中国滇西地区葡萄炭疽病病原菌的鉴定及其杀菌剂筛选

本研究旨在弄清滇西地区葡萄炭疽病的病原菌及筛选有效抑制病原菌的杀菌剂.从云南西部不同地区采集葡萄病叶样品,通过分离培养和纯化共获得13株真菌纯培养,经离体叶片接种证病试验验证,其中7株刺盘孢真菌(编码PT23-01~PT23-07)为葡萄炭疽病的致病菌.通过PCR扩增获得这7个致病菌株的内转录间区(ITS)、肌动蛋白、钙调蛋白、组蛋白3和β-微管蛋白2基因(ACT,CAL,HIS3,TUB2)序列并提交到NCBI GenBank,用Megablast软件在线进行Blast-n比对结果显示,这7个菌株与刺盘孢属相应种类的相似性分别达到99.27%~100%.进一步用MEGA7.0构建基于4个蛋白基因的系统演化树分析,其显示PT23-01,PT23-03,PT23-04和PT23-05与盘长孢刺盘孢(Colletotrichum gloeosporioides jo.3)聚于同一末端分枝(BT=100),PT23-2和PT23-07与果生刺盘孢(C.fructicola AV103)处于同一分枝(BT=94),而PT23-06则与暹罗刺盘孢(C.siemense ABS125375)聚为同一分枝(BT=98),这与Blast-n比对的结果一致.在所鉴定的3种病菌中,C.gloeosporioides是优势病原菌,从滇西各地区样品中均被分离到;而C.siemense在文献中尚未见有侵染葡萄的报道,是导致葡萄炭疽病的一种新病原菌;本研究简要地描述了这3种病菌的形态特征.通过菌落生长法测定,8种供试杀菌剂都能不同程度地抑制盘长孢刺盘孢的菌落生长,不同供试药剂对同一种菌的抑菌效果没有显著差异(p>0.05).25%甲硫乙唑醇SA和30%苯甲吡唑脂SA的抑制作用最强,抑菌率分别达92.25%和95.87%(p<0.01),EC 50值分别为1.103 mg/mL和1.521 mg/mL.室内测定结果显示,两种药剂对葡萄炭疽病也具有很好的控制效果,控病率分别达到85.03%和91.54%(p<0.01).本研究结果为滇西地区葡萄炭疽病的正确诊断鉴定和有效控制奠定了科学基础.

血清可溶性内皮糖蛋白水平与复发性流产女性早期妊娠流产的相关性

目的探讨血清可溶性内皮糖蛋白(sEng)与复发性流产(RSA)女性早期妊娠流产的相关性。方法纳入2021年1月至2023年1月于海南省妇女儿童医学中心妇产科门诊就诊的197例RSA早孕期女性作为RSA组,98例同期同一医院就诊的正常早孕期女性作为正常早孕期组。随访妊娠13^(+6)周之前的妊娠结局,将RSA组分为RSA流产组(n=66)和RSA继续妊娠组(n=131)。比较三组血清sEng水平,并分析其与RSA女性早期妊娠流产的相关性。结果正常早孕期组女性妊娠13^(+6)周之前流产率低于RSA组(P<0.05);RSA流产组女性D-二聚体(D-D)、白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、sEng水平均高于RSA继续妊娠组、正常早孕期组,且RSA继续妊娠组以上指标均高于正常早孕期组(P<0.05);Pearson直线相关显示,RSA组女性血清sEng与D-D、IL-2、TNF-α水平均呈正相关(r>0,P<0.05);Logistic回归分析显示,无论是否混杂其他因素,血清sEng水平与RSA女性早期妊娠流产存在关联性(P<0.05)。结论RSA女性血清sEng水平异常升高可能与早期妊娠流产有关,涉及的机制可能包括内皮细胞损伤、炎症、凝血功能异常等。

中国滇南地区莲雾炭疽病病原菌的形态学和分子生物学鉴定

莲雾炭疽病是国内外莲雾种植区的常年流行病及引起严重经济损失的一种重要真菌病害,但不同地区的病原菌种可能不同.该研究主要描述云南省南部发生的莲雾炭疽病症状,分离纯化病原菌并鉴定其种类.经观察,此莲雾炭疽病的典型病斑为椭圆或不规则形,中央区灰白色,周围褐色,最外围有一黄色晕圈;后期病斑扩展形成不规则大斑或枯斑;病害侵染果实引起腐烂变质.通过分离培养和纯化获得7个真菌菌株,柯赫氏致病性试验表明从西双版纳和普洱两地样品中获得的LWTJ2和LB4为致病菌株.两菌株形态特征相同,在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上的菌落为圆形,白色或淡黄白色,边缘光滑齐整,表面呈绒毛状,气生菌丝发达;后期菌落颜色稍加深,中央区灰黑色并产生大量蛋橙色分生孢子团;在显微镜下观察,病菌菌丝透明,分隔,呈锐角或近直角分枝;分生孢子无色,长椭圆形,两端盾圆,大小为9.8~18.0(平均13.9±2.1)μm×4.5~6.0(平均5.5±1.0)μm;未观察到病菌的有性型.采用ITS1/ITS4通用引物通过PCR扩增获得两菌株的rDNA-ITS序列均为545 bp(GenBank登录号为OL963924和OL413460).Blast-n比对和系统演化树分析表明,两个菌株Blast-n相似度及在演化树上聚集于同一末端分枝的置信限均为100%;两者与暹罗刺盘孢Collectotrichum siamense WZ-365菌株(Acc.No.MN856443)对比的相似度为99.08%,在系统演化树中与暹罗刺盘孢聚于同一末端分枝的置信限为96%.该研究较详细地观察记载了滇南地区莲雾炭疽病的症状及病原菌的形态特征,根据形态学与rDNA-ITS序列的Blast-n对比和演化树分析鉴定获得的LWTJ2和LB4菌株均属于暹罗刺盘孢C.siamense.这是莲雾炭疽病的一种新病原真菌,其进一步证明了莲雾炭疽病病原菌的多样性,也为该病害的诊断监测和有效控制提供了科学依据.

三个低咖啡碱茶树品系(种)红茶与绿茶的品质研究

为了研发低咖啡碱茶叶新产品,以滇红集团种植资源圃经单株选育的‘可可茶’为研究对象,采摘3个品种(系)茶树鲜叶分别制成红茶和绿茶。采用分光光度法分别测定茶样中的氨基酸、茶多酚、咖啡碱、可可碱、茶色素等生化成分含量,采用HPLC法测定儿茶素含量,结合感官审评对6个茶样进行品质比较分析。结果表明,所有茶样感官品质符合普通的红茶、绿茶国家标准;内含成分含量方面,所有茶样的咖啡碱和可可碱含量均低于0.5%,可作为低咖啡碱茶树资源;3个绿茶样的茶多酚含量为15.8%~17.8%,3个红茶样的茶多酚含量为10.2%~13.2%。茶色素含量方面,3个红茶样以茶褐素(5.4%~7.9%)和茶红素(6.2%~6.4%)为主;儿茶素含量方面,6个茶样的儿茶素均以EGCG、EGC为主。1号茶树最适合加工红茶,2号茶树最适合加工绿茶,3号茶树加工红茶和绿茶均可。

Research on Characters of Leaf Epidermal Cells' Quantities of Solanaceous Vegetable Crops

Tomatoes, peppers and eggplants＇ seedings were used as experiment materials to study the leaf development mechanism of solanaceous vegetable crops by using blot observation method. Results showed that an increasing trend was presented at the density of cells and stomata in upper and lower epidermis, but a declined trend was presented at the cells＇ diameters and the size of stomata with the joint position rising. At the same joint position, no matter in adaxial side or abaxial side, there were some differences among cells diameters, size of stomata, density of cells and stomata.

大黄素调节HMGB1/NF-κB信号通路对宫内炎症致早产大鼠脑损伤的保护作用

目的 探讨大黄素调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对宫内炎症致早产大鼠脑损伤的保护作用机制。方法 制备孕鼠后腹腔内注射脂多糖建立宫内炎症致早产大鼠模型,随机分为模型组、大黄素低剂量(25 mg/kg)组、大黄素高剂量(50 mg/kg)组、空载质粒组、大黄素高剂量(50 mg/kg)+HMGB1过表达组,每组10只,另制备10只孕鼠腹腔内注射等剂量生理盐水作对照组,每组孕鼠所产的仔鼠随机选出10只,采用大黄素和质粒分组处理各组孕鼠和仔鼠后,检测各组孕鼠所生仔鼠活产数及出生体质量;H-E染色检测各组孕鼠子宫及胎盘病理形态变化;斜坡实验及圆筒实验检测各组仔鼠神经行为学能力;TUNEL染色检测各组仔鼠海马及脑皮质神经元凋亡;酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组仔鼠脑组织与血清促炎因子环氧化酶-2(COX-2)、白细胞介素-6(IL-6)水平;蛋白免疫印迹法检测各组仔鼠脑组织HMGB1/NF-κB通路蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组子宫及胎盘病理评分、转头所用时间、海马及脑皮质神经元凋亡率、脑组织与血清COX-2、IL-6水平、脑组织HMGB1蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05),仔鼠活产数及出生体质量、碰触桶壁次数降低(P<0.05)。与模型组比较,大黄素低剂量组、大黄素高剂量组子宫及胎盘病理评分、转头所用时间、海马及脑皮质神经元凋亡率、脑组织与血清COX-2、IL-6水平、脑组织HMGB1蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低(P<0.05),仔鼠活产数及出生体质量、碰触桶壁次数均升高(P<0.05);HMGB1过表达可减弱大黄素高剂量对宫内炎症致早产孕鼠子宫、胎盘损伤和早产症状的改善作用,拮抗其对仔鼠的脑保护作用。结论 大黄素可通过抑制HMGB1/NF-κB信号激活而减少促炎因子产生,减轻孕鼠子宫、胎盘损伤,提升仔鼠神经行为能力并缓解其脑损伤。

妊娠期高血压患者剖宫产后尿路感染病原菌分布及影响因素分析

目的了解妊娠期高血压患者剖宫产后尿路感染的病原菌分布情况及相关危险因素,为降低术后尿路感染发生率提供依据。方法选取402例行剖宫产的妊娠期高血压患者为研究对象,对患者术后中段尿进行病原菌种类鉴定及主要菌株药敏分析,根据术后是否发生尿路感染分为感染组52例和未感染组350例。采用多因素Logistic回归分析检验妊娠期高血压患者剖宫产后尿路感染的影响因素。结果402例妊娠期高血压剖宫产患者中52例患者发生尿路感染,感染率为12.94%。52例尿路感染患者尿液中培养出85株病原菌,革兰阴性菌63株(大肠埃希菌41株、肺炎克雷伯菌8株、变形菌属6株、产气肠杆菌3株、铜绿假单胞菌3株、鲍曼不动杆菌2株),占病原菌总数的74.12%;革兰阳性菌18株(金黄色葡萄球菌11株、粪肠球菌7株),占病原菌总数的21.18%;真菌4株(白假丝酵母3、热带假丝酵母1株),占病原菌总数的4.70%。41株大肠埃希菌对左氧氟沙星、氨苄西林、庆大霉素、环丙沙星、阿米卡星、头孢噻亏、头孢曲松、红霉素、四环素、头孢唑林、亚胺培南的耐药率分别为87.80%、82.93%、63.41%、58.54%、48.78%、36.59%、17.07%、58.54%、51.22%、48.78%和4.88%。感染组年龄≥35岁、体质量指数≥30kg/m^(2)、有尿路感染史、血红蛋白<100g/L、导尿管留置时间≥2d的妊娠期高血压患者比例高于未感染组,差异有统计学意义(χ^(2)=75.170、48.800、51.461、61.123、118.815,P均<0.05)。年龄≥35岁、体质量指数≥30kg/m^(2)、有尿路感染史、血红蛋白<100 g/L、尿管留置时间≥2d均是妊娠期高血压患者剖宫产后尿路感染的独立危险因素(P均<0.05)。结论妊娠期高血压患者剖宫产后尿路感染的主要病原菌为革兰阴性菌,其中年龄、体质量指数、尿路感染史、血红蛋白、尿管留置时间为尿路感染的高危因素。

羊奶果多糖提取工艺及抗氧化抗菌活性研究

采用超声辅助提取法,利用正交试验设计优化羊奶果多糖的提取工艺,并通过DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率评价其抗氧化活性及抗菌活性。研究表明:羊奶果多糖最优的提取工艺条件为提取温度60℃、液料比15∶1(mL/g)、超声时间80 min,在此条件下,羊奶果多糖提取量为1204.668±44.377 mg/g,羊奶果多糖的DPPH自由基清除率为76.20%±5.901%,羟自由基清除率为88.37%±1.963%,羊奶果多糖对金黄色葡萄球菌(25.00±0.03 mm)和大肠埃希氏菌(32.50±0.05 mm)均具有较强的抑制作用,是开发天然抗氧化剂、抗菌剂的优良高原特色农产品。