慢病毒介导的稳定表达鸭干扰素-γ细胞株的构建

干扰素-γ是一种具有抗病毒活性和免疫调节能力的细胞因子之一。为了建立稳定表达鸭干扰素-γ(duIFN-γ)的细胞系,本研究优化并合成了duIFN-γ基因,插入到慢病毒表达载体plenti-GIII-CMV-GFP-2A-Puro,获得重组质粒plenti-IFN,将plenti-IFN与辅助质粒共转染包装细胞293T,筛选出了携带duIFN-γ基因的重组慢病毒rlenti-IFN,将该病毒感染中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary, CHO)细胞,利用有限稀释法和抗性加压筛选法,筛选出了30个具有嘌呤霉素抗性基因的单克隆细胞系。利用RT-qPCR荧光定量法对这些单克隆细胞的duIFN-γ mRNA水平进行检测,筛选出了duIFN-γ mRNA水平最高的1个单克隆细胞,对其进行扩大培养,获得了1株稳定细胞系。Western blot检测结果表明,duIFN-γ稳定表达于该细胞系中。本研究获得了1株稳定表达duIFN-γ蛋白的细胞系,该研究为开展duIFN-γ生物学功能研究、建立duIFN-γ检测方法及生产廉价鸭(禽)用干扰素奠定了基础。

基于多阶差分损失全卷积网络的航迹融合算法

针对传统的航迹融合算法高度依赖先验信息的问题,文中提出了一种基于多阶差分损失全卷积网络的航迹融合算法。融合中心首先对各局部航迹进行时空配准和航迹关联;然后通过全卷积结构设计,避免了传统卷积神经网络模型中由于全连接层的使用导致参数量大、训练难度大的问题;最后通过计算航迹及其一、二阶差分的加权损失,实现了更高精度的融合结果。消融实验表明文中提出的航迹融合算法模型小、收敛性强、精度高、运算时间适中。仿真实验表明,文中算法不需要先验信息,当噪声参数无法准确估计时,算法融合精度优于方差加权融合算法和扩维卡尔曼滤波融合算法。实验结果证实了所提算法的有效性和可行性。

基于改进粒子群算法的水利基础设施空间布局优化研究

为提高水资源的利用效率,降低总投资成本,提出基于改进粒子群算法的水利基础设施空间布局优化方法。以总投资成本最小化和水资源利用效率最大化为目标,构建空间布局优化目标函数。采用差分进化算法改进粒子群算法,采用改进的粒子群算法求解目标函数,完成水利基础设施空间布局优化。测试结果表明:所提出方法能够降低布局优化的投资成本,提高水资源的利用效率。因此,说明所研究方法具有较高的布局优化效果,实际应用价值较高。

2022年内蒙古奶牛昏睡嗜血杆菌病流行病学调查

[目的]为了解内蒙古奶牛昏睡嗜血杆菌(Hs)的感染状况。[方法]调查12个盟(市)23个旗(县)的65个奶牛场,包括大型规模化奶牛场20个、小型规模化奶牛场21个、家庭牧场24个。采集2 650份阴道拭子样品,用荧光PCR方法检测Hs。[结果]除乌海市以外,其余11个盟(市)均出现Hs阳性场。在23个旗(县)中,只有7个未检出阳性场,其余16个均检出阳性场,阳性旗(县)比例高达69.6%。大型规模化奶牛场、小型规模化奶牛场和家庭牧场个体阳性率分别为:18.2%(182/1 000)、22.9%(240/1 050)和21.2%(127/600);农区、牧区、半农半牧区、阳性率分别为:15.6%(109/700)、13.5%(135/1000)和32.1%(305/950),平均个体阳性率为20.7%(549/2 650)。[结论]内蒙古奶牛场Hs感染普遍,应加大防控力度。

新能源乘用车车身安全策略研究

在新能源蓬勃发展的今天,兼容混动/纯电动力模式的乘用车车身在被动安全设计方面依然存在诸多难点,笔者通过探讨正碰(FRB、SOB)、侧碰(MDB、柱碰)和后碰等典型工况的被动安全设计,尝试系统总结此类兼容车身在开发过程中的思路和方法,解决设计难点,加强公司在车身碰撞安全领域的研发能力,提升车辆安全性,强化岚图安全标签。

1株伪狂犬病病毒的基因变异及其对小鼠的致病性分析

本研究旨在了解我国猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)流行毒株的分子遗传变异及毒力特点。对1株分离自1个接种了Bartha-K61疫苗的规模猪场的PRV ZJ株进行了主要糖蛋白基因序列(gB、gC和gE)的测定分析及对6周龄BALB/c小鼠的致病性研究。遗传变异分析显示,该毒株与我国2012年后的流行毒株高度同源,具有变异毒株基因特征,但gE基因的510位氨基酸出现了不同于变异株的独特变化S^(510) G。ZJ株对小鼠具有较高的致病性,攻毒小鼠呈现典型的神经症状,以100 LD_(50)感染小鼠,第5天死亡率达100%。本研究为进一步探索该病毒的毒株变异特点与致病机理奠定基础。

数据和模型双驱动的航迹融合算法

针对数据驱动的航迹融合算法精度较低、泛化和适应性差的问题,文中提出了一种数据和模型双驱动的航迹融合算法。该算法主要包含残差提取、残差融合和航迹重建三个部分。残差提取,即模型驱动部分:根据先验知识,建立航迹误差模型,对局部航迹进行近似,并提取其残差作为误差的估计。残差融合,即数据驱动部分:设计了一个多尺度全卷积网络对残差进行融合。航迹重建部分:将网络输出的融合残差还原为融合子航迹,并对连续的多个子航迹进行综合,得到完整的融合航迹。仿真实验表明,该算法不依赖先验信息,融合精度显著优于数据驱动融合算法和传统算法,并具有很好的运动参数和运动模式泛化与适应能力。

农业经营主体研究的发展脉络及展望——基于CiteSpace的可视化分析

农业经营主体高质量发展对推动我国农业转型升级具有重要作用,梳理和分析历年来农业经营主体研究领域相关文献,并预测其未来发展趋势,能为加快中国特色农业农村现代化和实现传统小农与现代农业有机结合提供有益借鉴。在收集21世纪以来农业经营主体研究领域的样本文献后,运用CiteSpace图谱量化工具进行可视化分析,发现该领域文献数量总体上明显增多。家庭农场、乡村振兴、现代农业、经营主体、小农户、农业保险是农业经营主体领域中研究基础最好、热度最高、持续性最久的主题。土地流转、影响因素、“三权”分置、专业大户、农村金融等主题也有一定的基础、热度和研究价值。当前国内学术界对于农业经营主体领域的研究主要围绕土地改革、乡村振兴、乡村治理、金融帮扶等展开。未来乡村振兴、普惠金融、农地整治、小农户、党组织领办合作社、新型农村集体经济等将成为热门议题和发展前沿。

基于HRRP时频特征和多尺度非对称卷积神经网络的目标识别算法

针对空间目标识别中特征提取难、准确率低等问题,提出了一种基于雷达高分辨率距离像(high range resolution profile,HRRP)时频特征和多尺度非对称卷积神经网络的目标识别算法。采用离差标准化、多特显点绝对对齐消除目标的强度敏感性和平移敏感性,利用雷达多普勒测速数据消除目标高速运动对HRRP产生的展宽、畸变、波峰分裂等影响。对HRRP进行时频分析,提取其时频特征。通过不同尺度的非对称卷积,实现时频特征不同精细程度和不同方向的特征提取。实测数据处理结果表明,文中方法目标识别准确率高,而且在同平台目标识别、抗姿态敏感性等方面具有很好的效果。

IBRV重组gD蛋白的真核表达与间接ELISA检测方法的建立

通过优化牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gD基因序列为Sf9细胞偏好密码子,转座形成穿梭载体,将质粒瞬时转染Sf9昆虫细胞,利用昆虫杆状病毒表达系统表达纯化重组IBRV gD蛋白;以制备的重组IBRV gD蛋白为包被抗原,建立检测IBRV血清中和抗体的间接ELISA方法,并通过比对检测已知血清中和抗体效价的牛血清,验证所建立的间接ELISA方法的敏感性、特异性与重复性等指标。结果显示:本研究建立的间接ELISA方法对相关的牛病毒血清抗体无交叉反应,敏感性可达1:512,组内和组间变异系数均低于10%;使用建立的间接ELISA检测方法结合血清中和试验,对480份临床血清样品进行检测,发现两者敏感性符合率为98.18%,特异性符合率为93.33%,总符合率为96.67%。结果表明,本研究建立的检测IBRV血清中和抗体的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可开发为临床适应的检测试剂盒。

鹅星状病毒基因Ⅰ型和Ⅱ型双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

鹅星状病毒(goose astroviruses,GAstV)作为一种雏鹅新发病原,对养鹅业造成巨大经济损失,在尚无有效治疗手段情况下,加强疫病及时检测和防控十分重要。为建立快速、特异且灵敏的鉴别GAstVⅠ型和GAstVⅡ型的病毒检测方法,本研究根据GAstVⅠ和GAstVⅡ的保守区域RdRp基因序列,设计合成2对特异性引物和2种不同荧光基团标记的TaqMan探针,建立了一种双重荧光定量PCR检测方法,以达到在同一反应体系中同时定量检测GAstVⅠ和GAstVⅡ的目的。结果显示,GAstVⅠ和GAstVⅡ的最小检出量分别为43.3、6.49 copies·μL^(-1);重复试验的变异系数不超过0.5%;该方法对DPV、GPV、GTMUV、GRV、AIV(H9N2)等病毒核酸无交叉反应。综上表明,本研究建立的可鉴别GAstVⅠ和GAstVⅡ的双重荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性强、重复性好。可用于临床GAstVⅠ和GAstVⅡ的快速鉴别诊断,也可用于两种基因型GAstV的定量分析。

老年结直肠癌患者组织AIM2、hnRNP AB与血清CEA及病理参数的相关性

目的探讨老年结直肠癌患者组织黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)、核不均一核糖核蛋白AB(hnRNP AB)和血清癌胚抗原(CEA)及病理参数的相关性。方法采集2017年6月至2020年6月收治的78例老年结直肠癌患者的癌组织及癌旁正常组织标本。采用免疫组化SP法检测癌组织及癌旁正常组织标本中的AIM2、hnRNP AB阳性表达情况,采用电化学发光法检测患者术前血清CEA水平。收集患者的临床病理参数,分析结直肠癌组织组织中AIM2、hnRNP AB表达及术前血清CEA与临床病理参数的关系。采用Kendall相关分析结直肠癌组织中AIM2、hnRNP AB表达与术前血清CEA的相关性。结果免疫组化显示,AIM2主要分布于肿瘤组织细胞质内,hnRNP AB主要分布于细胞核内;78例肿瘤组织中AIM2阳性29例(37.18%),明显低于癌旁组织的63例(80.77%),hnRNP AB阳性55例(70.51%),明显高于癌旁组织的17例(21.79%),术前CEA水平阳性34例(43.59%),明显高于癌旁组织的5例(6.41%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌组织中AIM2、hnRNP AB表达及术前血清CEA水平均与性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤部位、分化程度、大体分型、远处转移等无关(P>0.05),而与浸润程度、TNM分期、淋巴结转移等有关(P<0.05)。Kendall相关分析显示,结直肠癌组织中AIM2表达与术前血清CEA水平呈负相关(r=-0.211,P<0.01),而结直肠癌组织中hnRNP AB表达与术前血清CEA水平呈正相关(r=0.291,P<0.01)。结论老年结直肠癌患者组织AIM2、hnRNP AB表达与血清CEA水平密切相关,浸润程度越深,TNM分期越晚,发生淋巴结转移的结直肠癌组织中AIM2表达降低、hnRNP AB表达升高,AIM2、hnRNP AB可能成为结直肠癌靶向治疗的新靶点。

直井随钻测斜磁流变液式负脉冲发生器研究

随钻测量是掌握井下实时钻进信息并在此基础上进行优化控制的最佳手段,目前在油气钻井中已大量应用。钻井液压力脉冲传输是随钻测量信号传输的主要方式,虽然应用广泛,但在传输速率、功耗和精度等方面仍存在较大提升空间。为此,研发了一种用于随钻测斜的磁流变液式负脉冲发生器。阐述了磁流变液式负脉冲发生器的结构与工作原理,设计了磁流变液式负脉冲发生器的结构模型;基于麦克斯韦方程组、安培环路定理和高斯磁通定理,确定了影响脉冲发生器制动性能的参数,主要有电流、磁流变液材料参数和磁导绕管壁厚等;在选定类型磁流变液材料的基础上,基于ANSYS Electronics软件研究了电流、磁导绕管壁厚等参数对感应电磁场强度及其分布特性的影响。研究所得的结构模型、理论分析方法、仿真分析结果等可为磁流变液式负脉冲发生器的开发提供支撑,促进随钻测量技术的发展。

一种“可抛机翼”变构型飞行器设计与性能分析

变构型飞行器可以通过改变自身构型在不同的飞行条件下同时具备良好的气动特性,从而适应不同的任务需求和飞行环境。针对传统变构型方式会增加飞行器质量和结构复杂度的问题,设计了一种具有“可抛机翼”的变构型飞行器,其常规构型可实现高亚声速巡航,在抛离机翼后变为弹体达到超声速,用于末段突防、打击等军事用途,针对变构型前后2种状态进行不同飞行条件下的数值计算,初步评估该飞行器的气动性能,再通过飞行仿真模拟飞行器从抛离机翼到加速冲杀的全过程。研究结果表明:这种飞行器可以通过构型的改变适应不同的飞行环境,为高速变构型飞行器的构型设计提供参考。

植物精油微胶囊的制备方法及其在畜禽养殖业中的应用

植物精油具有良好的抑菌、抗炎、抗氧化特性,在畜禽饲料中添加使用具有安全、高效、毒副作用小、残留量低等优点,在成为饲用抗生素替代品方面有较高的开发潜力和研究价值。介绍了植物精油的理化特性,综述了植物精油微胶囊化工艺和制备方法及植物精油在畜禽养殖业中的应用研究进展,以期为畜禽用植物精油微胶囊制剂的研究与开发及植物精油在畜禽生产中的科学应用提供参考。

新型鸭呼肠孤病毒一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

为建立一种快速、敏感和特异性检测新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)的方法,本研究根据GenBank数据库中NDRV S3基因保守序列设计1对特异性引物和1条MGB荧光探针,建立了一种检测NDRV的一步法MGB荧光定量RT-PCR方法,对其特异性、敏感性和重复性进行检验,并与普通RT-PCR进行比较。结果显示,扩增标准曲线相关系数为0.999,扩增产物的熔解曲线仅出现单特异峰。该方法对经典鸭呼肠孤病毒、H9N2禽流感病毒、鸭坦布苏病毒、A型鸭肝炎病毒、鸭新城疫病毒、鸭瘟病毒及番鸭细小病毒均未检测到信号,对NDRV的最小检出量为10拷贝·μL^-1。组内和组间变异系数均小于2%,重复性好。此外,利用该方法对239份疑似新型呼肠孤病毒病样品进行检测,常规RT-PCR检测时有75份为阳性,一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法检测时有100份为阳性,而且常规RT-PCR检测出的阳性样品用一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测时均为阳性,符合率为100%。该检测方法的建立为NDRV早期快速检测及定量分析提供新的方法。

重组鸭瘟病毒载体中筛选高效表达鸭坦布苏病毒E蛋白启动子

【背景】鸭瘟和鸭坦布苏病毒是鸭的两种重要传染病,鸭瘟属于疱疹病毒科,具有开发成病毒载体的优势。为了优化鸭坦布苏病毒E基因在重组鸭瘟病毒载体中的表达,之前探讨了不同形式鸭坦布苏病毒E蛋白在重组鸭瘟病毒载体中的表达,发现以鸭为宿主进行密码子优化的E基因C端截短形式(E451-dk,简称为Es)表达量最高。【目的】探讨不同启动子对Es在重组鸭瘟病毒载体中表达的影响,为鸭瘟病毒-坦布苏病毒二联苗的研制奠定基础。【方法】将pCAG、pSV40、pRSV、p1.8k(MDV)和pgB(MDV)启动子通过常规基因克隆的方法替换转移载体pEP-BGH-Es中的pCMV启动子,构建不同启动子调控Es表达的重组表达框pro-Es-BGH-pA。在鸭瘟病毒(DEV)疫苗株细菌人工染色体克隆pDEV-EF1的基础上,将5个重组表达框分别通过"Red E/T两步重组"克隆至pDEV-EF1突变体的US7和US8基因之间,构建了携带不同启动子调控的Es突变体克隆pDEV-pro-Es。用磷酸钙法转染鸡胚成纤维细胞(CEFs)拯救获得相应重组病毒rDEV-pro-Es,并对重组病毒感染细胞蚀斑大小和Es蛋白表达情况进行测定。【结果】将重组突变体克隆转染细胞拯救获得了5株重组病毒rDEV-pro-Es。Western blotting分析表明外源蛋白Es在pRSV调控下表达量最高,其表达量较rDEV-Es提高了169.12%。【结论】完成了Es在重组鸭瘟病毒载体中高效表达启动子的筛选,获得了一种调控Es高效表达的启动子pRSV。同时也获得了一株高效表达鸭坦布苏病毒外源基因Es的重组鸭瘟病毒rDEV-pRSV-Es。

基于智能环境监测的蛋鸭环保型网床养殖圈舍设计及应用

为解决传统蛋鸭养殖方式对自然水源和生态环境的污染,以及对水体、土地、垫草等资源依赖的瓶颈问题,研究结合无线传感器的环境监控系统,设计了一种基于环境智能监控的环保型全封闭蛋鸭旱养圈舍,并结合饲养情况对旱养系统内部的自动化配套设施、圈舍通风、网床布局、内部活动区以及产蛋区的规划以及饲养条件等进行优化。初步应用结果显示:与传统地面平养相比,环保型全封闭蛋鸭旱养圈舍养殖有利于提高蛋鸭生产性能,产蛋高峰期持续时间长,全程料蛋比2.89∶1,高峰期料蛋比2.69∶1,每只蛋鸭养殖效益增加将近22元。该设计为水禽旱养的规范化方案提供了理论依据,具有实际推广价值,并有利于实现水禽产业的可持续发展。

浙江省地方鸡种禽白血病毒抗原检测与部分分离株GP85基因序列分析

为了解浙江地区地方品种鸡中J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis vrius,ALV-J)的感染情况与流行毒株的分子特征,对浙江省部分地方品种鸡体内ALV的p27抗原进行了检测,从疑似感染鸡群中检测分离到5株ALV-J,并对其GP85基因进行PCR分子克隆和序列分析。研究结果显示:在检测的19个地方鸡品系中,所有品系的鸡样本都呈现抗原阳性,其中101系的抗体阳性率最高,母鸡阳性率为40.48%,公鸡阳性率为16.54%;126系次之,母鸡阳性率为28.87%,公鸡阳性率为3.30%;171系抗体阳性率最低,其母鸡阳性率仅为4.08%,公鸡的感染率为0。为了解地方鸡群中ALV-J的遗传变异,对分离到的5株ALV-J的GP85基因进行了分子克隆和序列分析。结果表明,5个分离毒株的GP85基因大小均为924 bp,与预期一致;本研究样品序列之间的核苷酸同源性为90.8%~98.5%,与原型毒株HPRS103核苷酸相似性为90.3%~97.0%,与国内其他分离株的同源性为86.5%~99.0%。分离株与福建(FJ201308株)和广东(WF13株)分离株的同源性最高。结果表明:浙江省大部分地方品种鸡都不同程度感染ALV-J,而且分离毒株已经发生了不同程度的变异,提示我们应加强浙江省地方品种鸡ALV的净化工作。

A型流感病毒的传播危害及内蒙古重点地区家禽高致病性禽流感免疫监测效果分析

A型流感病毒可以感染几乎所有的禽类和哺乳动物,特别是H5和H7亚型高致病性禽流感病毒,传染性强,致死率高,危害十分严重。对2021年内蒙古重点地区高致病性禽流感疫苗免疫效果以及病原学监测分析结果显示,未监测出病原阳性样品,免疫效果良好。但因感染禽流感病毒的候鸟粪便带毒,内蒙古地区仍然存在禽流感疫情风险隐患,防控难度较大。对流感病毒在不同动物宿主中传播所造成的巨大经济损失和潜在危害进行阐述,旨在引起广大养殖企业的高度重视,做好家禽的生物安全管理和疫苗免疫等综合性防控措施,确保不发生疫情,提高经济效益。