生长分化因子-5(GDF-5)促进人退行性变髓核细胞外基质表达情况的研究（英文）

目的：研究腺病毒介导的GDF-5对人退行性变椎间盘髓核细胞生长和细胞外基质表达的影响，探索椎间盘退行性变基因治疗的新途径。创新点：首次验证了GDF．5对人退行变的髓核细胞的生长和细胞外基质的分泌均具有明显的促进作用，为椎间盘退行性变疾病早期基因治疗提供了新的途径。方法：利用腺病毒介导的GDF．5转染人退变的髓核细胞，设空白对照组、阴性对照组（绿色荧光蛋白（GFP）组）和实验组（GDF-5组）三个组，3、7、14和21天四个时问点。在预定的时间点，通过蛋白质免疫印迹（Westernblotting）、番红-O染色、免疫组化染色、酶联免疫法定量检测（ELISA）、逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和细胞外基质的定量分析等手段，验证GDF-5对退变髓核细胞外基质表达的影响，同时对GDF．5对髓核细胞生长情况的促进作用进行了表征。结论：Ad—GDF-5能成功转染人退变的髓核细胞（图1），能有效地促进人退变髓核细胞细胞外基质Aggreean和Ⅱ型胶原（CollagenⅡ）分泌（图4-7），RT-PCR的结果表明Aggrecan和CollagenII基因表达也得到了明显的增强（图8）。同时GDF-5对人退变的髓核细胞的生长也有一定的促进作用（图9）。因此，Ad-GDF-5是椎间盘退行性变早期基因治疗的新途径。

新型壳聚糖水凝胶结合软骨细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究(英文)

目的：评估壳聚糖水凝胶结合肋软骨细胞构建的新型组织工程软骨对兔关节软骨缺损的修复效果。创新点：利用自主研发的具有良好生物相容性和稳定性的壳聚糖水凝胶与软骨细胞，在体外初步构建组织工程软骨，并尝试利用其修复缺损的关节软骨，从而为关节软骨缺损的修复提供了一种新的治疗方法。方法：取兔肋软骨体外培养扩增，获得P2代软骨细胞，将其种植到冻干的壳聚糖水凝胶上，体外培养一周，获得初步构建的组织工程软骨。构建兔膝关节软骨缺损模型，并分为3组：实验组植入组织工程软骨；对照组植入壳聚糖水凝胶；空白组不做任何处理。分别于术后4、8和12周取材，通过大体观察、苏木精．伊红染色、番红-O染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色等方法观察缺损关节软骨的修复情况，并用国际关节软骨修复协会（ICRS）制定的评分法进行大体及组织学评分。结论：兔肋软骨细胞能在实验室自主构建的壳聚糖水凝胶上增殖并分泌细胞外基质（图2），植入到兔关节软骨缺损处后，对缺损关节软骨具有良好的修复作用（图3和5），且修复是一种完全的结构性的修复（图5～7）。