香瓜茄干制品的开发及其风味成分分析

为提高香瓜茄的产品价值和明确其风味物质组成,将香瓜茄去皮、切丁,在30~80℃下进行热风干燥,通过感官评价结合多酚类物质、可溶性糖、游离氨基酸含量的测定与分析优化干燥温度。结果表明:50℃干燥制成的果干具有色泽金黄、奶香兼甜香浓郁、滋味甜醇等特征,风味最优,其可溶性糖含量为83.06%±5.07%,高效液相色谱检测到蔗糖(517.19 mg/g)、果糖(262.77 mg/g)和葡萄糖(154.20 mg/g)为主要的甜味物质。全二维气相色谱-飞行时间质谱鉴定到595个挥发性物质,相对含量超过1%的有21个,其中琥珀酸二乙酯(2.64%)、辛酸乙酯(1.69%)等5种呈果香,γ-壬内酯(2.08%)、甘油(1.73%)呈甜香,3,3-二甲基丙烯酸(3.62%)、2-甲基丁酸(3.51%)、己酸(2.08%)呈奶香,构成了果干的奶香甜香浓郁的特征。本研究开发了一种风味优良的香瓜茄果干,明确了其风味物质组成,为后续开发提供了基础。

不同血清抗苗勒管激素水平对多囊卵巢综合征患者助孕结局的影响

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者不同血清抗苗勒管激素(AMH)水平与卵巢反应及体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕结局的关系,阐明血清AMH水平对PCOS患者助孕结局的影响,为PCOS患者助孕治疗方案的选择提供依据。方法:选取行IVF-ET助孕21~39岁患者1 837例,根据是否被诊断为PCOS分为PCOS组(n=910)和非PCOS组(n=927);PCOS组中有437例患者进行新鲜单优质囊胚移植,根据其血清AMH水平分为AMH<7μg·L^(-1)组和AMH≥7μg·L^(-1)组,并根据患者年龄分为20~24岁组、 25~29岁组、 30~34岁和35~39岁组。比较PCOS组与非PCOS组患者年龄、血清AMH水平、促性腺激素(Gn)用量、人绒毛膜促性腺激素(HCG)日雌二醇(E2)值、获卵数、预防卵巢过度刺激综合征(OHSS)取消移植率和临床妊娠率;分析PCOS组不同血清AMH水平患者Gn用量、HCG日E2值、获卵数、预防OHSS取消移植率和临床妊娠率;比较PCOS组中不同年龄段妊娠组与非妊娠组患者血清AMH水平。结果:PCOS组患者血清AMH水平、HCG日E2值、获卵数和预防OHSS取消移植率均高于非PCOS组(P<0.05),Gn用量和临床妊娠率则低于非PCOS组(P<0.05)。PCOS组患者血清AMH水平与HCG日E2值和获卵数呈正相关关系(r=0.502, P=0.001;r=0.233, P=0.001),与Gn用量呈负相关关系(r=-0.400, P=0.001)。PCOS组中AMH≥7μg·L^(-1)组患者HCG日E2值、获卵数和预防OHSS取消移植率较AMH<7μg·L^(-1)组增加(Z=-3.952,P=0.001;Z=-2.858,P=0.004;χ^(2)=23.154,P=0.001);Gn用量和临床妊娠率较AMH<7μg·L^(-1)组降低(Z=-6.727, P=0.001;χ^(2)=6.640, P=0.010)。PCOS组中妊娠组患者血清AMH水平低于非妊娠组(Z=-4.192, P=0.001);在25~29岁组和30~34岁组中妊娠组患者血清AMH水平低于非妊娠组(Z=-2.197,P=0.028;Z=-3.700,P<0.01)。结论:对血清AMH≥7μg·L^(-1) PCOS患者应预处理以降低AMH后再行助孕,在IVF-ET助孕中应掌握好Gn用量,以降低HCG日E2值,降低预防OHSS取消移植率,争取有鲜胚移植机会并提高临床妊娠率,改善助孕结局。

软土地区路堤填筑下桥梁桩基变形控制计算

我国沿海地区软土深厚,高速公路与城市道路共线工程存在施工交织的复杂工况,软基处理及后续路堤荷载产生的地基沉降和水平位移,可能对邻近先行施工的桥梁桩基产生影响,进而影响桥梁结构安全。为防止深厚软土地区路堤填筑可能引起的邻近桩基破坏和不同路段差异沉降过大的问题,采用桩-板式复合地基处理方案进行加固处理。鉴于我国现有规范对于桥梁桩基变形尚未有明确统一的控制标准,依托广东省中山市地区某路桥共线工程,提出适合当地的桩基变形控制计算方法和指标,分析了不同软基处理方案路堤填筑下桥桩桩身内力及变形。结果表明:就地固化结合混凝土管桩方案比就地固化结合水泥土搅拌桩方案更能控制桥桩内力和变形;该地区路桥共线工程中桥桩应采用桩身水平位移控制在25 mm以内,桩身裂缝控制在0.2 mm以内的双控指标;为了改善桥桩的变形及内力,在原方案基础上,提出采用泡沫轻质土填筑的改进方案。

vWF抗原和活性联合检测对恶性肿瘤患者静脉血栓事件的预测价值

目的探讨恶性肿瘤患者血管性血友病因子(von Willebrand factor antigen,vWF)的抗原(vWF antigen,vWF:Ag)、活性(vWF activity,vWF:Ac)水平预测恶性肿瘤患者发生静脉血栓栓塞(venous thromboembolism,VTE)事件的临床价值。方法选取2020年6月至2021年12月在南阳市中心医院就诊的恶性肿瘤患者167例作为恶性肿瘤组,其中男97例,女70例,年龄(52.53±10.58)岁;选取同期体检正常、与恶性肿瘤组相匹配的135例志愿者作为健康对照组,其中男91例,女44例,年龄(47.56±8.09)岁。检测两组vWF:Ag和vWF:Ac水平。采用非参数Mann-Whitney U检验分析恶性肿瘤组与健康对照组之间vWF的差异性,采用Spearman秩相关分析vWF:Ag与vWF:Ac之间的相关性。Cox比例风险回归模型筛选恶性肿瘤患者的预后影响因素。随访90 d,通过受试者工作特征曲线(ROC)评估vWF:Ag、vWF:Ac对患者发生VTE事件的预测价值。用Kaplan-Meier法进行生存分析。结果与健康对照组相比,恶性肿瘤组血浆vWF:Ag和vWF:Ac水平均显著升高[197.38%(143.54%,328.97%)比117.00%(97.70%,147.40%)、191.87%(130.85%,265.69%)比117.90%(99.50%,153.00%),Z=8.76、7.91,均P<0.001],且vWF:Ag与vWF:Ac呈正相关(r=0.783,P<0.001)。随访期间,VTE事件发生组的vWF:Ag、vWF:Ac水平高于未发生VTE事件组[432.38%(248.14%,539.55%)比183.00%(126.96%,246.02%)、258.38%(174.11%,373.84%)比175.42%(122.05%,251.00%),Z=5.65、3.89,均P<0.001]。Cox多因素回归分析显示,vWF:Ag是恶性肿瘤患者90 d随访期间发生VTE事件的独立影响因素(风险比=1.03,P<0.001)。vWF:Ag和vWF:Ac预测恶性肿瘤患者发生VTE事件的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.818、0.719,灵敏度分别为78.8%、69.7%,特异度分别为75.4%、67.9%,两者联合检测的预测价值更高(AUC=0.825)。vWF:Ag≥244.98%的恶性肿瘤患者的总体VTE事件发生时间早于vWF:Ag<244.98%的患者(χ^(2)=20.49,P<0.001)。结论恶性肿瘤患者血浆vWF:Ag、vWF:Ac水平均显著升高,且两者之间的增长具有较高的一致性。vWF:Ag是恶性肿瘤患者发生VTE事件的独立影响因素,vWF可能是预测恶性肿瘤患者VTE事件的潜在标志物。

东方蜜蜂微孢子虫KRAB-A蛋白的分子特性及系统进化分析

为明确KRAB-A的分子特性并进行东方蜜蜂微孢子虫与其他物种KRAB-A蛋白的系统进化分析,以期丰富KRAB-A的基本信息,使用NCBI数据库中的ORF工具预测KRAB-A蛋白的氨基酸序列。利用ExPASy网站上的相关软件预测和分析KRAB-A蛋白的亲水性、信号肽、磷酸化位点、二级结构及三级结构。通过Mega11.0软件采用邻接法构建基于KRAB-A蛋白的系统进化树。结果显示,KRAB-A基因可编码1018个氨基酸;KRAB-A蛋白的分子式为C5314H8526N1522O1556S43,分子量约为120.00kDa,等电点为9.33,脂溶系数为79.20,亲水性为-0.75;KRAB-A含有41个丝氨酸、21个酪氨酸和16个苏氨酸磷酸化位点,1个H2C2模体,但不含有信号肽;KRAB-A含44.40%的α-螺旋,5.40%的β-转角,16.50%的延伸及33.69%的无规卷曲;蜜蜂微孢子虫的1个KRAB-A蛋白(NAPIS_ORF00138)与明球囊霉的2个KRAB-A蛋白(RCL2_000589200和RCL2_003114000)中存在与东方蜜蜂微孢子虫KRAB-A蛋白中相同的H2C2模体;东方蜜蜂微孢子虫KRAB-A(AAJ76_2380003054)与其姐妹种蜜蜂微孢子虫KRAB-A(NAPIS_ORF01514)聚为一支。研究结果明确了东方蜜蜂微孢子虫KRAB-A基因的分子特性,揭示KRAB-A可能是一种亲水性蛋白和胞内蛋白,东方蜜蜂微孢子虫KRAB-A(AAJ76_2380003054)与蜜蜂微孢子虫KRAB-A(NAPIS_ORF01514)间具有很高的保守性,为进一步的功能研究提供依据。

血清降钙素原、超敏C反应蛋白联合检测对急性淋巴细胞白血病患者感染的诊断价值

目的探讨血清降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)联合检测对急性淋巴细胞白血病(ALL)患者感染的诊断价值。方法选取204例ALL患者,均接受病原学检查,依据检查结果分为感染组和对照组,比较两组患者的血清PCT、hs-CRP水平。以病原学检查结果为金标准,评估PCT、hs-CRP单独及联合检测对ALL患者感染的诊断价值。结果病原学检查结果显示,204例ALL患者中,合并感染104例,未合并感染100例。感染组患者血清PCT、hs-CRP水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。血清PCT单独检测诊断ALL患者感染的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为82.69%、68.00%、72.88%、79.07%、0.507;血清hs-CRP单独检测诊断ALL患者感染的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为87.50%、79.00%、81.25%、85.87%、0.665;PCT+hs-CRP检测诊断ALL患者感染的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为96.15%、65.00%、74.07%、94.20%、0.612。PCT+hs-CRP检测诊断ALL患者感染的灵敏度、阴性预测值均高于二者单独检测。结论血清PCT、hs-CRP联合检测对ALL患者的感染情况具有较高的诊断价值。

红细胞参数对慢性粒细胞白血病慢性期的诊断价值

目的探讨红细胞参数对慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)的诊断价值。方法选取106例CML-CP患者作为CML-CP组,另选取100例健康体检者作为对照组。比较两组受试者各红细胞参数,分析红细胞参数对CML-CP的诊断效能。结果CML-CP组患者红细胞体积分布宽度(RDW)明显高于对照组,血红蛋白(Hb)、血细胞比容(HCT)和平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Hb检测诊断CML-CP的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为83.02%、93.00%、92.63%、83.78%、0.7602;HCT检测诊断CML-CP的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为76.42%、95.00%、94.19%、79.17%、0.7142;MCHC检测诊断CML-CP的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为69.81%、90.00%、88.10%、73.77%、0.5981;RDW检测诊断CML-CP的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为94.34%、92.00%、92.59%、93.88%、0.8634;Hb+HCT+MCHC+RDW联合检测诊断CML-CP的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为97.17%、88.00%、89.57%、96.70%、0.8517。结论红细胞参数尤其是RDW对于CML-CP患者的诊断具有一定价值。

miR-365a-3p通过BMI1基因影响结直肠癌干细胞特性抑制结直肠癌发生发展的机制研究

目的 研究mi R-365a-3p在结直肠癌组织中的表达,明确其在结直肠癌发生发展中的作用。方法 收集南方医科大学南方医院2018年9月至2019年9月住院患者的结直肠癌标本,通过Q-PCR方法检测43对癌及癌旁正常组织中miR-365a-3p的表达,分析其与患者T分期的关系;通过生物信息学网站、双荧光素酶实验验证mi R-365a-3p与B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(BMI1)基因的关系;设定空白为对照组,mi R-365a-3p为实验组,miR-365a-3p抑制剂为干扰组;通过CCK8及干细胞成球实验检测三组细胞增殖能力及干细胞成球能力;通过Q-PCR方法检测三组细胞中CD44、CD133及Lgr5的表达。结果 mi R-365a-3p在正常组织中的表达高于癌组织(P <0.05);miR-365a-3p与BMI1结合后,实验组中CD44、CD133及Lgr5表达下降,而干扰组升高(P <0.05);实验组细胞的增殖及成球能力下降,而干扰组升高(P <0.05)。结论 miR-365a-3p通过结合BMI1基因下调干细胞相关基因的表达,进而抑制结直肠癌的发生发展。

拟穴青蟹两个形态群体线粒体呼吸速率对低温应激的响应

前期的研究结果表明拟穴青蟹螯足腕节外缘有1根刺(Sp1)和有2根刺(Sp2)的群体其代谢水平存在季节差异。实验进一步比较拟穴青蟹这两个形态群体鳃线粒体呼吸速率对低温应激的响应。温度从25℃骤降至15℃,在24 h试验过程中Sp1和Sp2线粒体呼吸速率变化都很小。温度骤降至11℃,以琥珀酸或丙酮酸+苹果酸为底物,Sp1鳃测得的状态3和4速率均表现为显著提高,Sp2鳃线粒体呼吸速率上升的程度不如Sp1明显。温度骤降至7℃对Sp1和Sp2线粒体呼吸速率的影响较小,应激第24 h时Sp1鳃仅以琥珀酸为底物测得的状态3速率显著升高,但Sp2鳃以琥珀酸为底物测得的状态3速率却反而降低。因此,一定程度的低温应激青蟹的代谢水平将有所补偿,但温度下降幅度过大机体的温度补偿能力可能会受到抑制。

松阳花鳖与中华鳖四个地理种群形态差异比较研究

通过对松阳花鳖、德清花鳖、黄沙鳖、黄河鳖和洞庭湖鳖5个群体体色、背部花纹和腹部黑斑的观察,同时测量这5个群体的29项生物学外部形态指标,采用聚类分析和主成分分析方法进行统计分析。结果表明:与其他中华鳖群体相比,松阳花鳖在体色上与其他4个群体存在着差异,其背部主要呈青黑色或青褐色,甲壳上雪花样斑点较多且明显,腹部斑块图案较小,颜色较浅呈青色,腹部7个斑块出现的概率均较低,出现无斑块的概率为31.82%。其中斑块1出现的概率最低。聚类分析显示5个中华鳖群体可分为三支,松阳花鳖与黄沙鳖相距最近,聚为一支;黄河鳖和德清花鳖聚为一支;洞庭湖鳖与其他4个群体相距较远,单独聚为一支。主成分分析结果与聚类分析结果一致,且群体间形态差异主要表现在中华鳖背甲周长、裙边宽、头部和尾部的形态变化。其中松阳花鳖、德清花鳖和黄河鳖的后侧裙边宽/背甲长较大,与其他群体差异显著。

后疫情时代病理学教学改革实践与探索

新冠肺炎疫情期间,线上教学成为本科医学教育的主要途径,而在当前疫情防控常态化背景下,开展线上线下融合式教学已是大势所趋。文章首先总结疫情期间线上教学利用的资源及具体教学手段;其次,对线上教学效果进行初步评价和分析;最后,针对发现的问题和实际情况提出今后全面开展线上线下融合式教学的具体调整方案,以期为医学基础教育及今后的教学改革提供有价值的参考。

浙江省女大学生HPV疫苗接种意向现状及影响因素

目的了解浙江省女大学生人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)疫苗接种意向,为大学生群体推广HPV疫苗提供依据。方法根据经济发展水平进行分层,从浙江省抽取杭州、绍兴、丽水3个城市,采用自行设计的问卷随机抽取在校女大学生进行调查。结果697名调查对象中,62.7%的人听说过HPV,64.7%的人听说过HPV疫苗,66.3%的人愿意主动接受HPV疫苗接种。不愿意接种疫苗的原因主要有不了解HPV疫苗、不确定疫苗的安全性与有效性、接种疫苗花费高。多因素分析结果显示,听说过HPV疫苗、接种HPV疫苗所存在的障碍较少、在预防宫颈癌方面自我效能高的女大学生更愿意接种HPV疫苗(均P<0.05)。结论浙江省女大学生对HPV及其疫苗的知晓率不高,疫苗接种存在阻碍因素,需要及时采取疫苗接种宣传教育措施。

非选择性序贯移植在反复胚胎种植失败患者冻融周期中的应用

目的:探讨在解冻周期中行非选择性胚胎序贯移植能否提高反复胚胎种植失败(RIF)患者的临床妊娠率。方法:回顾分析119例在本科行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)的RIF患者,按移植不同类别的胚胎分为非选择性胚胎序贯移植100例(序贯移植组),移植第3天胚胎(D3胚胎)和第5或第6天囊胚(D5/D6囊胚);非选择性卵裂期胚胎移植896例(D3胚胎移植组);非选择性囊胚移植123例(囊胚移植组)。3组均为解冻移植周期,每例患者共移植2枚胚胎。分析比较3组助孕结局。结果:序贯移植组临床妊娠率(49.0%)高于D3胚胎移植组(36.7%)(P<0.05);3组着床率分别为29.0%、22.7%、28.5%,序贯移植组和D3胚胎移植组比较、D3胚胎移植组和囊胚移植组比较有统计学意义(P<0.05)。活产率、流产率均无差异(P>0.05)。结论:在解冻周期中非选择性序贯移植可改善RIF患者的妊娠结局,对RIF患者进行序贯移植可作为有效的胚胎移植策略。

穴位注射盐酸甲氧氯普胺联合穴位按压、敷贴预防胃癌化疗患者恶心呕吐临床研究

目的:观察穴位注射盐酸甲氧氯普胺联合穴位按压、敷贴预防胃癌化疗患者恶心呕吐的临床疗效。方法:选取180例胃癌化疗患者,按随机数字表法分为对照组和观察组各90例。对照组给予化疗和昂司丹琼治疗,观察组在对照组基础上给予穴位注射盐酸甲氧氯普胺联合穴位按压、敷贴治疗。比较2组恶心程度分级、呕吐情况、生活质量及Karnofsky功能状态(KPS)评分。结果:治疗后,观察组恶心程度分级轻于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组呕吐缓解率为81.11%,高于对照组64.44%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组生活质量评分及KPS评分较治疗前升高,且观察组生活质量评分及KPS评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:穴位注射盐酸甲氧氯普胺联合穴位按压、敷贴能明显改善胃癌化疗患者恶心呕吐情况,提高患者生活质量。

浅谈防腐涂料和镍磷合金镀组合方式在氟化工换热设备中的应用

化工设备在使用过程中的腐蚀现象是不可回避的问题,产生腐蚀会给化工设备的使用带来诸多安全隐患,缩短其使用寿命,因此在化工设备制造时就必须采取切实有效的防腐措施,以延缓或者避免腐蚀的发生,从而延长化工设备的使用寿命,促进安全生产。氟化工行业因流程中普遍含有氢氟酸等强腐蚀性介质,对有温度变化或气液相变化的换热设备的防腐蚀能力要求更为苛刻。总结了镍磷合金镀和新型防腐涂料组合的防腐方式在氟化工换热设备中的试用情况及效果,是对氟化工设备经济、有效的防腐蚀方法的一种探索。

针灸联合个体化机械通气治疗急性呼吸窘迫综合征临床研究

目的:观察针灸疗法联合个体化机械通气治疗急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的临床疗效。方法:按随机数字表法将96例ARDS患者分为对照组与观察组各48例。对照组采取个体化机械通气治疗,观察组在对照组基础上联合针灸治疗。比较2组临床疗效及治疗前后动脉血气、呼吸参数、肺损伤以及炎症反应指标。比较2组脱机时间、脱离重症监护室(ICU)时间、呼吸机相关性肺炎(VAP)发生率及病死率。结果:观察组总有效率93.75%,高于对照组79.17%(P<0.05)。治疗后,2组呼气末二氧化碳分压(PETCO_(2))、氧合指数(PaO2/FiO2)、肺静态顺应性(Cst)均较治疗前升高,动脉二氧化碳分压(PaCO_(2))、气道平台压(Pplat)、呼气终末正压(PEEP)均较治疗前降低(P<0.05)。治疗后,2组肺表面活性蛋白D(SP-D)、白细胞介素-8(IL-8)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均低于治疗前(P<0.05),且观察组炎症因子水平低于对照组(P<0.05)。观察组脱机时间、脱离ICU时间早于对照组(P<0.05)。2组VAP发生率及病死率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:针灸联合个体化机械通气治疗可减少患者炎症反应及肺损伤,改善患者预后,提高临床疗效。

Preparation of Nanometric Particles of Aluminum Nitride by Pyrolysis of Diethylaluminun Azide

Thermal stabilities of diethylaluminum azide were studied by means of theoretical analysis and expriments.The results have shown that diethylaluminum and azid be heated to vigorous refluxing under vacuum(400 Pa) at temperature as high as 420℃ without incident of explosion and decomposes smoothly during 460 ～580℃ to form nanometric particles of aluminum nitride in the aerosol synthesis reactor. A new way of preparing nanometric parties of aluminum nitrideis found.

河鲀毒素诱导菊黄东方鲀膜转运蛋白基因的表达

为探究参与河鲀肝脏和皮肤累积河鲀毒素(Tetrodotoxin, TTX)的过程及相关调控基因,按每克体质量河鲀0.25μg TTX剂量尾部肌肉注射人工繁育的菊黄东方鲀(Takifugu flavidus),发现肝脏中TTX含量在注射后4 h时最高(19.12 ng/g),24 h下降到8.92 ng/g, TTX主要在肝实质细胞中累积;皮肤中TTX含量一直处于上升趋势,4 h为13.70 ng/g, 24 h为22.91 ng/g;TTX主要在皮肤表皮层、基底层细胞中累积。比较对照组和注射24 h后肝脏和皮肤转录组发现:TTX注射导致肝脏组织338个基因上调、350个基因下调;而皮肤组织有598个基因上调,同时有595个基因下调;RT-qPCR验证slc2a12、slc5a7、slc25a22、slc25a15、slc35a3、arap1、ugt2a2、ggt5、psbp2等膜转运蛋白相关基因在注射TTX后在肝脏和皮肤中的表达水平显著上调,可能与TTX累积过程有关。

急性髓系白血病(M3)伴多发性骨髓瘤1例

患者,男,51岁,以间断发热10余天,齿龈出血1 d为主诉于2019年9月3日入院。血常规:WBC 3.20×109/L,RBC 1.43×1012/L,HGB 45 g/L,PLT 11×109/L。骨髓象:增生尚活跃。粒系异常增生占59.5%,异常早幼粒细胞占58.0%,POX染色:强阳性。红系增生受抑,仅见6.0%,以中晚红细胞为主,形态大致正常。成熟红细胞部分呈缗钱状排列。淋巴细胞占9.5%,形态大致正常。浆细胞占25.0%,均为原始幼稚浆细胞,可见双核浆细胞。

环状RNA ame_circ_000115调节蜜蜂球囊菌胁迫下意大利蜜蜂幼虫肠道基因表达

环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类新型非编码RNA,已被证实可通过竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)调控网络等多种方式参与调节昆虫基因表达和免疫应答。目前,circRNA在蜜蜂免疫应答中的作用尚不清楚。本研究对意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)ame_circ_000115(简称ac115)的反向剪切(back splicing,BS)位点进行验证。采用RT-qPCR检测蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)胁迫下意蜂幼虫肠道内ac115的表达谱,利用双荧光素酶报告基因试验验证ac115与ame-miR-13b的结合关系。通过饲喂特异性siRNA对蜜蜂球囊菌胁迫的意蜂幼虫肠道内ac115进行干扰,进而检测干扰ac115对宿主免疫应答相关的6个基因表达量的影响。结果表明,ac115的BS位点真实存在;相较于未接种组,蜜蜂球囊菌接种组4日龄幼虫肠道内ac115的表达量极显著上调(P<0.0001),5和6日龄幼虫肠道内ac115显著上调表达(P<0.05);siRNA-circ_000115饲喂组4、5和6日龄幼虫肠道内ac115的特异性条带亮度逐渐减弱,而siRNA-scramble饲喂组4、5和6日龄幼虫肠道内ac115的特异性条带亮度均较高且无明显变化;与siRNA-scramble饲喂组相比,siRNA-circ_000115饲喂组4日龄幼虫肠道内ac115的表达量显著下调(P<0.05),5和6日龄幼虫肠道内ac115的表达量均极显著下调(P<0.001);ame-miR-13b在意蜂幼虫肠道内真实存在和表达;ac115和ame-miR-13b之间存在真实的结合关系;相比于siRNA-scramble饲喂组,siRNA-circ_000115饲喂组6日龄幼虫肠道内抗菌肽基因hymenoptaecin和abaecin的表达量均显著上调(P<0.05),而蜕皮激素受体(ecdysone receptor,Ecr)的表达量极显著下调(P<0.01)。研究结果表明,ac115在意蜂幼虫肠道内真实表达,ac115中的BS位点真实存在,饲喂siRNA的方式能实现意蜂幼虫肠道内ac115的有效干扰,ac115通过吸附ame-miR-13b潜在调控Ecr表达,通过非ceRNA的方式调控hymenoptaecin和abaecin表达进而参与宿主的免疫应答。