经皮肾镜气压弹道碎石取石术联合输尿管支架引流术在上尿路结石伴重度肾积水中的应用研究

目的:探析经皮肾镜辅助下气压弹道碎石取石术(PL)联合输尿管支架引流术在上尿路结石(UUTC)伴重度肾积水中的应用效果。方法:纳入本院泌尿外科2019年1月至2023年1月收治的84例UUTC伴重度肾积水患者,以随机数字表法分为对照组和观察组,每组42例。对照组给予钬激光碎石术联合输尿管支架引流术,观察组给予肾镜辅助下PL联合输尿管支架引流术。对比两组手术参数、术前术后肾脏相关因子[(尿内皮素-1(ET-1)、水通道蛋白-1(AQP-1)、血清内皮细胞特异性分子-1(ESM-1))]、一期取石成功率及并发症发生率。结果:两组住院时间对比无差异(P>0.05),观察组手术时间长于对照组,但碎石取石时间、术中出血量、术后血尿持续时间明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者术前ET-1、AQP-1、ESM-1水平对比差异无统计学意义(P>0.05),而术后两组患者上述因子均明显降低,且观察组相比对照组ET-1[(15.44±2.26)vs.(18.31±2.58)ng/L]、AQP-1[(29.35±3.67)vs.(31.48±3.74)ng/L]、ESM-1[(0.77±0.14)vs.(1.15±0.16)ng/ml]水平均低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组一期取石成功率(88.10%vs.90.48%)差异无统计学意义(P>0.05),观察组并发症总发生率(4.76%)明显低于对照组(21.43%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肾镜辅助下PL联合输尿管支架引流术在UUTC伴重度肾积水患者中临床效果显著,值得推广。

羟考酮在腹腔镜胆囊切除术麻醉中的效果及安全性

目的探讨羟考酮用于腹腔镜胆囊切除术麻醉中的安全性和有效性。方法选择行腹腔镜胆囊切除术的患者80例,随机分为对照组和观察组,每组各40例。对照组麻醉诱导时静脉注射舒芬太尼0.2μg/kg、丙泊酚2mg/kg与顺式阿曲库铵0.15mg/kg,观察组麻醉诱导时静脉注射羟考酮0.2mg/kg、丙泊酚2 mg/kg与顺式阿曲库铵0.15mg/kg。术中麻醉维持均采用丙泊酚联合瑞芬太尼靶控输注。记录两组患者术中瑞芬太尼和丙泊酚用量及麻醉时间、苏醒时间、拔管时间,记录拔管后1、4、8、12小时的VAS评分及不良反应发生情况。于麻醉前、术后1、4、8小时测定血清中血糖和皮质醇水平。结果两组患者术中瑞芬太尼和丙泊酚用量及麻醉时间、苏醒时间、拔管时间差异无统计学意义(P>0.05);观察组术后1、4小时的VAS评分、血糖和皮质醇水平明显低于对照组(P<0.05);两组出现苏醒期躁动、恶心呕吐、头晕、呼吸抑制发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论羟考酮能安全有效的用于腹腔镜胆囊切除手术麻醉,且不良反应少,可在临床推广应用。

去泛素化酶PSMD7对膀胱癌增殖和迁移的影响

目的:探讨去泛素化酶PSMD7的表达对膀胱癌增殖与迁移的影响。方法:通过Timer数据库分析PSMD7在膀胱癌中的差异表达。在膀胱癌细胞株(UMUC3和T24)中使用成簇的规律间隔短回文重复序列(CRISPR)/Cas9技术导入短发夹RNA(shRNA)敲低PSMD7。设置组别为对照组和稳定敲低PSMD7实验组UMUC3(UM-sh-1组和UM-sh-2组)和T24(T24-sh-1组和T24-sh-2组)。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、平板克隆形成实验、Transwell实验观察PSMD7对膀胱癌增殖与迁移的影响。通过免疫荧光实验检测细胞增殖标志物5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EDU)验证敲低PSMD7抑制膀胱癌细胞的增殖。应用独立样本t检验进行组间比较。结果:Timer数据库发现PSMD7在多种癌症中高表达(P<0.05),其中包括膀胱癌,肿瘤组织中PSMD7的表达高于正常组织,差异有统计学意义[8.3(7.5~9.1)比3.1(2.2~4.1),P<0.05]。CCK-8结果显示,敲低PSMD7后细胞增殖能力明显低于对照组[UMUC3细胞株中对照组吸光度值明显高于敲低组(1.724±0.057比0.879±0.040,t=20.83,P<0.05)和(1.724±0.057比0.935±0.065,t=15.62,P<0.05);T24细胞株中对照组吸光度值明显高于敲低组(2.329±0.084比0.973±0.072,t=21.14,P<0.05)和(2.329±0.084比0.830±0.087,t=21.41,P<0.05)],平板克隆形成实验结果显示,PSMD7敲低后细胞增殖能力明显低于对照组[UMUC3细胞株中对照组集落数明显高于敲低组(716.5±18.5)个比(508.0±21.0)个,t=7.45,P<0.05和(716.5±18.5)个比(396.5±9.5)个,t=15.39,P<0.05;T24细胞株中对照组集落数明显高于敲低组(687.0±33.0)个比(359.5±15.5)个,t=8.983,P<0.05和(687.0±33.0)个比(407.0±18.0)个,t=7.449,P<0.05]。Transwell实验显示,PSMD7敲低后细胞迁移能力显著低于对照组[UMUC3细胞株中对照组迁移数明显高于敲低组(756.0±28.0比198.0±9.5,t=18.86,P<0.05)和(756.0±28.0比146.5±11.5,t=20.14,P<0.05);T24细胞株中对照组迁移数明显高于敲低组[(648.0±18.0)个比(132.0±7.0)个,t=25.79,P<0.05和(648.0±18.0)个比(159.0±13.0)个,t=21.21,P<0.05]。免疫荧光实验显示,对照组EDU明显高于敲低组[UMUC3细胞株中对照组EDU明显高于敲低组(0.873±0.054比0.137±0.026,t=11.16,P<0.05)和(0.873±0.054比0.184±0.054,t=8.19,P<0.05);T24细胞株中对照组EDU明显高于敲低组(0.869±0.025比0.156±0.013,t=25.02,P<0.05)和(0.869±0.025比0.125±0.005,t=28.63,P<0.05)]。结论:PSMD7在膀胱癌中表达上调,PSMD7能促进膀胱癌细胞增殖和迁移。

血小板衍生生长因子A不同转录变体对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨血小板衍生生长因子A(PDGFA)的不同转录变体PDGFA-L和PDGFA-S对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法通过生物信息学方法对肿瘤基因组图谱(TCGA)中的外显子测序数据进行分析,筛选出膀胱癌中PDGFA发生的异常选择性剪接事件。在膀胱癌细胞株(EJ和T24)中分别过表达PDGFA-L和PDGFA-S。设置组别为EJ和T24细胞株对照组和稳定过表达PDGFA实验组的EJ(EJ-PDGFA-L组和EJ-PDGFA-S组)和T24胞株(T24-PDGFA-L组和T24-PDGFA-S组)。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、平板克隆形成实验、Transwell实验观察PDGFA对膀胱癌增殖与迁移的影响。采用独立样本t检验进行组间比较。结果通过生物信息学方法分析各肿瘤中PDGFA基因的外显子测序数据,可见PDGFA在多种癌症中发生异常选择性剪接,其中包括膀胱癌;与正常组织比较,肿瘤组织中PDGFA-L的表达高于PDGFA-S(P<0.05)。CCK-8结果显示,过表达PDGFA组细胞增殖能力明显高于对照组[EJ细胞株中PDGFA-L和PDGFA-S组吸光度值明显高于对照组(1.958±0.081比0.982±0.357,t=12.765,P<0.05)和(1.324±0.476比0.982±0.357,t=17.977,P<0.05);T24细胞株中PDGFA-L和PDGFA-S组吸光度值明显高于对照组(1.619±0.053比0.821±0.029,t=17.61,P<0.05)和(1.219±0.073比0.821±0.029,t=16.32,P<0.05)];集落形成实验结果显示,过表达PDGFA组细胞增殖能力明显高于对照组[EJ细胞株中PDGFA-L和PDGFA-S组集落数明显高于对照组(235.50±10.50比160.10±2.11,t=5.12,P<0.05)和(181.30±6.32比160.10±2.11,t=3.15,P<0.05);T24细胞株中PDGFA-L和PDGFA-S组集落数明显高于对照组(590.0±27.0比351.0±16.0,t=6.713,P<0.05)和(527.0±23.3比351.0±16.0,t=6.907,P<0.05)];Transwell实验结果显示,过表达PDGFA组细胞迁移能力明显高于对照组[EJ细胞株中PDGFA-L和PDGFA-S组迁移数明显高于对照组(635.0±15.0比125.0±7.5,t=17.32,P<0.05)和(611.0±19.0比125.0±7.5,t=18.55,P<0.05);T24细胞株中PDGFA-L和PDGFA-S组迁移数明显高于对照组(733±13比117±9,t=21.18,P<0.05)和(607±12比117±9,t=22.37,P<0.05)]。结论PDGFA能够促进膀胱癌细胞的增殖和侵袭,且全长转录本PDGFA-L有更强的促癌作用。

新型改良旁置输尿管导管在输尿管镜钬激光碎石术中的应用研究

目的 探讨新型改良旁置输尿管导管在输尿管镜钬激光碎石术治疗输尿管中下段大结石的临床应用价值.方法 回顾性分析2014年1月-2017年1月荆州市中心医院收治的86例单侧输尿管中下段大结石患者的临床资料,按照随机数字表法分为两组：改良碎石组（43例术中镜体内留置输尿管导管,旁置于结石下方,通过导管注水行钬激光碎石）和直接碎石组（43例直接连接灌注泵注0.9％氯化钠溶液,行钬激光碎石）,两组患者均行输尿管镜钬激光碎石术.比较两组患者的平均手术时间、结石清除率、输尿管穿孔、中转开放,以及术后尿脓毒血症、肾周血肿、输尿管狭窄等并发症的情况.计量资料以均数±标准差（（x）±s）表示,组间比较采用t检验.结果 改良碎石组患者全部碎石成功,无输尿管穿孑孔、断裂、碎石通道丢失、中转开放及术后肾周血肿、尿脓毒血症等并发症发生.直接碎石组患者输尿管穿孔5例,通道丢失4例,中转开放6例,术后肾周血肿2例,尿脓毒血症1例.两组患者平均手术时间分别为（39.5±7.2）、（47.2±11.6） min（t=-4.975,P=0.001）,结石清除率分别为100.0％、91.1％.两组患者平均门诊随访1年,改良碎石组患者输尿管轻度狭窄3例,均未再次手术;直接碎石组患者术后输尿管轻度狭窄5例,严重狭窄2例再次手术.结论 输尿管镜钬激光碎石术治疗输尿管中下段大结石时,采用新型改良旁置输尿管导管方式注0.9％氯化钠溶液,安全有效,能缩短总手术时间,减少并发症的发生,有较高的临床推广价值.

胚胎干细胞关键因子NANOG对膀胱癌细胞侵袭能力的影响

目的检测T24膀胱癌细胞的NANOG基因被沉默后影响T24细胞的侵袭能力。方法以人膀胱癌细胞株T24细胞为靶细胞,转染短发卡RNA(shRNA)沉默T24细胞的NANOG基因。通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP)-1表达的变化,通过划痕实验和侵袭实验检测T24细胞侵袭力的变化。结果当NANOG基因被沉默后,RT-qPCR检测T24细胞中MMP-2、MMP-9的mRNA表达下调(MMP-2下调63.21%,P<0.05;MMP-9下调73.55%,P<0.05),ELISA结果显示T24细胞上清中MMP-9的蛋白水平表达下调(21.07%,P<0.05)。划痕实验和侵袭实验表明在NANOG基因被沉默后,细胞的侵袭能力下降(均P<0.05)。结论NANOG基因可能通过调节膀胱癌细胞MMP-2及MMP-9的表达来介导膀胱癌细胞向周围组织的侵袭。

Duckett术联合阴囊纵隔皮管成形术在重度小儿尿道下裂中的临床应用

目的:研究Duckett术联合阴囊纵隔皮管成形术治疗重度尿道下裂的疗效。方法:回顾性分析2016年1月-2022年1月在长江大学附属荆州医院接受首次尿道成形术的重度尿道下裂(阴囊型和会阴型尿道下裂)27例患儿的临床资料。所有患儿平均年龄(5.3±2.3)岁;其中阴囊型23例,会阴型4例;合并显著阴茎下曲22例;阴茎伸直后尿道缺损平均长度(6.2±0.9)cm。结果:所有患儿平均手术时间为(99.2±8.2)min;一次性成功达22例(81.4%),其中23例阴囊型一次性成功有20例,4例会阴型一次性成功有2例;有5例术后1个月内发生尿瘘,半年后再次手术治愈。结论:Duckett术联合阴囊纵隔皮管成形术对于重度尿道下裂患儿治疗效果良好,无需分期手术,同时尿瘘和尿道狭窄并发症较低,外观令人满意。

SCL/TAL1中断基因座对膀胱癌增殖和迁移的影响及其作用机制

目的:探讨SCL/TAL1中断基因座(STIL)的表达对膀胱癌增殖和迁移的影响及其作用机制。方法:在Timer和UALCAN数据库中分析STIL在膀胱癌中的差异表达和分期。在T24细胞系中使用CRISPR/Cas9技术导入单链向导RNA(sgRNA)敲除STIL。设置组别为T24细胞株对照组和稳定敲除STIL实验组的T24细胞株(6#、30#)。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、平板克隆形成实验、Transwell实验和软琼脂克隆实验观察STIL对膀胱癌的增殖和迁移的影响。通过免疫荧光实验检测细胞增殖标志物细胞核增殖抗原(Ki-67)和5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EDU)验证敲除STIL抑制膀胱癌细胞的增殖。转录组测序技术(RNA-seq)和基因富集分析(GSEA)寻找STIL的相关信号通路。通过蛋白质印迹法(Western blot)实验观察STIL对实验观察STIL对细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、细胞周期蛋白(Cyclin)B1的影响。组间比较采用独立样本t检验。结果:生信数据库发现STIL在多种癌症中高表达,其中包括膀胱癌,肿瘤组织组中STIL的表达高于正常组织组[4.411(2.322~7.133)比0.659(0.312~0.892),P<0.05]。STIL的表达与膀胱癌的分期显著相关。在敲除STIL后,CCK-8实验[对照组光密度明显高于敲除组(2.76±0.17比1.11±0.11),t=19.865,P<0.05和(2.76±0.17比1.30±0.17,t=14.720,P<0.05]、平板克隆形成实验结果显示,对照组集落数明显高于敲除组[(77.67±9.50)比(18.67±4.04),t=9.895,P<0.05]和[(77.67±9.50)比(20.67±3.79),t=9.650,P<0.05]、Transwell实验结果显示,对照组迁移细胞数明显高于敲除组[(171.00±13.53)比(56.33±13.5),t=10.391,P<0.05]和[(171.00±13.53)比(23.33±9.29),t=15.585,P<0.05],软琼脂克隆实验结果显示,对照组细胞数明显高于敲除组[(168.67±11.02)比(48.33±5.03),t=17.210,P<0.05]和[(168.67±11.02)比(23.33±5.69),t=20.307,P<0.05]。免疫荧光实验示,对照组Ki-67明显高于敲除组[(0.273±0.014)比(0.088±0.012),t=16.870,P<0.05]和[(0.273±0.014)比(0.022±0.007),t=27.505,P<0.05],对照组EDU明显高于敲除组[(0.379±0.026)比(0.054±0.01),t=20.248,P<0.05]和[(0.379±0.026)比(0.042±0.007),t=21.802,P<0.05]。RNA-seq和GSEA显示STIL与ERK通路显著相关(P<0.05)。Western blot实验显示,p-ERK、CDK1、Cyclin B1下降。结论:STIL在膀胱癌中表达上调,敲除STIL能抑制膀胱癌细胞增殖和迁移,ERK、CDK1、Cyclin B1等细胞周期相关基因可能是其作用机制之一。

细胞分裂周期相关蛋白2在恶性肿瘤中的研究进展

细胞分裂周期相关(CDCA)基因家族是细胞增殖过程中重要的调节因子,其中细胞分裂周期相关蛋白2(CDCA2)是蛋白磷酸酶1γ(PP1γ)的靶向亚单位,参与有丝分裂中染色质重塑、细胞周期中的DNA损伤反应以及核包膜的形成。CDCA2在多种癌症中表达上调,并与恶性肿瘤的侵袭、转移及凋亡密切相关。本文主要就近年来CDCA2基因在恶性肿瘤中的作用及机制做简要综述。

Colorimetric Detection of Glucose Using WO_(3) Nanosheets as Peroxidase-mimetic Enzyme

In the present work,WO_(3) nanosheets(WO_(3) NSs)were prepared by a facile method at room temperature.The obtained WO_(3) NSs showed peroxidase-like activity,which could catalyze 3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine(TMB)to form a blue oxidation product(ox TMB)in the presence of H_(2)O_(2).Based on this,convenient and sensitive colorimetric methods for the detection of H_(2)O_(2) and glucose were established.The linear ranges for detecting H_(2)O_(2) and glucose were 1–200µmol/L and 1–100µmol/L,respectively.The limits of the detection of H_(2)O_(2) and glucose were as low as 0.79 and 0.96µmol/L,respectively.This method was also successfully applied to the detection of glucose in urine samples.The detection result was consistent with that of the value detected by the clinical method,indicating the potential in clinical diagnosis and biomedical detection.