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单核细胞增生李斯特菌LLO-InlP缺失株的构建及部分生物学特性研究 被引量:1
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作者 晋瑞婕 曾东东 +4 位作者 秦赫 邓秋艳 任静静 蒋建军 王鹏雁 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期224-230,共7页
目的构建单核细胞增生李斯特菌LLO-InlP缺失株,探究LLO、InlP基因对单核细胞增生李斯特菌生物学特性的影响。方法通过温度敏感型(Ts)质粒载体基因敲除法,构建单核细胞增生李斯特菌LM681ΔInlP、LM681ΔLLO-InlP基因缺失株,通过检测不同... 目的构建单核细胞增生李斯特菌LLO-InlP缺失株,探究LLO、InlP基因对单核细胞增生李斯特菌生物学特性的影响。方法通过温度敏感型(Ts)质粒载体基因敲除法,构建单核细胞增生李斯特菌LM681ΔInlP、LM681ΔLLO-InlP基因缺失株,通过检测不同时间的OD 600 nm值绘制生长曲线分析LM681、LM681ΔInlP、LM681ΔInlP-ΔLLO三株菌的体外生长能力;以感染复数MOI值为10感染细胞,测定LM681、LM681ΔInlP、LM681ΔInlP-ΔLLO对人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/SV40)、人绒毛膜癌细胞(JEG-3)黏附侵袭能力;动物水平上测定小鼠半数致死量、感染后的脑、肝、脾载菌量。结果成功获得片段大小为1125 bp的缺失株LM681ΔInlP、LM681ΔInlP-ΔLLO(亲本株LM681为2292 bp);生长曲线结果显示,各菌OD 600值无统计学差异;3株菌体外感染HTR-8/SV40细胞、JEG-3细胞黏附侵袭试验结果显示,LM681ΔInlP、LM681ΔInlP-ΔLLO较LM681对HTR-8/SV40细胞、JEG-3细胞黏附侵袭率均极显著降低(HTR-8/SV40细胞F LM681ΔInlP-LM681=102.792、F_(LM681ΔInlP-ΔLLO-LM681)=128.459,均P<0.01,JEG-3细胞F LM681ΔInlP-LM681=203.755、F_(LM681ΔInlP-ΔLLO-LM681)=81.279,均P<0.01);LM681亲本株的LD_(50)为10^(6.78),LM681ΔInlP缺失株的LD_(50)为107.45,在攻毒剂量范围LM681ΔInlP-ΔLLO不存在LD_(50),LM681ΔInlP-ΔLLO较LM681的LD_(50)提高了6.78个对数数量级,LM681ΔInlP-ΔLLO组织载菌量整体较亲本株LM681降低。结论LLO、InlP基因缺失在动物感染水平和体外培养细胞感染水平上均极大程度的降低了LM的的毒力,且InlP基因对LM681菌株黏附侵袭滋养层细胞具有一定意义,为研究InlP在单核细胞增生李斯特菌致病中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 内化素P 溶血素O 生物学特性
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医疗器械职业化专业化检查员培训体系分析及建设研究
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作者 刘清峰 曾冬冬 +2 位作者 巫舒 李萍 杨晶 《中国食品药品监管》 2023年第9期138-145,共8页
医疗器械职业化专业化检查员队伍能力的提升,事关医疗器械监管事业健康发展。目前,我国医疗器械检查员的培训体系已不能满足医疗器械行业蓬勃发展的要求。本文围绕我国职业化专业化医疗器械检查员培训体系展开研究,介绍了发达国家或地... 医疗器械职业化专业化检查员队伍能力的提升,事关医疗器械监管事业健康发展。目前,我国医疗器械检查员的培训体系已不能满足医疗器械行业蓬勃发展的要求。本文围绕我国职业化专业化医疗器械检查员培训体系展开研究,介绍了发达国家或地区医疗器械检查员制度及检查员培训经验,分析了我国医疗器械检查员制度的进展及培训存在的问题、岗位胜任能力,并在此基础上构建我国医疗器械检查员培训体系,以期为完善我国职业化专业化医疗器械检查员队伍建设提供参考借鉴。 展开更多
关键词 医疗器械 职业化专业化 检查员 培训体系建设
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单增李斯特菌Lm4b_02325基因缺失株的构建及其生物学特性研究 被引量:2
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作者 曾东东 刘彩霞 +6 位作者 寇丽君 秦赫 晋瑞婕 王静 任静静 蒋建军 马勋 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期575-582,共8页
为研究单增李斯特菌(LM)抗转录抑制因子编码基因Lm4b_02325对LM的生物学特性的影响,本研究采用同源重组技术构建Lm4b_02325基因缺失株LM928ΔLm4b_02325和回补株CLM928ΔLm4b_02325并均经PCR和测序鉴定。同时采用PCR鉴定该菌的遗传稳定... 为研究单增李斯特菌(LM)抗转录抑制因子编码基因Lm4b_02325对LM的生物学特性的影响,本研究采用同源重组技术构建Lm4b_02325基因缺失株LM928ΔLm4b_02325和回补株CLM928ΔLm4b_02325并均经PCR和测序鉴定。同时采用PCR鉴定该菌的遗传稳定性。上述结果表明基因缺失株与回补株均正确构建,且缺失株的遗传稳定性较强。根据培养不同时间的OD600nm值绘制缺失株、回补株和亲本株的生长曲线;对小鼠腹腔注射不同浓度(10^(9) cfu/mL~10^(5) cfu/mL)的3株菌,观察感染后小鼠的临床症状,统计死亡率并计算3株菌对小鼠的半数致死量(LD50)。以MOI 10将上述3种菌分别感染人脑微血管内皮细胞(HBMEC),1 h后裂解各菌,10倍倍比稀释,并涂布于BHI固体培养基,37℃培养1 d后经菌落计数,分析各株菌对HBMEC的粘附力;按照上述方法感染各菌后1 h加入庆大霉素以及感染各菌后不同时间加入庆大霉素杀死未粘附的细菌,裂解各细菌,10倍倍比稀释并涂布于BHI固体培养基,通过菌落计数结果分析各菌株对HBMEC的侵袭力及在该细胞内的增殖能力。生长曲线结果显示3株菌的生长趋势基本相似。小鼠的致病性实验结果显示,接种10^(9) cfu/mL~10^(7) cfu/mL 3株菌的小鼠出现被毛凌乱、厌食或神经症状与昏睡等临床症状,死亡率接近100%。而接种10^(6) cfu/mL~10^(5) cfu/mL 3株菌的小鼠临床症状较轻,死亡率较低。经计算LM928ΔLm4b_02325对小鼠的LD50约10^(5).45 cfu/mL,毒力明显高于LM928株及CLM928ΔLm4b_02325株(P<0.05)。粘附、侵袭力及胞内生存能力结果显示,黏附及侵入HBMEC的LM928ΔLm4b_02325菌株数量极显著(P<0.01)或者显著高于LM928(P<0.01)与CLM928ΔLm4b_02325株(P<0.05);胞内存活试验结果显示,感染后各时间点LM928ΔLm4b_02325较其余两种菌在HBMEC内的增殖速度均显著(P<0.05)或者极显著(P<0.01)加快,且前者在HBMEC中的存活数较后两者均显著(P<0.05)或者极显著(P<0.01)升高;采用荧光定量PCR(qPCR)检测黏附侵袭相关毒力基因inlA、inlB、inlC,胞内感染相关毒力基因plcA、plcB、actA、hly、mpl,内毒素调节基因prfA共9种毒力相关基因的转录水平,结果显示,LM928ΔLm4b_02325株hly、mpl、inlC的转录水平显著降低(P<0.05),actA、plcA的转录水平极显著下调(P<0.01)。其余基因转录水平均无显著变化。本研究结果首次表明Lm4b_02325基因缺失增强了LM对小鼠的致病性、对细胞的粘附性、侵袭力及胞内增殖能力,且其毒力基因hly、actA、plcA、mpl、inlA、inlC转录水平显著下调。本研究为Lm4b_02325基因的功能及在LM致病机致中作用的研究奠定基础。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 缺失株 Lm4b_02325基因 胞内生存
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超滑非血管内导管检测标准和方法研究 被引量:1
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作者 黄金华 俞志文 +4 位作者 陈苏仰 曾冬冬 姚天平 林祥德 程静 《医疗卫生装备》 CAS 2022年第7期77-80,共4页
介绍了现有非血管内导管检测标准和医疗器械表面涂层检测标准,指出了现有的医疗器械涂层检测标准不能完全适用于液体灌注多孔滑动表面(以下简称“超滑表面”)。从超滑表面的耐磨性、耐腐蚀性、温度稳定性、生物稳定性和自修复性能等方... 介绍了现有非血管内导管检测标准和医疗器械表面涂层检测标准,指出了现有的医疗器械涂层检测标准不能完全适用于液体灌注多孔滑动表面(以下简称“超滑表面”)。从超滑表面的耐磨性、耐腐蚀性、温度稳定性、生物稳定性和自修复性能等方面阐述了超滑表面耐久性的检测方法,对相关检测标准的制定具有重要意义,可为超滑表面在医疗器械领域应用和发展提供技术支持。 展开更多
关键词 非血管内导管 液体灌注多孔滑动表面 超滑导管 耐久性检测 检测标准
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关于“医学微生物学”线上教学模式改革的探讨 被引量:4
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作者 林祥德 李美霖 +2 位作者 程静 曾冬冬 孙文文 《教育教学论坛》 2022年第24期71-74,共4页
“医学微生物学”是医学专业必修课程,具有很强的理论实践性。在“互联网+教育”及疫情防控背景下,在线教学成为信息化教学体系的重要组成部分。高校混合式教学成为常态。线下理论实践教学存在诸多不足,基于软件的线上教学可缓解线下教... “医学微生物学”是医学专业必修课程,具有很强的理论实践性。在“互联网+教育”及疫情防控背景下,在线教学成为信息化教学体系的重要组成部分。高校混合式教学成为常态。线下理论实践教学存在诸多不足,基于软件的线上教学可缓解线下教学中的问题。为保证线上学习效果,充分挖掘课程信息化教学优势,对线上教学模式进行创新改革成为时代需要。基于“医学微生物学”线上线下教学特点,对比分析各线上教学平台优缺点,设计了线上虚拟仿真平台基础实验和论文综述撰写的教学改革方案,以探索在线实验教学改革。 展开更多
关键词 医学微生物学 线上教学 教学模式改革
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A template consensus method for visual tracking
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作者 ZHOU Tong-xue zeng dong-dong +1 位作者 ZHU Ming Arjan Kuijper 《Optoelectronics Letters》 EI 2019年第1期70-74,共5页
Visual tracking is a challenging problem in computer vision. Recently, correlation filter-based trackers have shown to provide excellent tracking performance. Inspired by a sample consensus approach proposed for foreg... Visual tracking is a challenging problem in computer vision. Recently, correlation filter-based trackers have shown to provide excellent tracking performance. Inspired by a sample consensus approach proposed for foreground detection, which classifies a given pixel as foreground or background based on its similarity to recently observed samples, we present a template consensus tracker based on the kernelized correlation filter (KCF). Instead of keeping only one target appearance model in the KCF, we make a feature pool to keep several target appearance models in our method and predict the new target position by searching for the location of the maximal value of the response maps. Both quantitative and qualitative evaluations are performed on the CVPR2013 tracking benchmark dataset. The results show that our proposed method improves the original KCF tracker by 8.17% in the success plot and 8.11% in the precision plot. 展开更多
关键词 METHOD TRACKING challenging
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