC,其最佳荧光激发波长为490 nm、发射波长为515 nm;荧光标记后NAP的活性未受到显著影响; NCI-H1299细胞对FITC-NAP的摄取与药物浓度、作用时间呈正相关;氧化苯砷组的荧光强度低于FITC-NAP组且有极显著差异(P<0.01),因此NAP的摄取机制为内吞。进一步研究发现, NCI-H1299细胞摄取NAP受到网格蛋白依赖性内吞和小窝/脂筏蛋白介导的内吞共同作用。荧光显微镜观察发现,随着时间的增加,更多的细胞摄入FITC-NAP,且主要分布在细胞膜及细胞质中,细胞核中未见分布。 展开更多
关键词 沙蚕蛋白酶 FITC 荧光标记 细胞摄取 药物动力学
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