miRNA-146a在小鼠小胶质细胞炎症反应中的作用

目的评价microRNA(miR)-146a在小鼠小胶质细胞炎症反应中的作用。方法小鼠小胶质细胞BV2进行培养,选取对数生长期的细胞,采用随机数字表法分为5组(n=48):对照组(C组)、LPS组、LPS+miR-146a模拟物组(LPS-M组)、LPS+miR146-a抑制物组(LPS-I组)和LPS+阴性对照组(LPS-NC组)。LPS-M组、LPS-I组和LPS-NC组分别将miR-146-a模拟物RNA、miR-146a抑制物RNA和模拟物/抑制物的错义RNA转染至细胞。转染成功后,LPS组、LPS-M组、LPS-I组和LPS-NC组细胞分别加入终浓度为1μg/ml的LPS,C组加入等容量培养基,孵育6 h。采用qRT-PCR法检测细胞miR-146a、白介素受体相关激酶1(IRAK1)mRNA和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)mRNA的表达,采用Western blot法检测细胞IRAK1和TRAF6的表达。收集细胞上清液,采用ELISA法检测TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度。结果与C组比较,LPS组细胞miR-146a表达、IRAK1和TRAF6及其mRNA及表达上调,上清液TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS-M组细胞miR-146a表达上调,IRAK1和TRAF6及其mRNA表达下调,上清液TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度降低,LPS-I组细胞miR-146a表达下调,IRAK1和TRAF6及其mRNA表达上调,上清液TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度升高(P<0.05),LPS-NC组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-146a是小鼠小胶质细胞炎症反应的内源性保护机制。