溴敌隆对斑马鱼胚胎/仔鱼的发育毒性效应研究

为评价第二代抗凝血类灭鼠剂溴敌隆的潜在生态毒性效应,以模式动物斑马鱼为研究对象,研究了溴敌隆对斑马鱼胚胎/仔鱼的发育毒性以及对抗氧化系统的影响。研究结果表明,当溴敌隆浓度高于0.39 mg·L^(-1)时,斑马鱼胚胎/仔鱼死亡率及畸形率显著升高,与对照组相比具有显著性差异,斑马鱼仔鱼体内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性以及还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量随溴敌隆浓度增大,均呈逐渐升高趋势,并在1.18 mg·L^(-1)浓度组达到最大值,具有显著差异,表明溴敌隆对斑马鱼仔鱼的抗氧化系统造成严重损伤,从而导致机体死亡。对溴敌隆暴露导致的斑马鱼胚胎/仔鱼的发育毒性以及氧化损伤的机制进行了初步探讨,为进一步研究溴敌隆对动物的发育毒性机制以及其潜在的生态危害提供了研究基础。

禁毒技术创新人才培养初探——以浙江警察学院“毒品防控技术研究人才实验班”为例

禁毒技术创新人才是指适应新时代公安禁毒工作,具有强烈的事业心和社会责任感,富有创新精神和能力,熟练掌握现代仪器设备的禁毒技术人员。该文以浙江警察学院“毒品防控技术研究人才实验班”为例,从培养方案、选拔机制、培养模式、课程设置等多个方面探讨禁毒技术创新人才培养的新路径,相关研究为培养公安院校技术类创新人才提供借鉴。

数字化单分子免疫分析技术研究进展及毒品领域应用展望

数字化单分子免疫分析(Simoa)技术是一种新型的超高灵敏度、特异性、全自动化的多重检测技术。该技术结合了单分子、图像识别、数字化分析和荧光检测技术,能实现单分子检测,目前已经在神经性疾病的微创检查、肿瘤早期诊断、炎症、感染性疾病甚至miRNA检测等领域进行大量研究,均取得了不错的成果。毒品成瘾、戒断和耐受实质上是机体的一系列生理、生化过程,Simoa技术用于吸毒人员的生理生化研究将有助于阐明毒品成瘾和耐受机制,并为毒品戒断药物的研制提供理论依据。

成骨细胞膜色谱/超高效液相色谱-飞行时间质谱法快速筛选六味地黄汤抗骨质疏松活性成分

采用成骨细胞建立了细胞膜色谱/超高效液相色谱-飞行时间质谱(CMC/UPLC-TOF/MS)的分析方法。该法可快速筛选中药方剂六味地黄汤中潜在的抗骨质疏松活性成分,通过细胞试验和斑马鱼骨质疏松模型试验验证了筛选结果梓醇的体内外药效作用。以六味地黄汤水提物(90 g/L)为样品,通过CMC/UPLC-TOF/MS分析,快速鉴别细胞膜色谱柱保留成分群,高选择性获取六味地黄汤中16种潜在活性成分。该文以前沿色谱法分析梓醇、丹皮酚、齐墩果酸与细胞膜色谱固定相的亲和强度,选择亲和强度和含量较高的梓醇进行体内外药效验证,发现梓醇在对小鼠成骨细胞有显著促生长作用,能提高骨质疏松斑马鱼头部骨矿化面积。CMC/UPLC-TOF/MS筛选方法能在复杂中药方剂中快速得到抗骨质疏松活性成分,具有操作简便、快速、高效灵敏的优势。

芬太尼对斑马鱼幼鱼的心脏和神经毒性及机制

目的研究芬太尼暴露对斑马鱼幼鱼的心脏和神经毒性及对其发育相关基因表达的影响。方法将受精后2 h(2 hpf)内发育良好的斑马鱼胚胎随机分为正常对照组,芬太尼5,10和20 mg·L^(-1)染毒组。使用体视显微镜观察斑马鱼发育中的畸形表型,24,48,72,96和120 hpf统计斑马鱼胚胎或幼鱼的畸形率,120 hpf统计幼鱼的存活率。72,96和120 hpf采用斑马鱼微视行为分析系统记录幼鱼心率,120 hpf分析心包面积和静脉窦与动脉球(SV-BA)距离。120 hpf采用HE染色观察心房心室结构和心肌细胞结构,Image J软件分析新生神经元的面积和密度,荧光定量PCR检测心脏和神经发育相关基因心脏特异性转录因子(nkx2.5)、神经元PAS结构域蛋白4a(npas4a)、心房型利钠肽原B(nnpb)和高迁移率族转录因子9b(sox9b)mRNA表达。结果芬太尼造成斑马鱼孵化不完全、脊柱弯曲、尾部畸形和心包水肿等发育畸形。与正常对照组相比,芬太尼10和20 mg·L^(-1)组72 hpf幼鱼的畸形率显著增加(P<0.01),芬太尼各浓度组120 hpf幼鱼的存活率无明显变化;72 hpf芬太尼20 mg·L^(-1)组幼鱼的心率显著下降(P<0.01);120 hpf芬太尼各浓度组幼鱼的心率均显著下降(P<0.01),芬太尼20 mg·L^(-1)组斑马鱼幼鱼心包面积和SB-BA距离均显著增加(P<0.01),心房心室明显肿大,心肌细胞层数少且薄;斑马鱼幼鱼头部新生神经元密度和面积显著下降(P<0.05,P<0.01);nkx2.5,npas4a和sox9b mRNA表达下调(P<0.01),nppb mRNA表达上调(P<0.01)。结论斑马鱼胚胎发育期间接触芬太尼导致幼鱼心脏发育畸形和心跳减缓,同时产生新生神经元毒性,可能与影响心脏和神经发育相关基因的表达相关。

电子鼻分析技术在油漆稀释剂鉴别中的应用研究

目的建立不同厂家和品牌油漆稀释剂的鉴别方法。方法利用超快速气相色谱-电子鼻分析(E-Nose)技术对37种油漆稀释剂样本进行分析,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)方法进行数据处理并建立样本识别模型。结果通过超快速气相色谱-电子鼻分析技术,可实现不同厂家和品牌油漆稀释剂的鉴别。结论为火灾现场油漆稀释剂鉴别提供了一种有效的分析手段。

斑马鱼条件位置偏爱模型在药物成瘾性研究中的应用与进展

斑马鱼(Danio rerio)具有体型小、易于饲养、繁殖率高、繁殖周期短、体外受精、胚胎透明易于观察等诸多优势,是药物成瘾研究当中理想的新型模式生物。本文概述药物成瘾问题,说明斑马鱼动物模型的体外发育、高通量、行为学特征丰富以及基因与人类具有相似性的优点,综述斑马鱼条件位置偏爱模型在各类常见成瘾性药物,包括甲基苯丙胺、尼古丁、可卡因、乙醇、咖啡因等中的应用与进展,指出该模型在毒品研究和管控领域进一步的发展趋势。

复合地层下h型抗滑桩的受力特性及桩间距影响研究

为研究复合地层下h型抗滑桩的支护效果及结构受力特性,以水库边坡为例,采用Flac 3D软件模拟了不同桩间距下的边坡支护模型,从剪力、弯矩和位移等多个角度分析了抗滑桩的受力特性。结果表明:天然工况下边坡将发生滑动破坏,最大剪应变增量位于滑面底部,支护后边坡剪应变得到有效约束;在综合考虑边坡治理效果以及材料成本的条件下,选用4m间距的h型抗滑桩适用于该边坡治理。

5-MeO-MiPT对斑马鱼毒性及生物转化途径研究

目的为评价色胺类新精神活性物质N,N-甲基异丙基-5-甲氧基色胺(N-methyl,N-isopropyl-5-methoxytryptamine,5-Me O-Mi PT)的毒性效应及生物转化途径。方法以斑马鱼为模式生物,进行自发活动行为测试及镜像反射行为模型测试,分析5-Me O-Mi PT对斑马鱼的毒性效应;并通过超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用仪分析斑马鱼在药物处理后24h的代谢产物。结果斑马鱼急性暴露在5-Me O-Mi PT溶液(浓度为5μg/m L)中1h后,与空白对照实验相比,其行为运动明显迟缓,运动距离大幅缩减;对药物处理后的斑马鱼24h的代谢产物情况进行检测分析,明确检出1种代谢物。结论药浴5-Me O-Mi PT对斑马鱼的行为活动有较为明显的抑制作用;斑马鱼模型具有给药方式简单、模型建立成本低等优点,在其他药物评价上有更广的应用前景。

离心式微固相萃取与液相色谱-质谱联用测定生物样品中新型合成大麻素

建立了离心式微固相萃取与液相色谱-质谱(LC-MS)联用,同步测定尿样和血样中5种新型合成大麻素的分析方法。尿样和血样稀释后在离心条件下通过C18离心式固相萃取柱,甲醇洗脱后LC-MS检测。结果显示,尿液基质中,5种合成大麻素在0.1~10μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))大于0.994,检出限(LODs)为0.01~0.02μg/L,定量限(LOQs)为0.05~0.08μg/L。全血基质中,5种合成大麻素在0.5~10μg/L浓度范围内线性关系良好,R^(2)大于0.992,LODs为0.05~0.15μg/L,LOQs为0.18~0.50μg/L。在尿样和全血中分别添加0.5,2,10μg/L 3个浓度水平的合成大麻素,回收率分别为81.9%~108.3%和75.0%~95.5%,相对标准偏差(RSDs)低于10%。该方法可以满足生物样品中新型合成大麻素的分析需求。

离心式固相微萃取与液相色谱-质谱联用测定尿样中莨菪烷生物碱

建立了离心式固相微萃取与液相色谱-质谱联用(LC-MS)同步测定尿样中4种莨菪烷烃类生物碱(山莨菪碱、氢溴酸樟柳碱、甲溴东莨菪碱和丁溴东莨菪碱)的方法。样品经C18微柱富集、分离解吸后进行LC-MS测定,前处理过程用时5 min。结果表明,山莨菪碱、氢溴酸樟柳碱和丁溴东莨菪碱在0.1~50μg/L浓度范围内线性关系良好,甲溴东莨菪碱线性范围为0.5~50μg/L,相关系数(R^(2))均大于0.99。4种莨菪烷碱的检出限(LODs)和定量限(LOQs)分别为0.02~0.15和0.08~0.50μg/L。同一柱、不同柱之间萃取10μg/L莨菪烷碱的精密度良好,相对标准偏差(RSDs)均低于10%。在尿样中分别添加4,20,80μg/L 3个浓度水平的莨菪烷碱,回收率为80.2%~99.6%,无明显基质效应。该方法适用于生物流体中莨菪碱类物质的同步测定。

高层次科研平台与“毒品防控”教学改革联动机制初探——以浙江省毒品防控技术研究重点实验室为例

浙江省毒品防控技术研究重点实验室是依托浙江警察学院建设的致力于禁毒领域先进技术和理论研究的省级重点实验室,学院基于社会需求及自身的优势,依托重点实验室高层次科研平台,借助先进仪器设备和高层次教师人才资源,通过"医工交叉"科研训练,探索"毒品防控"教学新路径,进一步加深学生对"毒品危害、毒品防控"等知识体系的构建,提高学生发现及解决问题的能力。通过高层次科研平台与"毒品防控"教学改革的联动实践,该类专业学生的创新能力、科学素养以及整体素质均得到大幅提升,为今后从事公安工作尤其是毒品防控工作奠定坚实的基础,也为其他高等院校应用型专业人才的培养提供参考。

固相萃取与超高效液相色谱-质谱联用测定生物样品中芬太尼类物质

建立了固相萃取与液相色谱-质谱(LC-MS)联用分析血清和尿液中10种芬太尼类物质的方法。样品经C18固相萃取(SPE)柱富集分离后,甲醇洗脱,洗脱液采用LC-MS测定。结果表明,尿样基质中,10种芬太尼物质质量浓度在1~100μg/L范围内线性关系良好,相关系数(R2)大于0.99,检出限(LODs)和定量限(LOQs)范围分别为0.18~0.32μg/L和0.61~1.00μg/L。血清基质中,10种芬太尼含量在2~100μg/L范围内呈现良好的线性关系,其R2大于0.99,LODs为0.15~0.33μg/L,LOQs为0.50~1.00μg/L。尿样中芬太尼类物质萃取回收率为84.2%~107.7%,血清中萃取回收率为84.7%~99.7%。该方法适用于生物流体中芬太尼类物质的同步测定。

固相萃取与气相色谱-质谱联用测定血清中9种有机磷残留

建立了固相萃取与气相色谱-质谱(GC/MS)联用同时测定血清中9种有机磷农药的方法。样品通过C18固相萃取柱,用正己烷-二氯甲烷混合溶剂进行洗脱,经0.45μm滤膜过滤后,常温下N2吹干,加入100μL乙酸乙酯重溶,GC/MS进行测定。方法测定甲拌磷、二嗪农、氯唑磷和水胺硫磷线性范围为0.1~100μg/L,乙酰甲胺磷、灭线磷、丙溴磷和甲基嘧啶磷线性范围为0.5~100μg/L,甲基毒死蜱线性范围为1.0~100μg/L,线性相关系数(R2)均大于0.99。检出限为0.01~0.23μg/L,3根不同SPE柱日内和日间精密度分别为3.2%~8.6%和5.0~8.5%。测定血清中9种有机磷,回收率在72.7%~119.4%之间。该方法满足血清中多种有机磷农药残留的同步测定。

Fe_(3)O_(4) Nanoparticle‑modified Multi‑walled Carbon Nanotubes for the Determination of Synthetic Pyrethroids in Human Blood

In this study,a sensitive and rapid magnetic solid‑phase microextraction(MSPE)procedure based on Fe_(3)O_(4) nanoparticle‑modified,multi‑walled carbon nanotubes combined with a gas chromatography/electron capture detector(GC/ECD)was developed to quantify pyrethroids in human blood samples.This study compared liquid-liquid extraction and solid‑phase extraction methods and found that the MSPE‑GC/ECD method had many advantages,such as high recovery rate,high extraction efficiency,high detection sensitivity,low limit of detection,and simple operation.It can meet the actual requirements for the determination of synthetic pyrethroids in human blood.