PRNP过表达MAC-T细胞的构建及其对细胞黏附侵袭的影响

【目的】研究PRNP过表达对牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)黏附、侵袭的影响。【方法】利用慢病毒载体技术构建PRNP慢病毒过表达载体并建立稳定PRNP过表达MAC-T细胞系;应用实时荧光定量PCR和Western Blot对过表达MAC-T细胞系进行验证;随后用MRSA感染MAC-T细胞和PRNP过表达MAC-T细胞系,比较PRNP过表达MAC-T细胞和野生型MAC-T细胞在黏附侵袭生理特性的差异。【结果】成功构建pLVML-PRNP慢病毒表达载体和稳定的PRNP+-MAC-T细胞系;黏附侵袭结果表明MRSA对过表达PRNP的MAC-T细胞黏附侵袭能力显著低于对照组,值得注意的是,MRSA在感染PRNP+-MAC-T细胞后的6 h内,未发生明显的侵袭现象,直至感染6 h后其侵袭率才明显上升,8 h达到峰值,但是仍显著低于MRSA对MAC-T细胞的侵袭率。【结论】PRNP过表达能够降低MRSA对细胞的黏附侵袭能力。

文献计量法在中药药物警戒领域中的应用价值及展望

目的介绍文献计量法(bibliometric methods)在中药药物警戒领域(pharmacovigilance of Chinese medicine,PVCM)中的应用。方法系统检索中国知网、万方数据、维普网、SinoMed及PubMed数据库,检索时间均从各数据库建库至2021年8月24日,并纳入应用文献计量法开展的针对中药药物警戒领域相关原始研究文献的二次研究进行分析,以了解文献计量法用于中药药物警戒领域的现况。结合相关具体实例,对文献计量法定义、应用价值、选题切入点及实施进行总结和讨论。结果目前已发表的中药药物警戒相关文献计量研究共50篇,涉及研究选题范围主要限定于中成药临床用药不良反应。引入文献计量法对中药药物警戒领域相关文献进行系统全面的梳理与分析,可从微观和宏观层面为研究人员掌握中药药物警戒领域研究现状、跟踪学科前沿、推断研究热点、预测学科发展方向等提供循证证据。结论应注重并规范开展更多、涉及选题范围更广的高质量中药药物警戒相关文献计量研究,为中药药物警戒领域更好、更全面发展提供证据支持。

基于患者指南的缺血性脑卒中二级预防干预方案的构建

目的:构建基于患者指南的缺血性脑卒中二级预防干预方案。方法:将以人为本的方法(person-based approach,PBA)作为指导,通过文献研究和焦点小组访谈法识别病人对缺血性脑卒中二级预防的需求和观点,分析病人坚持二级预防健康行为的促进和障碍因素,构建基于患者指南的缺血性脑卒中二级预防干预方案;通过有声思维访谈法收集病人对干预方案的反馈,并对干预方案进行优化。结果:本研究最终构建的干预方案如下:病人评估与急救宣教、患者指南学习与反馈教学、个性化行为目标计划指导、电话随访与远程支持。结论:本研究基于缺血性脑卒中二级预防患者指南构建可行性强且系统化的干预方案,为提高病人二级预防依从性相关研究提供参考。

顺产产妇会阴损伤预防与修复护理最佳证据总结

目的 :总结顺产产妇会阴损伤预防与修复护理相关最佳证据,为产科护士及助产士的临床决策提供参考。方法 :系统检索与筛选专业团体网站、临床实践指南网站、数据库的会阴损伤预防与修复相关循证指南,采用AGREEⅡ对其进行方法学质量评价,选取其中的A级指南进行推荐意见的提取、翻译,B级指南予以排除;之后按照一定的原则对内容相同或相似的推荐条目进行综合;最后通过专家论证,遴选出适宜我国国情的护士及助产士权限范围内的推荐意见。结果 :共检索出国内外331篇文献,符合指南初筛纳入排除标准的指南为7部,AGREEⅡ评价后显示4部为A级,3部为B级;仅对4部A级指南的推荐意见进行提取,共得到92条推荐意见,按照相应的原则将推荐意见综合后得到63条最佳证据;专家论证后发现其中27条最佳证据属于我国护士及助产士权限范畴。结论:会阴损伤预防与修复的证据较为丰富,护士及助产士权限范围内的证据涉及范围较广但数量有限,有必要进行更多的实践探索及科学研究来丰富护理及助产领域的相关证据。

近5年我国护理证据总结类论文的方法学质量分析

目的:检索国内相关数据库,参考JBI循证卫生保健研究中心证据总结制作的核心要素,分析护理证据总结类论文的常见方法学问题,为证据总结的撰写和发表提供参考。方法:使用"证据总结"为检索词检索近5年中国知网、万方数据库、维普数据库中发表的证据总结类论文,将其共性问题进行归纳总结并探讨对应的处理策略。结果:经筛选后共纳入证据总结类论文78篇,其循证问题的提出、证据的检索、筛选、评价以及证据的分级和推荐强度的制定等方面均存在一些共性问题。结论:规范证据总结的报告方法将有利于临床科学决策。

污染水体中氨氮降解菌的筛选与降解特性研究

为研究污染水体中微生物对氨氮的降解能力,寻求安全有效的治理技术,从浙江安吉南北湖的底泥中分离筛选出12株具有氨氮降解能力的菌株X1至X12,以(NH4)2SO4为唯一氮源,对比12株菌株的生长情况与氨氮降解率,挑选出脱氮能力较强的菌株X1和X2。活化后的菌株X1和X2反应48h,氨氮降解率分别为98.05%、97.63%,且反应体系的亚硝酸盐氮和硝酸盐氮积累均极少。未经活化的菌株X1和X2反应48h,氨氮降解率分别为96.40%、97.90%,也未出现明显的硝酸盐氮和亚硝酸盐氮积累。通过观察形态特征、测定生化性质和比对16SrDNA序列,鉴定出菌株X1为浅黄色假单胞菌(Pseudomonas lurida),菌株X2为Pseudomonas weihenstephanensis。菌株X1和X2生长速率快,易成为优势菌种,降解氨氮能力显著,在污染水体生物修复领域具有良好的应用前景。

临床实践方案制定中不同级别证据综合的方法学探讨

循证实践方案是循证实践活动中的核心,是基于最佳证据所形成的指导循证实践变革的依据。由于证据种类及数量繁多,且质量参差不齐,在开展循证实践项目,制定临床方案时应该检索哪类证据以及如何使用不同类型的证据将其纳入方案便成为困扰用证者的主要问题。本文将根据我院近些年开展循证实践项目的经验,结合实际范例对临床实践方案制定中不同级别证据综合的方法学进行探讨,以期为学者开展相应研究时提供参考。

海岛土地利用与生态系统服务价值变化分析——以浙江舟山册子岛为例

生态系统服务价值研究是目前生态学研究的热点之一,但关于海岛地区生态系统服务价值的研究尚不多见。在基于海岛农田产量、森林生物量、植被覆盖度进行生态系统服务价值当量修订的基础上,利用研究区域1986-2014年的土地利用数据,对典型海岛册子岛的土地利用变化与生态系统服务价值进行分析。结果表明:1986-2014年,建设用地面积不断增加,其余土地利用类型面积有不同程度的减少;研究区域整体服务价值处于下降趋势,28年来总价值减少了19.99%,即2.94×107元。其中滩涂沼泽与林地的生态系统服务价值量减少最多,建设用地的价值变化率最大。该研究对转变海岛地区经济发展方式,促进海岛可持续发展能提供基础信息与决策依据。

COVID-19疫情紧急状态下护理证据总结类论文的问题及对策

针对特定循证问题的证据总结为临床提供了科学依据,在当前新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情紧急状态下,证据总结的作用尤为凸显。但由于疫情突发,受时间、证据数量、证据质量等因素的限制,也给证据总结的制作带来了挑战。因此,在此疫情紧急状态下,本文针对证据总结类稿件存在的问题进行分析并提出合理的对策。

大肠杆菌感染对绵羊乳腺成纤维细胞损伤及TLR4表达的影响

为研究绵羊大肠杆菌性乳腺炎中乳腺成纤维细胞的损伤情况及TLR4的作用机制,通过体外培养获得原代绵羊乳腺成纤维细胞,大肠杆菌人工感染细胞建立大肠杆菌性乳腺炎细胞模型,分析大肠杆菌对细胞损伤的影响及TLR4在大肠杆菌性乳腺炎中的作用。采用酶消化法结合差速消化法获得原代绵羊乳腺成纤维细胞;MTT法检测细胞活力及TLR4阻断剂CLI-095的细胞毒性作用;乳酸脱氢酶法检测大肠杆菌对绵羊乳腺成纤维细胞的损伤情况并筛选最适MOI比值;qRT-PCR法检测caspase-3、TLR4的mRNA相对表达量及CLI-095的阻断效果;比色法检测细胞焦亡蛋白caspase-4,5的酶活性;WB检测TLR4蛋白的相对表达量;平板活菌计数法检测CLI-095对大肠杆菌黏附绵羊乳腺成纤维细胞的影响。分离获得绵羊乳腺成纤维细胞,MTT测定结果显示,细胞活力良好;大肠杆菌以最适MOI=4∶1感染绵羊乳腺成纤维细胞后,各时间段LDH释放量均显著升高;caspase-3 mRNA的相对表达量在感染1~3 h内显著上升,3 h后表达量显著下降;caspase-4,5酶活性在感染1~3 h内升高,3 h后降低。TLR4的mRNA及蛋白表达量均显著上调,CLI-095可抑制大肠杆菌对细胞的黏附作用。大肠杆菌感染成纤维细胞后LDH释放量增加、caspase-3基因表达上调、caspase-4,5酶活性升高,促进了绵羊乳腺成纤维细胞的损伤、凋亡及焦亡;大肠杆菌感染促进绵羊乳腺成纤维细胞内TLR4 mRNA及蛋白的表达;TLR4阻断剂CLI-095可能通过抑制TLR4的表达抑制E.coli对细胞的黏附作用。

经济后发地区乡村活力再造的对策研究——以浙西南丽水市为例

地处浙西南的丽水市山多地少,地广人稀,城镇化率和人均GDP均远低于全省平均水平,是一个与经济发达地区有着显著差异的经济后发地区,'三农'问题也有着显著的自身特点。本文对丽水市近十年来的'三农'发展状况进行分析,并结合乡村调查,从'境、人、业'三大要素着手,对乡村活力再造的路径提出对策性建议。提出应通过乡村公共产品的适度投放,改善乡村生产、生活环境,增强乡村吸引力,吸引人才返乡、下乡创业,通过文化引领,有效利用乡村存量资源,带动乡村一二三产业融合发展,实现城乡差别化的协调发展,以期对经济后发地区的乡村振兴发挥指导作用,为丽水实现城乡差别化协调发展,与全省同步高水平建成小康社会提供参考。

如何在临床实践指南制定过程中保证患者及公众的有效参与

临床实践指南是基于系统评价的证据和平衡不同干预措施利弊的基础上,形成能够为患者提供最佳保健服务的推荐意见[1],在指导临床诊疗和改善临床结局中至关重要。虽然系统地检索、评价证据是保证高质量指南制定的首要前提,但制定临床实践指南的初心是为了患者,证据结果和专家经验始终无法替代患者的自身体验和文化背景,因此,患者的参与及意见的听取很有必要。

糖尿病高危足病人足部管理认知、行为及需求的质性研究

[目的]深入了解糖尿病高危足病人对足部管理的认知、行为及需求情况,为糖尿病足的预防和管理以及设计和实施糖尿病足个性化护理干预提供参考和依据。[方法]采用质性研究中的现象学研究方法,对5例糖尿病高危足病人进行半结构访谈,并用现象学分析法进行资料分析。[结果]糖尿病高危足病人对自身足部管理认知主要包括3个类属,其中足部状态认知主要有对糖尿病足的定义、原因以及防护措施的认识模糊,认识到足部管理很重要但保护意识薄弱2个主题;足部行为现状主要有缺乏足部护理知识导致足部护理行为不当,病情反复产生的焦虑导致病人对治疗失去信心,家庭角色致使病人自身无法长期坚持3个主题;足部管理需求主要为缺乏相关的足部健康教育、迫切需求足部管理知识1个主题。[结论]糖尿病高危足病人对自身足部状态在防护和管理上存在匮乏与不足,且相关健康教育在设计及实施时要重点考虑病人的心理疏导以及对病人家属知识的全面教育,加强病人的治疗信心,满足个性化需求和确保有效的足部干预措施。

缺血性脑卒中二级预防患者指南的构建

目的:构建基于循证的缺血性脑卒中二级预防患者指南,以提升缺血性脑卒中患者二级预防意识、提高医患共同决策能力、降低脑卒中复发率。方法:以国际指南协作网(GIN)发布的《患者版本指南构建规范》为指导,成立构建团队、收集健康问题、检索评价指南、筛选推荐意见、进行语言转化,最终构建指南,并通过外部评审评价质量。结果:共纳入7篇临床实践指南,AGREEⅡ评价结果整体质量较高,均为A级;指南涉及的内容包括院前处理、诊断与治疗、二级预防、并发症的预防与处理、早期康复5大模块;2轮专家咨询得分率为83.1%~100.0%,AGREEⅡ评价结果为A。结论:患者指南基于临床实践指南,结合医务人员专业经验,充分体现患者的价值与偏好,可为患者二级预防行为提供指导,也为不同领域学者研究患者指南提供借鉴。

城市绿地对居民身心福祉的影响

城市绿地是人工与自然耦合的城市景观之一,是改善居民居住环境重要组成部分,更是提高居民身心健康的有效途径。以杭州主城区为研究对象,通过GIS技术对城市绿地遥感图像进行解译得到杭州主城区绿地空间布局图,同时,以人口密度为阻力要素,基于交通路网的500m网络距离可达范围内绿地数量和面积作为分类标准。通过对45个高、中、低不同档次的居民区进行问卷调查得到665份居民感知数据并进行统计整理。利用结构方程模型进行以绿地数量及游玩时间为标准的组间分析,区别不同组别的差异及其原因,分析城市绿地数量、面积,居民认知、动机,绿地吸引力等与居民身心健康福祉及满意度之间的关系。结果显示:城市绿地数量、居民游玩绿地次数时间等与居民福祉有显著的正向关系;居民对绿地作用的认知、去往绿地的动机进一步影响居民身心健康福祉;城市绿地的自身引力会激发居民去往绿地的积极性,从而增加去往绿地频次。另外,不同社会属性的个体对绿地需求不同,所产生的福祉效应及满意度也会有所差异。从增加居民区周围的街头绿地及邻里公园数量、提升绿地吸引力、提升居民对城市绿地作用的认知3个方面对城市绿地今后的发展规划提出建议。

基于形态学空间格局分析与CA-Markov模型的武义县绿色基础设施时空格局变化及情景模拟

在全球城市化快速发展的背景下,绿色基础设施(GI)因其良好的生态环境效益而在城市规划与建设中受到重视。以浙江省金华市武义县为研究区,采用ArcGIS、GuidosToolBox、Conefor 2.6等软件对武义县1990、2005、2018年的3期土地利用类型图进行形态学空间格局分析,并设置城市发展优先、生态保护优先、自然发展3种情景,运用CA-Markov模型分别预测3种情景下的未来绿色基础设施空间格局。结果显示:1990—2018年武义县的绿色基础设施面积占武义县面积的比例在不断降低,重要核心区、孤岛面积不断减少,桥接区、孔隙、支线面积不断增大,景观破碎化问题加重。在2030年的情景模拟中,自然发展和城市发展优先情景下的武义县GI面积分别减少171.79 km^2 和225.73 km^2,核心区面积分别减少84.81 km^2和126.76 km^2。生态保护优先情景下,武义县GI面积增加25.52 km^2,核心区面积增加69.60 km^2。结果表明,如果一味追求粗犷式的经济发展,忽视生态保护,武义县的景观破碎化问题将进一步加剧。基于此,武义县应以生态保护优先为前提,适度开发中部、南部地区的旅游资源,以实现经济增长与环境相协调的可持续发展战略。

白子菜对2型糖尿病合并急性肾损伤小鼠的保护效应

目的:探讨白子菜对2型糖尿病合并急性肾损伤小鼠(T2DM+AKI)的保护作用,并从炎症反应角度探讨其初步疗效机制。方法:取90只SPF级KM小鼠随机分为正常对照组、T2DM组、(T2DM+AKI)组、(白子菜高、低剂量+T2DM)组、(白子菜高、低剂量+T2DM+AKI)组、(二甲双胍+T2DM)组和(二甲双胍+T2DM+AKI)组,每组10只。造模小鼠喂食高糖高脂饲料结合一次性腹腔注射100mg/kg链脲佐菌素复制T2DM模型,再腹腔注射LPS(10mg/kg)复制(T2DM+AKI)模型。治疗组小鼠在腹腔注射LPS前7d开始,用白子菜水煎液灌胃,1次/d,持续15d。除正常对照组外,其余各组小鼠全程喂养高脂饲料直至实验结束。末次给药后禁食不禁水12h,检测各组小鼠空腹血糖及血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)含量;ELISA试剂盒检测肾组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)含量;并取部分肾脏组织做HE染色切片,观察肾组织损伤情况。结果:与正常对照组比较,T2DM组、(T2DM+AKI)组小鼠肾小球萎缩变形,数目明显减少,可见严重的肾损伤,且(T2DM+AKI)组较T2DM组严重;空腹血糖、血清BUN和Scr及肾组织TNF-α、IL-6含量明显增加,而IL-10含量明显减少,且(T2DM+AKI)组较T2DM组增加或减少更明显。与T2DM组、(T2DM+AKI)组比较,白子菜组小鼠肾小球结构清晰,数目明显增多,大小形态基本恢复正常,肾小球萎缩现象得到一定程度的缓解;空腹血糖、血清BUN和Scr及肾组织TNF-α、IL-6含量明显减少,而IL-10含量明显增加。结论:白子菜对(T2DM+AKI)具有保护作用,表现为同时降低空腹血糖、BUN和Scr含量,而其机制可能与抑制炎症反应有关。

脑脊液酶谱在脑血管疾病中的进展

脑血管疾病是一组由各种原因导致颅内动静脉管壁或脑组织供血血管发生病变,产生局灶性或弥漫性脑组织损害和功能障碍的疾病。脑血管疾病过程中,脑细胞壁和血管壁破裂或通透性改变,一些酶可从脑组织和脑血管中渗出到细胞外液,进而进入脑脊液(CSF),使CSF中的酶含量发生改变。不同的脑血管疾病,CSF中会有不同的酶,酶的数量和活性也有区别。目前,国内外对脑血管疾病的研究虽多,但对其CSF酶谱的探索尚不完善。

高等中医药院校中西医结合院前急救公共选修课的构建

目的构建高等中医药院校中西医结合院前急救公共选修课。方法基于院前急救培训素材及文献回顾设计专家咨询表,方便选取从事急救临床与护理的医务人员及高等院校从事急救相关教学的教师20人进行专家咨询。结果通过两轮咨询,最终确定课程内容包括基础生命支持、常见急症及中医急救三个方面共42个条目。同时确定了课时数、理论课与操作课的教学方法、临床师资的遴选标准等课程设置相关内容。结论本研究通过专家咨询法构建的院前急救中西医结合公共选修课程具有科学性,可为兄弟院校开设类似课程提供参考。

Quality Evaluation on Traditional Chinese Medicine Nursing Plan for Stroke in Acute and Recovery Phases

OBJECTIVE: To formulate the quality evaluation questionnaire of Traditional Chinese Medicine(TCM) nursing plan for stroke in acute and recovery phases, and to evaluate the quality of TCM nursing plan for stroke by clinical nurses. METHODS: The questionnaire was designed by referring to the Applicability Questionnaire of TCM Clinical Diagnosis and Treatment Guideline, and the expert consultation was used to assess the content validity. In addition, the results of the questionnaire were processed and analyzed with SPSS20.0 software. RESULTS: The content validity of the self-designed questionnaire was 0.94 for the S-CVI/Ave score. The results of the questionnaire demonstrated that the overall content of the plan was "better than the original routine nursing plan"(59.18%); the recognition degree of "common symptoms"(36.70%) and "syndrome classification"(36.70%) of the plan was the lowest. CONCLUSION: The plan is supposed to be further improved in the future in order to be coincident with clinical reality.