纤维蛋白原/白蛋白值、D-二聚体与急性心肌梗死患者冠脉病变程度的相关性分析

【目的】探讨纤维蛋白原/白蛋白值(FAR)、D-二聚体(DD)与急性心肌梗死(AMI)患者冠脉病变程度的相关性。【方法】选择2020年6月至2022年7月湖南师范大学附属第一医院收治的201例AMI患者(观察组),选择同期于湖南师范大学附属第一医院行冠脉造影检查的80例结果正常者(对照组)。采用多因素Logistic回归分析FAR、DD与AMI的相关性,根据累及病变支的数目及冠脉狭窄程度对AMI患者亚组FAR、DD进行分析,采用受试者工作曲线(ROC曲线)评估FAR、DD预测AMI及冠脉重度狭窄的效能。【结果】观察组患者FAR、DD均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,FAR、DD是AMI发生的危险因素(P<0.05)。不同亚组结果显示:多支病变组FAR、DD均高于单支病变组,双支病变组DD高于单支病变组,差异均有统计学意义(P<0.05);重度狭窄组FAR、DD均高于轻度狭窄组,重度狭窄组DD高于中度狭窄组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示:FAR、DD预测AMI的ROC曲线下面积分别为0.721、0.71,敏感度分别为80.3%、87.3%;预测冠脉重度狭窄ROC曲线下面积分别为0.609、0.658,特异度分别为91.2%和91.2%。【结论】高水平FAR、DD与AMI发生存在相关性,且对AMI患者冠脉病变严重程度具有一定的诊断价值。

原发性肝癌ATM基因启动子甲基化及其与放疗疗效的相关性

为探究原发性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)共济失调-毛细血管扩张突变基因(ataxia-telangiectasia mutated gene, ATM)启动子甲基化情况,分析其与临床特征的关系及与放疗疗效的相关性,采用甲基化特异性PCR法(methylation-specific PCR, MSP)检测50对肝癌手术标本及相应的癌旁肝组织标本、20例正常肝组织、38例局部中晚期肝癌肝穿刺标本的ATM基因启动子甲基化状态,并采用BSP (bisulfite sequencing PCR)测序法对样本的甲基化状态进行验证,分析ATM基因启动子甲基化状态与患者临床特征的关系及与放疗疗效的相关性。结果发现, 88例肝癌组织中ATM基因启动子甲基化率为39.8%(35/88),其中38例肝癌肝穿刺标本有42.1%(16/38)存在ATM基因启动子甲基化, 50例肝癌手术标本有38%(19/50)存在ATM基因启动子甲基化,相应癌旁肝组织只有8.0%(4/50)存在ATM基因启动子甲基化;正常肝组织未发现有ATM基因启动子甲基化, ATM基因启动子甲基化在肝癌组织中的发生率与癌旁肝组织、正常肝组织相比差异具有统计学意义(χ^2=24.818,P<0.05)。此外,存在ATM基因启动子甲基化的局部中晚期肝癌患者的放疗疗效显著优于无甲基化的病例(χ^2=5.955,P=0.015), ATM基因启动子甲基化状态与肝癌放疗疗效呈显著正相关关系(r=0.396, P=0.014)。实验结果表明原发性肝癌ATM基因启动子存在异常甲基化, ATM基因启动子甲基化状态与肝癌放疗疗效关系密切,可为筛选放射敏感差异病人提供新的思路。

程序性细胞死亡蛋白4调控K562细胞活力和凋亡的研究

目的:探讨程序性细胞死亡蛋白4(programmed cell death protein 4,PDCD4)对人类慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞活力、凋亡以及基因表达变化的影响。方法:通过慢病毒感染的方法在K562细胞系中过表达PDCD4基因并筛选获得稳定表达的细胞系;采用RT-qPCR和Western blot分别检测PDCD4 mRNA和蛋白的表达水平;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况;应用转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq)分析PDCD4过表达组和对照组的基因表达差异及其相关的功能与信号通路,RT-qPCR验证测序结果的准确性。结果:成功建立了稳定过表达PDCD4的K562细胞系;PDCD4过表达可显著抑制K562细胞的活力,引起细胞周期阻滞并促进阿糖胞苷诱导的细胞凋亡(P<0.05);RNA-seq结果显示,在K562细胞中过表达PDCD4可引起大量的基因表达发生变化,表达明显差异的基因共有394个,其中上调16个,下调378个,主要涉及细胞周期、凋亡、细胞自噬和代谢等方面,选取的6个基因的RT-qPCR检测结果和RNA-seq的结果一致。结论:PDCD4可抑制K562细胞活力、阻滞细胞周期进展、促进细胞凋亡;RNA-seq确定了PDCD4对K562细胞基因表达谱的变化。

Investigation on the co-infections of Toxoplasma gondii with PRRSV, CSFV or PCV-2 in swine in part of China

The objective of the present investigation was to estimate the prevalence of Toxoplasma gondii infection and co-infection with porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV), classical swine fever virus(CSFV) and porcine circovirus type 2(PCV-2) in pigs in China. A total of 372 tissues or serum samples collected from pigs distributed in 9 provinces/municipalities of China during the period from February 2011 to November 2012 were assayed for T. gondii antigens and antibodies using enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) technique, while the PCR was designed for the detection of the PRRSV, CSFV and PCV-2, respectively. The total positive rate of T. gondii, PRSSV, CSFV and PCV-2 was 9.14%(34/372), 50.00%(186/372), 37.10%(138/372) and 3.23%(12/372), respectively. Among the 34 T. gondii positive samples, 26 samples were simultaneously infected with T. gondii and viruses, while the remaining eight samples were infected with T. gondii alone. In addition, the co-infection rate of T. gondii with PRSSV, T. gondii with PRSSV and CSFV, T. gondii with PRSSV and PCV-2, T. gondii with CSFV and PCV-2, T. gondii with PRSSV, CSFV and PCV-2 was 1.61%(6/372), 4.03%(15/372), 0.27%(1/372), 0.27%(1/372) and 0.81%(3/372), respectively. The results of the present survey revealed that PRRSV and CSFV were the common pathogens co-existing with porcine toxoplasmosis in China, and both of them could increase the chances of T. gondii infection in pig. This is the first report of T. gondii co-infections with viruses in pigs. It is very important to understand the interactions of parasite and virus, and can be used as reference data for the control and prevention of co-infections of T. gondii and viruses in pigs.

2016—2020年长沙市无偿献血者HIV检测结果分析

目的了解长沙市无偿献血者HIV感染情况,评估长沙市采供血机构的检测策略和处理措施的有效性。方法收集了2016—2020年长沙市无偿献血者HIV检测数据,分析了初筛、确证检测数据。并将结果录入SPSS 19.0软件进行统计分析。结果长沙市献血者HIV初筛阳性率为0.14%(1070/777937),HIV确证阳性率为2.02/万(157/777937)。每年HIV初筛阳性率变化无显著性差异(dy=0.029,P=0.392),每年1,3,7,8和10月初筛阳性率相对较高。HIV确证阳性人群均为ELISA双试剂检测阳性。不确定人群S/CO值主要分布在0.5-5范围内,占60.7%。HIV不确定人群确证结果以单p24条带出现为主,出现率为64.3%。结论长沙市无偿献血者HIV初筛阳性率不高且近5年来没有显著的变化趋势。长沙市采供血机构目前筛查HIV检测策略和处理措施合理高效,能够有效降低因HIV初筛阳性造成的血液报废,也能够有效降低HIV输血传播的风险。

人MDM2截短体真核表达载体的构建及其与NLK的相互作用

目的:构建带有HA标签的人MDM2截短体N端和C端重组真核表达载体,并检测截短体与NLK的相互作用。方法:用聚合酶链式反应(PCR)扩增人MDM2基因N端和C端编码序列,通过双酶切方法构建重组真核表达载体,转染至293T细胞,免疫印迹检测蛋白表达,免疫共沉淀检测MDM2截短体与NLK的相互作用。结果:菌落PCR与测序鉴定表明HA-MDM2-N和HA-MDM2-C截短体重组真核表达质粒构建成功,HA-MDM2-N,HA-MDM2-C有特异性表达,HA-MDM2-C与NLK结合较强,HA-MDM2-N与NLK结合较弱。结论:人MDM2截短体N端(MDM2-N)和C端(MDM2-C)均与NLK存在相互作用。