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通过遗传转化Rfo获得青花菜Ogura CMS恢复系
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作者 邢苗苗 许园园 +2 位作者 卢昱宇 严继勇 曾爱松 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第15期2966-2976,共11页
【目的】将来自萝卜的胞质不育恢复基因Rfo导入到青花菜Ogura细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility,CMS)主栽商业品种‘耐寒优秀’(命名为SFB45)中,获得Ogura CMS恢复系,打破Ogura CMS材料在生产上无法再利用的现状,为优异种质的... 【目的】将来自萝卜的胞质不育恢复基因Rfo导入到青花菜Ogura细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility,CMS)主栽商业品种‘耐寒优秀’(命名为SFB45)中,获得Ogura CMS恢复系,打破Ogura CMS材料在生产上无法再利用的现状,为优异种质的创制和改良提供新途径。【方法】利用基因合成的方法克隆萝卜Rfo的CDS及其启动子序列,构建表达载体pRfo::Rfo。通过农杆菌介导的遗传转化方法侵染SFB45的具柄子叶和下胚轴,进行再生、抗性苗筛选和PCR鉴定获得阳性植株,开花期观察转基因植株的育性恢复情况;用亚历山大染液分析对照组及阳性株的花粉活力;分别提取对照组及阳性株<3 mm和>3 mm花蕾的RNA并反转录成单链cDNA,设计特异引物,利用RT-PCR分析Rfo及绒毡层和花粉壁发育相关基因在SFB45及对应的育性恢复材料花蕾中的表达差异。【结果】通过遗传转化共获得10个阳性株系,其中8个株系育性得到不同程度的恢复,花粉活力为84.2%—90.4%。RT-PCR分析结果表明,育性恢复植株花蕾中Rfo表达,绒毡层发育关键调节因子DYT1和TDF1及花粉壁主要成分孢粉素合成所必需的基因ACOS5在育性恢复植株<3 mm花蕾中上调表达。绒毡层降解相关基因AMS、四分体胼胝质壁及花粉外壁发育所必需的基因CalS5和CYP703在育性恢复植株>3 mm花蕾中上调表达。分析阳性株系R-1、R-3和R-6自交及杂交后代发现转入的Rfo能稳定遗传,符合孟德尔遗传。【结论】通过遗传转化Rfo获得了优良青花菜Ogura CMS商品种SFB45的育性恢复系,且Rfo的转入使绒毡层及花粉壁发育相关基因恢复正常表达。 展开更多
关键词 青花菜 遗传转化 Ogura CMS Rfo 绒毡层和花粉壁发育相关基因
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我国甘蓝品种市场需求变化分析 被引量:5
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作者 曾爱松 夏彭飞 +3 位作者 严继勇 许园园 邢苗苗 卢昱宇 《长江蔬菜》 2022年第8期1-3,共3页
全国甘蓝圆球类型在南方市场面积逐年增加,扁球类型面积逐步减少;牛心类型作为南方甘蓝的特色类型,品质较好,未来有渗入北方市场的趋势和潜力。在原有高山及高原冷凉地越夏种植的基础上,华北及西北冷凉地种植面积呈增长趋势,主要外运至... 全国甘蓝圆球类型在南方市场面积逐年增加,扁球类型面积逐步减少;牛心类型作为南方甘蓝的特色类型,品质较好,未来有渗入北方市场的趋势和潜力。在原有高山及高原冷凉地越夏种植的基础上,华北及西北冷凉地种植面积呈增长趋势,主要外运至长江中下游地区,满足夏季消费。这些区域在品种选择上往往更重视供应目标消费区域的消费习惯,促进了南北方不同类型甘蓝品种的相互渗透。 展开更多
关键词 甘蓝品种 冷凉 消费习惯 消费区域 品种选择 越夏 长江中下游地区 南北方
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铁型覆砂铸造技术应用进展 被引量:1
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作者 赵忠魁 李希石 +3 位作者 李庆松 衣冠玉 闫吉勇 李希建 《中国铸造装备与技术》 CAS 2021年第6期22-27,共6页
对国内铁型覆砂铸造工艺进行了总结。铁型壁厚根据铸件重量和壁厚等因素确定,再调节覆砂层厚度以控制铸件各部分的冷却速度。铁型的重量一般是铸件的7~8倍,随形覆膜砂厚为5~8 mm左右,铁砂比约为1:0.18。采用半封闭式浇注系统并采用滤网... 对国内铁型覆砂铸造工艺进行了总结。铁型壁厚根据铸件重量和壁厚等因素确定,再调节覆砂层厚度以控制铸件各部分的冷却速度。铁型的重量一般是铸件的7~8倍,随形覆膜砂厚为5~8 mm左右,铁砂比约为1:0.18。采用半封闭式浇注系统并采用滤网对铁液进行过滤。球墨铸铁一般不采用冒口,但小型球墨铸铁件和灰铸铁件应加上冒口。铸件的碳硅当量比湿型砂造型工艺高,铁水出炉温度也较高,采用复合孕育剂进行孕育和较低牌号球化剂进行球化。铁型覆砂生产的球铁件石墨球细小均匀,铸件表面质量和尺寸精度高。 展开更多
关键词 铁型覆砂 铸造工艺 表面质量
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应用室间隔缺损封堵器治疗婴幼儿特殊形状动脉导管未闭疗效观察 被引量:1
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作者 周云国 张政 +2 位作者 许飞 严济泳 段君凯 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期679-681,共3页
目的评价室间隔缺损(VSD)封堵器治疗婴幼儿特殊形状动脉导管未闭(PDA)的临床疗效。方法分析2017年7月至2018年7月经主动脉弓降部造影提示窗型PDA或动脉导管长度>7 mm管型PDA,并选择VSD封堵器进行介入治疗的27例患儿的临床资料。结果2... 目的评价室间隔缺损(VSD)封堵器治疗婴幼儿特殊形状动脉导管未闭(PDA)的临床疗效。方法分析2017年7月至2018年7月经主动脉弓降部造影提示窗型PDA或动脉导管长度>7 mm管型PDA,并选择VSD封堵器进行介入治疗的27例患儿的临床资料。结果27例患儿中窗型PDA 12例,男7例、女5例,中位年龄8.7个月(6个月~3岁);管型PDA 15例,男6例、女9例,中位年龄18个月(11个月~5岁)。窗型PDA选择膜部VSD封堵器,管型PDA选择肌部VSD封堵器封堵;按照窗型PDA肺动脉端内径加3~6 mm、管型PDA肺动脉端内径加2~4 mm选择封堵器腰部大小。所有患儿均成功封堵,术后均无残余分流。术后24小时、1个月、3个月、6个月、12个月复查胸片提示封堵器位置良好。术后24小时、1个月、3个月、6个月、12个月降主动脉流速均较术前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);术后左肺动脉流速较术前无变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用VSD封堵器介入治疗特殊形状PDA是一种有效可行的治疗方法。 展开更多
关键词 先天性心脏病 动脉导管未闭 室间隔缺损封堵器
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Gene flow from transgenic roundup-ready soybean to wild soybean 被引量:3
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作者 Chen Xin yan jiyong +1 位作者 Gao Bing Peerasak srinives 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2006年第1期8-13,共6页
A study was conducted in the field of the Institute of Vegetable Crops, Jiangsu province from July 2000 to August 2003. The transgenic roundup-ready soybean was sown in the middle of the field in a circular manner for... A study was conducted in the field of the Institute of Vegetable Crops, Jiangsu province from July 2000 to August 2003. The transgenic roundup-ready soybean was sown in the middle of the field in a circular manner for 5 circles, with the distance of 3 m, from one circle to another. Then the wild soybean was planted in plots as the rays of the circles in 8 directions (N, E, W, S, NE, NW, SE and SW), spaced every 5 m until 50 m. Each plot comprised 25 plants. In the second year, the wild soybean seeds from the first year were planted in the field together with the original wild soybean as check. Before flowering time, high concentrations of roundups (about 4-5 times of the normal dose) were sprayed on the plants and the surviving plants were identified. The leaves were taken to the lab for DNA extraction to determine the unique DNA for roundup-ready soybean (CTAB method). About 2% of the plants survived, but some leaves were yellow. One plant of wild soybean was found to have the roundup-ready gene from the original roundup-ready soybean. The other surviving wild soybeans should also had some fragments of the roundup tolerance gene. However, the DNA bands were not very clear in the PCR map. 展开更多
关键词 野生大豆 基因 生物技术 品种资源
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艾司奥美拉唑镁肠溶微丸片的制备及体内外评价 被引量:5
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作者 冯中 魏瑞霞 +3 位作者 贾俊伟 陈梦钰 燕继永 张贵民 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1337-1346,共10页
采用流化床底喷上药包衣技术,依次对蔗糖丸芯包衣制备艾司奥美拉唑镁肠溶微丸:以2%的羟丙甲纤维素E5 LV、0.3%的滑石粉和原料药制备固含量为15%的浆液进行上药层包衣;然后以羟丙纤维素LF和滑石粉(1∶2)制备固含量为10%的浆液进行隔离层... 采用流化床底喷上药包衣技术,依次对蔗糖丸芯包衣制备艾司奥美拉唑镁肠溶微丸:以2%的羟丙甲纤维素E5 LV、0.3%的滑石粉和原料药制备固含量为15%的浆液进行上药层包衣;然后以羟丙纤维素LF和滑石粉(1∶2)制备固含量为10%的浆液进行隔离层包衣,增重范围为(23±2)%;以肠溶材料Eudragit L30D-55、枸橼酸三乙酯和Tween-80(28∶4∶5)制备固含量为15%的浆液对隔离层微丸进行肠溶层包衣,增重范围为45%~50%。最后,加入微晶纤维素(MCC 101∶MCC 102为40∶60)、交联聚维酮和硬脂富马酸钠,混匀后压片、包薄膜衣制得肠溶微丸片。结果显示,自制肠溶微丸片的含量均匀度、耐酸力、释放度符合《中华人民共和国药典》2020年版要求。建立了LC-MS法测定Beagle犬血浆中艾司奥美拉唑浓度。体内试验表明,犬空腹给予自制肠溶微丸片和参比制剂后,c_(max)为(287.16±13.37)和(290.34±12.42)ng/ml,t_(max)为(1.34±1.37)和(1.41±2.37)h,自制肠溶微丸片的口服相对生物利用度为(98.5±6.7)%。进食状态下给药,参比制剂和自制肠溶微丸片的AUC和c_(max)均下降。该工艺可解决艾司奥美拉唑镁对酸不稳定的问题。 展开更多
关键词 艾司奥美拉唑镁 肠溶微丸 微丸片 流化床包衣 体外释放 药动学
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二盐酸沙丙蝶呤速释片的制备及体内外评价 被引量:2
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作者 冯中 贾俊伟 +2 位作者 张贵民 燕继永 侯培磊 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期883-889,共7页
在对原研制剂Kuvan处方分析的基础上,以片剂崩解时间和溶出度为评价指标,采用Box-Behnken法优化筛选出二盐酸沙丙蝶呤速释片中主要辅料甘露醇、维生素C和交联聚维酮的最佳配比;并通过单因素试验法确定压片前干颗粒粒径。最终得到的优化... 在对原研制剂Kuvan处方分析的基础上,以片剂崩解时间和溶出度为评价指标,采用Box-Behnken法优化筛选出二盐酸沙丙蝶呤速释片中主要辅料甘露醇、维生素C和交联聚维酮的最佳配比;并通过单因素试验法确定压片前干颗粒粒径。最终得到的优化处方中甘露醇用量45.70%,维生素C用量9.06%,交联聚维酮用量4%;采用干法制粒得到粒径主要分布在150μm的干颗粒后压片制备了3批自制速释片。试验表明,3批制品的平均崩解时间为(35.7±5.0)s,10 min溶出率为(96.0±1.5)%。进一步考察了该自制速释片与Kuvan在Beagle犬体内的药动学特征。建立了LC-MS法测定血浆中二盐酸沙丙蝶呤的浓度。体内试验表明,自制片和Kuvan的cmax为(96.20±13.10)和(102.28±7.42)ng/ml,tmax为(2.21±1.60)和(2.17±0.41)h;自制片AUC0→t、AUC0→∞、cmax的90%置信区间均在原研制剂相应参数的80%~125%范围内。自制片的口服相对生物利用度为(92.0±8.5)%。 展开更多
关键词 二盐酸沙丙蝶呤 速释片 处方优化 体外溶出 药动学
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