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T7 RNA聚合酶基因表达系统在鱼腥藻7120中构建及hG-CSF的表达 被引量:1
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作者 谢雪晴 田钰琪 +2 位作者 田敬欢 宁文艳 王春梅 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2467-2477,共11页
外源基因的表达效率低是蓝藻基因工程发展的瓶颈之一,T7 RNA聚合酶表达系统实现了大肠杆菌中外源基因的高效表达,蓝藻与大肠杆菌同为革兰氏阴性菌,具有较高的遗传同源性,在蓝藻中构建T7 RNA聚合酶表达系统有可能提高外源基因在蓝藻中的... 外源基因的表达效率低是蓝藻基因工程发展的瓶颈之一,T7 RNA聚合酶表达系统实现了大肠杆菌中外源基因的高效表达,蓝藻与大肠杆菌同为革兰氏阴性菌,具有较高的遗传同源性,在蓝藻中构建T7 RNA聚合酶表达系统有可能提高外源基因在蓝藻中的表达效率。为了在鱼腥藻7120中构建T7 RNA聚合酶表达系统,采用重叠延伸PCR技术和酶切连接等方法构建能够表达T7 RNA聚合酶的定点整合载体pEASY-T1-F1-TacT7RNAPCmR-F2以及由T7启动子驱动hG-CSF基因表达的穿梭表达载体pRL-T7-hG-CSF;采用电击转化法将定点整合载体导入野生型鱼腥藻中,通过三亲接合的方法将穿梭表达载体转入已定点整合T7 RNA聚合酶的转基因鱼腥藻中。利用PCR技术鉴定外源基因在蓝藻中的存在;RT-PCR方法检测外源基因在蓝藻中的转录情况;Western blotting实验检测外源基因在蓝藻中的蛋白表达情况。结果表明两种载体构建成功,T7 RNA聚合酶基因和hG-CSF基因被转入鱼腥藻中,两个基因均在藻中表达,T7 RNA聚合酶表达系统在鱼腥藻中构建成功,与传统蓝藻表达系统相比,文中在鱼腥藻中构建的T7表达系统使hG-CSF基因的表达量提高2倍。该表达系统将为蓝藻基因工程的应用提供更优的工具,将促进蓝藻作为底盘细胞在合成生物学等领域的发展。 展开更多
关键词 T7 RNA聚合酶 T7启动子 鱼腥藻Anabaena sp.PCC 7120 人粒细胞集落刺激因子 电击转化 三亲结合
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Influence of N-doping on dielectric properties of carbon-coated copper nanocomposites in the microwave and terahertz ranges
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作者 Feirong Huang Shuting Fan +7 位作者 yuqi tian Xinghao Qu Xiyang Li MaoFan Qin Javid Muhammad Xuefeng Zhang Zhidong Zhang Xinglong Dong 《Journal of Materiomics》 SCIE 2022年第6期1131-1140,共10页
Carbon-coated Cu nanocomposites (Cu@C NCs) consisting of core-shell nanoparticles and nanorods weresynthesized by arc discharge plasma under an atmosphere of He and H_(2) gas, and the N-doping of themwas achieved by a... Carbon-coated Cu nanocomposites (Cu@C NCs) consisting of core-shell nanoparticles and nanorods weresynthesized by arc discharge plasma under an atmosphere of He and H_(2) gas, and the N-doping of themwas achieved by a post-treatment process using ureal as the precursor. The concentration of N in the Ndoped samples varies in the range of 0.62%-2.31 % (in mole), with a transformation from pyrrolic N tographitic N when increasing the relative content of ureal. Dielectric properties of the NCs without or withN-doping in the microwave and THz bands were investigated. The N-doped samples achieve theenhanced dielectric loss in both microwave and THz bands. In the microwave band, dielectric loss wasdominated by interfacial polarization, dipolar polarization, and conduction loss, while in the THz band,plasma resonance, ionic polarization and conduction loss are responsible for the dielectric loss, with astrong absorption characteristic dominated by conductive effect. 展开更多
关键词 Cu/C nanocomposite Dielectric property N-DOPING Terahertz frequency
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