期刊文献+
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
席夫碱法制备大孔聚合物肝素亲和层析介质
1
作者 古嘉如 王楠 +6 位作者 马磊 乔娟 靳海波 何广湘 赵岚 黄永东 张荣月 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期480-488,共9页
肝素亲和层析介质因其专一性好、操作条件温和等特点,广泛应用于蛋白分离纯化,本工作以大孔聚丙烯酸酯微球为基质,肝素为配基,利用席夫碱法制备了肝素亲和层析介质。配基偶联经过三步完成,首先将大孔聚丙烯酸酯微球表面环氧基团通过0.5 ... 肝素亲和层析介质因其专一性好、操作条件温和等特点,广泛应用于蛋白分离纯化,本工作以大孔聚丙烯酸酯微球为基质,肝素为配基,利用席夫碱法制备了肝素亲和层析介质。配基偶联经过三步完成,首先将大孔聚丙烯酸酯微球表面环氧基团通过0.5 mol/L H_(2)SO_(4)水解为邻羟基,然后将邻羟基氧化为醛基,最后利用醛基与肝素分子的胺基反应将肝素分子固定于微球表面。以溶菌酶为模型蛋白,主要考察了肝素偶联反应的各因素对蛋白结合容量的影响规律,包括肝素浓度、缓冲液pH及浓度、反应时间等,建立了最优偶联肝素配基的方法。所得亲和介质静态结合容量可达40.3 mg/mL,比商品GP-肝素介质高约36%,经1.0 mol/L的氯化钠洗脱,其蛋白回收率达到95%。通过扫描电子显微镜表征微球表面形貌,观察到偶联肝素后的微球仍能保持其大孔结构。考察了该类亲和介质在不同操作流速(31.8~318 cm/h)下的动态结合容量,发现操作流速提高10倍后介质结合容量仅下降12%。经10次重复使用后,动态结合容量仍可保持初始容量的81%。用于混合蛋白模型中分离乳铁蛋白,结果表明具有良好的分离效果。 展开更多
关键词 亲和层析 肝素 大孔层析介质 偶联方法 席夫碱法
原文传递
新型电荷型纳米盘的可控制备及其与细胞色素P450的结合性能
2
作者 陶娇丽 黄永东 +6 位作者 赵岚 朱凯 吴学星 周丹妮 苏志国 马光辉 刘红缨 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1197-1203,共7页
分别采用氮气吹干法和旋转蒸发法制备由磷脂和膜支架蛋白组成的电荷型纳米盘,用凝胶过滤色谱对其尺寸分级,分析了其性能,考察了其与肝微粒体细胞色素P450的结合能力。结果表明,纳米盘外观澄清透明,微观呈圆盘状,平均直径10nm,在p H 7.4... 分别采用氮气吹干法和旋转蒸发法制备由磷脂和膜支架蛋白组成的电荷型纳米盘,用凝胶过滤色谱对其尺寸分级,分析了其性能,考察了其与肝微粒体细胞色素P450的结合能力。结果表明,纳米盘外观澄清透明,微观呈圆盘状,平均直径10nm,在p H 7.4下Zeta电位为-19.86 m V;肝微粒体破碎液与纳米盘能很好结合,CO差示光谱在450 nm出现明显吸收峰,细胞色素P450含量为0.10 nmol/mg,比活比未经纳米盘处理时提高13.0倍,较传统方法提升1.5倍,且操作时间由数日缩短至数小时。电荷型纳米盘在结合膜蛋白细胞色素P450的同时,活性保持良好,在膜蛋白研究领域极具应用潜力。 展开更多
关键词 纳米盘 电荷 膜蛋白 纯化 重构 细胞色素P450
原文传递
新型耐碱蛋白A介质的制备与性能
3
作者 韦巍 黄永东 +7 位作者 赵岚 吴学星 朱天孝 李冬雪 靳海波 张荣月 苏志国 马光辉 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期609-616,共8页
以蛋白A结构中耐碱性更好的C区为基础,构建一种新型耐碱蛋白A,并偶联至琼脂糖基质,获得新型耐碱蛋白A亲和层析介质,分别用激光共聚焦显微镜和石英晶体微天平研究了人免疫球蛋白(h Ig G)与蛋白A介质的结合过程。结果表明,该介质具有较商... 以蛋白A结构中耐碱性更好的C区为基础,构建一种新型耐碱蛋白A,并偶联至琼脂糖基质,获得新型耐碱蛋白A亲和层析介质,分别用激光共聚焦显微镜和石英晶体微天平研究了人免疫球蛋白(h Ig G)与蛋白A介质的结合过程。结果表明,该介质具有较商品配基更高的结合力和稳定的再生性能,hIgG动态载量达62.0 mg/mL,40次再生操作后载量为初始载量的84%。该介质在抗体纯化领域具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 耐碱蛋白A 层析介质 亲和层析 抗体纯化 动态载量
原文传递
基于疫苗颗粒完整性的硅胶吸附/解吸附纯化重组乙肝表面抗原工艺研究
4
作者 胡胜杰 黄永东 +9 位作者 赵岚 朱凯 苗壮 王飞 晋洪超 李建 杨珺 汪和睦 马光辉 袁洪水 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1198-1209,共12页
针对重组汉逊酵母乙肝表面抗原(HBsAg)在传统纯化过程中稳定性差的问题,采用静态光散射、荧光光谱和动态光散射等分析手段,从颗粒完整性角度研究其在不同pH条件下的稳定性变化。以其为指导,采用硅胶吸附/解吸附纯化HBsAg,建立该过程中... 针对重组汉逊酵母乙肝表面抗原(HBsAg)在传统纯化过程中稳定性差的问题,采用静态光散射、荧光光谱和动态光散射等分析手段,从颗粒完整性角度研究其在不同pH条件下的稳定性变化。以其为指导,采用硅胶吸附/解吸附纯化HBsAg,建立该过程中关键因素的响应面模型,并与疏水层析联用,进一步纯化HBsAg,分析纯化效果以及纯化后疫苗颗粒完整性。采用透射电镜观察纯化后疫苗形貌,用高效分子排阻色谱法(HPSEC)分析颗粒稳定性。结果表明在酸性溶液下,pH接近HBsAg等电点时,抗原颗粒间静电斥力减小,颗粒容易聚集;碱性条件下,抗原颗粒内部疏水基团暴露,造成颗粒解聚。建立响应面模型,以活性收率为响应值时,最佳纯化工艺为吸附pH=7.43,洗脱pH=10.48,洗脱温度55.4℃,此时活性收率最高为39.1%;以纯化倍数为响应值时,吸附pH=7.16,洗脱pH=10.52,洗脱温度55.1℃,此时纯化倍数最高为1.90。进一步对洗脱液进行疏水层析纯化,活性收率为49.73%,颗粒完整性为85.79%,透射电镜观察到抗原颗粒粒径为20~40 nm。与传统疏水层析方法相比,采用硅胶吸附/解吸附与疏水层析联用的纯化方法,疫苗活性收率提高31.99个百分点,颗粒完整性提高20.90个百分点,颗粒稳定性提高22.93个百分点。该研究为高效纯化重组HBsAg及提高疫苗纯化过程的颗粒完整程度等提供新思路。 展开更多
关键词 乙肝表面抗原 颗粒完整性 硅胶吸附/解吸附 响应面法 疏水层析
原文传递
Time effects of rice straw and engineered bacteria on reduction of exogenous Cu mobility in three typical Chinese soils 被引量:1
5
作者 Hanzhi SHI Dian WEN +8 位作者 yongdong huang Shoujun XU Tenghaobo DENG Furong LI Zhichao WU Xu WANG Peihua ZHAO Fuhua WANG Ruiying DU 《Pedosphere》 SCIE CAS CSCD 2022年第5期665-672,共8页
Globally,copper(Cu)accumulation in soils is a major environmental concern.Agricultural organic waste and some bacterial species can readily absorb metals in an eco-friendly manner,and thus are commonly used in metal-c... Globally,copper(Cu)accumulation in soils is a major environmental concern.Agricultural organic waste and some bacterial species can readily absorb metals in an eco-friendly manner,and thus are commonly used in metal-contaminated soil remediation.This study investigates the change in Cu fractions during the aging process and the time effects of rice straw(RS)and engineered bacteria(EB)(Pseudomonas putida X4/pIME)on reduction of Cu mobility.Three typical Chinese soils(red,cinnamon,and black soils)were incubated with RS or RS+EB in the presence of exogenous Cu for 24 months.The soil physicochemical properties,reactive soil components,Cu fractions,and Cu mobility were determined over time.The Cu mobility factor(MF)values were the lowest in the black soil(6.4-9.2)because of its high organic carbon and clay contents.The additions of both RS and RS+EB accelerated Cu stabilization during the aging process in all three soils.The Cu MF values decreased with time during the initial 20 months;however,the MF values increased thereafter in all soils,which might be due to the reduction of humic substances and amorphous iron oxides and the increase in iron oxides complexed on the organic matter.The reduction rates of Cu MF were similar after 16,24,and more than 24 months in the red,cinnamon,and black soils,respectively,indicating that RS and RS+EB could limit Cu mobility at different times in various soils.The RS treatment showed the greatest efficiency in reducing Cu mobility in the red,cinnamon,and black soils after 12,12,and 8 months of incubation,respectively.The RS+EB treatment was more efficient than the RS treatment in the red soil during the initial 8 months of the incubation period.Our study provides theoretical support for Cu risk assessments and RS supplementation for Cu remediation in different soils. 展开更多
关键词 AGING Cu distribution mobility factor sequential extraction soil incubation
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部