经皮给药系统皮肤模型的研究进展

经皮给药系统(transdermal drug delivery system,TDDS)的皮肤模型是指构建能够模拟人体皮肤结构和功能,并用于研究和评估药物在经皮给药过程中的吸收、渗透及药效等方面的实验模型。该模型可代替传统人体皮肤实验,减少药物开发过程中对人体皮肤的使用,为经皮制剂的研发提供一种便捷、可控且经济高效的方法。针对经皮给药系统的皮肤模型,本文从药物经皮吸收途径出发,对目前常用的动物皮肤模型、人工皮肤模型、重组人体皮肤模型进行介绍,并对其优缺点及应用进行了分析,为经皮制剂的研发提供参考。

黄腰胡蜂油脂的抗炎抗氧化活性测试及GC-MS分析

研究首先从黄腰胡蜂中提取油脂,并根据极性差异将其划分为3个部位。随后采用DPPH法对其抗氧化活性进行测试,同时采用LPS诱导的小鼠巨噬细胞炎症模型对其体外抗炎活性进行测试。为进一步阐明黄腰胡蜂油脂发挥活性的物质基础,采用GC-MS技术对其油脂的化学成分进行系统分析。结果表明:黄腰胡蜂油脂的抗氧化和抗炎活性成分主要集中在大极性部位;从化学成分来看黄腰胡蜂油脂中富含不饱和脂肪酸,是优质的营养成分。大极性部位在化学成分上含有区别性成分丁香酚和亚麻酸,二者是黄腰胡蜂油脂具有抗氧化和抗炎活性的关键成分。研究不仅丰富了对黄腰胡蜂油脂化学成分和生物活性的认识,还为其进一步现代化开发奠定基础。

美洲大蠊提取物PAS840的乙酰胆碱酯酶活性抑制作用及抗氧化能力观察

目的探讨美洲大蠊提取物PAS840的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性和抗氧化活性。方法根据预实验确定最佳酶促反应条件得到的数据,AChE浓度为0.425U/mL、底物碘化硫代乙酰胆碱(ATCI)浓度为15mmol/L、反应时间为20min,采用改良的Ellman法进行酶促反应,检测不同浓度(7.8125、15.625、31.25、62.5、125、250μg/mL)PAS840对AChE催化ATCI分解的抑制率,计算其半数抑制浓度(IC_(50)),采用米氏方程相关的酶动力学实验测定PAS840对AChE的抑制类型。取不同浓度的PAS840溶液或维生素C(VC),采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法检测其对DPPH自由基的清除率,采用总还原能力测定法检测其对铁氰化钾的还原率,采用水杨酸法检测其对羟自由基的清除率,并计算相关的IC_(50)。结果PAS840对AChE催化反应进程具有抑制作用,且随着PAS840作用浓度增加和时间延长,其抑制作用更为明显;随着PAS840作用浓度增加,AChE抑制率先逐渐升高再趋于平缓。PAS840抑制AChE催化ATCI分解的IC_(50)为22.30μg/mL,其抑制类型是混合性抑制。随着浓度的增加,PAS840、Vc对DPPH自由基的清除率均呈先升高后平稳的趋势;500μg/mLPAS840对DPPH自由基的清除率为93.95%,同等浓度Vc的清除率为97.31%;PAS840清除DPPH自由基的IC_(50)为43.21μg/mL。随着浓度的增加,PAS840对铁氰化钾的还原率呈先升高后平稳的趋势,Vc对铁氰化钾的还原率呈比较高的平稳趋势;3.0mg/mLPAS840对铁氰化钾的还原率为93.95%,同等浓度Vc的还原率为82.2%;PAS840还原铁氰化钾的IC_(50)为0.498mg/mL。随着浓度的增加,PAS840对羟自由基的清除率呈比较中等的平稳趋势,Vc对羟自由基的清除率呈逐渐升高趋势;1.8mg/mLPAS840对羟自由基的清除率为45.72%,其后逐渐趋于平缓,同等浓度Vc的清除率为74.06%;3.0mg/mLPAS840对羟自由基的清除率为47.83%,同等浓度Vc的清除率为89.73%;PAS840清除羟自由基的IC_(50)为3.65mg/mL。结论PAS840具有较强的AChE活性抑制作用和抗氧化能力。

基于Tau蛋白磷酸化探讨中医药干预阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)是一种以进行性认知功能障碍和记忆减退为主要特征的神经退行性疾病,Tau蛋白过度磷酸化是该病的主要发病机制之一。Tau蛋白是主要分布于中枢神经系统神经元轴突的微管相关蛋白,其过度磷酸化则丧失与微管结合的能力,造成微管解聚、轴突转运障碍,形成Tau聚集体,进而引起神经细胞的凋亡,导致AD的发生。研究表明中医药可以通过多通路、多靶点调控Tau蛋白磷酸化来干预AD。主要以Tau蛋白磷酸化为切入点,对干预AD中医药的种类和作用机制进行总结,以期为中医药防治AD的研究提供参考。

甲基对苯醌的理化性质及类药性预测研究

目的:测定甲基对苯醌的平衡溶解度以及油水分配系数,并分析其对不同肿瘤细胞的细胞毒活性。方法:采用摇瓶法-HPLC法测定甲基对苯醌在不同pH溶液中的平衡溶解度和油水分配系数。色谱条件:采用Ecosil-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(70:30),流速1.0 mL/min,检测波长250 nm,柱温30℃,进样量10μL。利用SwissADME和pkCSM预测药物的类药性,采用MTT法分析甲基对苯醌对HT29、CT26、Caco-2、Hela、HepG25株细胞的细胞毒活性。结果:甲基对苯醌在pH为1.2、2.0、5.0、6.7、7.0、7.4的溶液中,12 h的平衡溶解度分别为7.65、8.05、9.31、8.43、9.33、7.93 mg/mL,油水分配系数分别为0.78、0.80、0.83、0.82、0.77、0.82,SwissADME预测的溶解度和油水分配系数均与实验结果一致。同时预测结果发现,甲基对苯醌具有较好的类药性以及较弱的血脑屏障透过性。甲基对苯醌对5株细胞的IC50依次为7.98、3.21、8.96、7.96、6.31μmol/L。结论:测定甲基对苯醌平衡溶解度和油水分配系数的摇瓶法-HPLC法简单可行,且在pH 5.0~7.0的溶液条件下能够适当增强甲基对苯醌的溶解度,同时药物的ADME/T在线预测软件具有一定的可靠性,甲基对苯醌对HT29、CT26等多株细胞具有显著的抑制作用。

美洲大蠊提取物CⅡ-3调控p16^(INK4a)诱导SKOV3细胞衰老

目的探讨美洲大蠊提取物CⅡ-3调控p16^(INK4a)蛋白诱导卵巢癌细胞SKOV3衰老的作用。方法通过CCK-8法测定不同浓度和时间美洲大蠊提取物CⅡ-3对SKOV3细胞增殖的作用;运用细胞集落形成实验测定美洲大蠊提取物CⅡ-3对SKOV3细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测CⅡ-3作用后SKOV3细胞周期的变化;衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测CⅡ-3作用后SKOV3细胞衰老变化;Western Blotting检测CⅡ-3作用后SKOV3细胞衰老调控分子p16^(INK4a)蛋白表达的变化。结果美洲大蠊提取物CⅡ-3可有效抑制SKOV3细胞增殖,最佳作用浓度为80μg/mL,作用时间为48 h;CⅡ-3作用后,SKOV3细胞集落形成能力下降;阻滞于G_(0)/G_(1)期细胞比例增高,S期细胞比例减少;SA-β-Gal阳性细胞百分比增加;衰老调控分子p16^(INK4a)蛋白表达上调。结论美洲大蠊提取物CⅡ-3通过调控衰老调控分子p16^(INK4a)蛋白表达诱导SKOV3细胞衰老。

不同养殖厂美洲大蠊提取物的化学成分分析及多成分含量测定

目的:探究美洲大蠊提取物PA的化学成分类型及含量。方法:采用显色鉴别法鉴定美洲大蠊提取物PA中的成分类型;采用紫外分光光度法测定美洲大蠊提取物PA中多肽、氨基酸、多糖、生物碱及酚类的含量,HPLC测定美洲大蠊提取物PA中尿嘧啶、肌苷、原儿茶酸的含量。结果:所建立各成分含量测定的方法具有良好的重复性和稳定性,20批次美洲大蠊提取物PA主要成分为多肽、氨基酸、多糖、生物碱和酚类,以及尿嘧啶、肌苷和原儿茶酸等成分,不同批次的美洲大蠊提取物PA主成分差异不明显。因采收时间和养殖条件的不同,不同厂家不同批次美洲大蠊提取物PA的成分含量存在一定差异。结论:通过分析美洲大蠊提取物PA的化学成分及含量,为后续药效物质的筛选及全面有效评价美洲大蠊药材的质量提供依据。

肠道菌群失调与自闭症谱系障碍的相关性研究进展

自闭症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)是一种神经发育障碍性疾病,因其发病率持续上升,引起了全球的关注。研究发现,肠道菌群(gut microbiota)与ASD之间有一定的关联性,体内动态平衡的肠道菌群可以保证人体正常的生命活动,但当其失去稳态时可能会通过改变神经递质、代谢物、免疫系统、HPA轴和肠道通透性等影响ASD的发生发展。益生菌、益生元以及粪菌移植等肠道菌群干预对于治疗ASD有一定效果。中医药也可通过干预肠道菌群达到一定的治疗ASD的目的。本文旨在通过总结肠道菌群紊乱影响ASD的机制,为ASD的研究和治疗提供参考。

肠道菌群与2型糖尿病及中医药干预研究进展

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)是临床上常见的代谢性疾病,发病机制复杂,随着患病率的逐年增加,引发了全球的广泛关注。研究表明肠道菌群紊乱与T2DM的发生发展之间存在一定关联性,肠道菌群代谢物、肠屏障改变和生物钟紊乱等均会影响T2DM的发生发展。研究证实中医药可以通过调节肠道菌群紊乱,达到一定的降低血糖的效果。对肠道菌群参与2型糖尿病的作用机制以及中医药通过调节肠道菌群治疗T2DM的研究进行总结,为以肠道菌群为切入点防治T2DM提供新的契机。

美洲大蠊提取物CⅡ-3调控p53蛋白抑制K562细胞增殖

目的:探讨美洲大蠊提取物CⅡ-3对人白血病细胞K562增殖的影响。方法:以不同浓度的美洲大蠊提取物CⅡ-3作用于K562细胞,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,集落形成实验检测其对细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测K562细胞的细胞周期,蛋白质印迹法检测细胞中磷酸化p53蛋白的表达。结果:美洲大蠊提取物CⅡ-3可抑制K562细胞增殖,其最佳作用浓度为80μg/mL,作用时间72 h;CⅡ-3能降低K562细胞集落形成率;使阻滞在G0/G1期的K562细胞比例增高,S期的细胞比例减少;促进磷酸化p53蛋白表达上调。结论:CⅡ-3通过调控p53蛋白抑制K562细胞增殖。

人参皂苷Rg1联合阿霉素对K562/ADR细胞增殖及耐药的影响

目的探究人参皂苷Rg1对人慢性髓细胞白血病耐阿霉素(adriamycin,ADR)细胞K562/ADR增殖的影响及其对K562/ADR细胞的耐药逆转作用。方法CCK-8法检测不同浓度的人参皂苷Rg1对K562/ADR细胞增殖的影响;CCK-8法检测人参皂苷Rg1与ADR联用对K562/ADR细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度(IC 50)和逆转倍数;集落形成实验检测人参皂苷Rg1联合ADR对K562/ADR细胞集落形成能力的影响;流式细胞术检测人参皂苷Rg1联合ADR对K562/ADR细胞周期的影响。结果与对照组相比,各浓度和作用时间的人参皂苷Rg1均可抑制K562/ADR细胞增殖(P<0.001),当人参皂苷Rg1浓度为120μg/mL,作用时间为48 h时,细胞增殖抑制率最高(P<0.05);与单用ADR相比,人参皂苷Rg1联合ADR作用48 h后,K562/ADR细胞IC 50值明显下降(P<0.05),人参皂苷Rg1对K562/ADR细胞的耐药逆转倍数为2.34;与对照组和ADR或人参皂苷Rg1单药作用相比,人参皂苷Rg1联合ADR作用能明显抑制K562/ADR细胞集落形成(P<0.05);与ADR或人参皂苷Rg1单药作用相比,人参皂苷Rg1联合ADR作用可以将细胞周期阻滞在G_(0)/G_(1)期。结论人参皂苷Rg1联合ADR能明显抑制K562/ADR细胞增殖并逆转K562/ADR细胞对ADR的耐药性,这可能与细胞周期阻滞于G_(0)/G_(1)期有关。

醋酸诱导犬急性溃疡性结肠炎模型的建立

试验旨在探索醋酸诱导犬急性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的方法,建立稳定的犬急性UC模型。选取16只健康犬,随机分成对照组和3个不同浓度醋酸组,每组4只。注射犬眠宝麻醉后,醋酸组分别灌注4%、7%和10%的2mL/kg醋酸,对照组无需麻醉,直肠灌注相应剂量无菌生理盐水;用药后第1、3、7天观察各组排便情况,并用电子内窥镜观察试验犬结肠黏膜的损伤程度;于第7天牺牲试验犬,切取病变结肠做组织切片检查。结果显示,灌注4%醋酸的犬均出现短暂的稀便,病理切片观察只有轻微炎性细胞浸润;灌注10%醋酸的犬,炎症反应过于强烈导致肠穿孔和死亡;灌注7%醋酸的犬,粪便性状及结肠内窥镜检查均显示明显的结肠炎症状,3d后出现溃疡灶,7d后可见溃疡灶脱落,组织学检查发现溃疡灶周围有明显的炎性细胞浸润,随着时间的推移炎性细胞浸润明显减少,成纤维细胞增生。以上结果表明,直肠灌注7%醋酸能成功稳定诱导犬急性UC。

中医药治疗围绝经期综合征的研究进展

围绝经期综合征严重影响女性的身心健康和生活质量,许多实验及临床研究提示中医药具有改善围绝经期综合征的作用。综述了近年来中医药治疗围绝经期综合征的研究进展,包括中药和中医"辨证论治"、针灸、刮痧等传统中医药方法,为其研究提供参考。

代谢组学在中医药抗抑郁研究中的应用进展

抑郁是一种常见的情绪障碍类精神疾病,以心境低落为核心症状,具有高复发率、高致残率、高发病率等特点。近年来许多学者以代谢组学为研究平台,探讨中医药在抗抑郁中的作用。本研究通过检索PubMed、中国知网(CNKI)数据库中近年来基于代谢组学研究中医药抗抑郁的相关文献,总结了抗抑郁中药药效生物标记物29种(抑郁生物标记物)及其作用机制、药效评价等相关进展,以期为中医药抗抑郁的研究提供借鉴。

卵巢摘除诱导围绝经期综合征动物模型的研究进展

围绝经期综合征是由雌激素和孕酮等类固醇激素水平下降引起的一系列症状,严重影响女性的身心健康和生活质量,选择适当的动物模型研究该疾病显得尤为重要。卵巢摘除动物模型常用于围绝经期综合征的研究,包括骨质疏松、记忆下降和认知障碍、焦虑、抑郁、肥胖等。本文通过检索PubMed、中国知网(CNKI)数据库中卵巢摘除动物模型应用于围绝经期综合征的相关文献,对该动物模型应用于围绝经期综合征的研究进展进行了综述。

负载活性组分的核壳结构纤维膜的制备及性能

采用同轴静电纺丝技术制备了用于伤口修复的核壳结构纳米纤维膜,将蛛丝蛋白(Ss)和美洲大蠊提取物(PAE)分别负载于纳米纤维的壳层与核层。采用SEM和TEM对纳米纤维膜的形貌进行了表征,结果显示,纤维具有明显的核壳结构,且随着Ss含量的增加,纤维直径从350 nm降至280 nm,核层直径由120 nm升至140 nm,壳层厚度由115 nm降至70 nm;FTIR结果证明Ss已成功负载到纤维膜中。纤维膜的物理性能测定实验表明,制备的纳米纤维膜拉伸强度可达4.3 MPa,溶胀率可达150%,水蒸气透过率可达1834 g/(m^(2)·24 h),水接触角减小到32.7°。药物释放实验结果显示,7 d内药物释放可达77%;考察了纳米纤维膜的生物相容性,相较于未负载Ss的纳米纤维膜,Ss含量为20%的纤维膜的细胞增殖率提高了25%。

肠道菌群代谢物——短链脂肪酸的研究进展

肠道菌群代谢物——短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)具有较为丰富的生物学作用,可参与机体的免疫调节,促进免疫细胞分化成熟;维持菌群平衡,抑制有害菌生长繁殖,促进有益菌生长;促进肠道消化吸收,加快胃肠道蠕动;调节机体糖脂代谢。本文通过总结SCFAs代谢过程、生物学功能,探究其对机体健康的影响,为SCFAs研究提供理论依据。

美洲大蠊有效成分的提取及药理活性研究进展

美洲大蠊(Periplaneta americana)俗称蟑螂,原产于南美洲,是世界性卫生害虫,但其体内含有多种生物活性成分,药理作用发展日益造福人类健康。美洲大蠊最早应用于《神农本草经》,具有显著的组织修复、抗肿瘤、增强免疫及保护肝功能等作用。美洲大蠊提取物的提取方法多样,但提取到的活性成分尚不完全清楚,其发挥作用的分子机制更是有待研究。根据美洲大蠊提取物不同溶剂类型及其化学活性成分对相关研究进行系统综述,为进一步研究美洲大蠊活性成分的作用机制提供理论基础。

美洲大蠊提取物Ento-A对湿热型溃疡性结肠炎模型大鼠的改善作用研究

目的:研究美洲大蠊提取物Ento-A对湿热型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠的改善作用。方法:将70只大鼠随机分为正常对照组(n=8)和造模组(n=62),造模组大鼠采用高糖高脂、辛辣饮食联合2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠法复制湿热型UC动物模型。将造模成功的48只大鼠随机分为模型对照组、美沙拉嗪组(300 mg/kg)、肠炎宁(300 mg/kg)和Ento-A低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg,以提取物计),每组8只。正常对照组和模型对照组大鼠灌胃生理盐水,其余各组大鼠灌胃相应药物,每天1次,连续给药14 d。末次给药后,对大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤指数(CMDI)及病理组织学(HS)进行评分,测定大鼠脾指数、肝指数和结肠指数,并采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清中白细胞介素8(IL-8)、IL-17、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平和结肠组织中IL-2、前列腺素E2(PGE2)、髓过氧化物酶(MPO)水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠DAI评分、CMDI评分、HS评分、结肠指数以及血清中IL-8、IL-17、MDA水平和结肠组织中MPO、PGE2水平显著升高(P<0.01),血清中SOD水平和结肠组织中IL-2水平显著降低(P<0.01)。与模型对照组比较,Ento-A高剂量组大鼠DAI评分、CMDI评分及血清中IL-17、MDA水平和结肠组织中PGE2水平显著降低(P<0.05或P<0.01),血清中SOD水平和结肠组织中IL-2水平显著升高(P<0.01);Ento-A中剂量组大鼠CMDI评分、HS评分以及血清中IL-8、IL-17、MDA水平和结肠组织中PGE2、MPO水平显著降低(P<0.05或P<0.01),结肠组织中IL-2水平显著升高(P<0.01);Ento-A低剂量组大鼠HS评分以及血清中IL-17、MDA水平和结肠组织中MPO、PGE2水平显著降低(P<0.05或P<0.01),血清中IL-2水平显著升高(P<0.01)。结论:美洲大蠊提取物Ento-A可能通过调节免疫系统平衡、减少炎症损伤,发挥其对湿热型UC模型大鼠的改善作用。

美洲大蠊提取物CⅡ-3的抗肝癌谱效关系研究

目的:研究美洲大蠊提取物CⅡ-3与其体外抗肝癌活性的谱效关系,并初步明确其抗肝癌活性成分。方法:在已建立10批CⅡ-3样品的超高效液相色谱(UHPLC)指纹图谱的基础上,借助超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用法(UHPLC-QTOF/MS),通过标准品和相关文献定性鉴定各色谱峰对应的化合物;以各批CⅡ-3样品对人肝癌细胞HepG2的半数抑制浓度(IC50)为抗肝癌活性指标,采用灰色关联度分析法(GRA)与正交偏最小二乘法(OPLS)建立并分析指纹图谱与抗肝癌活性之间的谱效关系。结果:10批CⅡ-3样品的UHPLC指纹谱图中有共有峰25个,指认出其中10个,分别为环(酪氨酸-脯氨酸)(峰24)、环(甘氨酸-苯丙氨酸)(峰15)、次黄嘌呤(峰3)、腺嘌呤(峰7)、苯丙氨酸(峰10)、肌苷(峰11)、N-乙酰多巴胺(峰16)、环(脯氨酸-丙氨酸)(峰13)、2-羟基马尿酸(峰22)、环(脯氨酸-丝氨酸)(峰6)。10批CⅡ-3样品对HepG2细胞的IC50为70.550~200.303μg/mL。25个共有峰中,以抗肝癌活性的GRA分析关联度(r)排序为峰20>23>24>15,且其r值均大于0.7;以OPLS分析变量重要性投影(VIP)值排序为峰23>18>15>24>7>14>6>2>20,且VIP值均大于1,其中峰7、15、20、23、24的标准回归系数均大于0,峰2、6、14、18的标准回归系数均小于0。联合分析显示,CⅡ-3样品抗肝癌活性主要成分依次为峰20>23>24>15。结论:CⅡ-3中两个未知化合物(峰20、23)和环(酪氨酸-脯氨酸)(峰24)、环(甘氨酸-苯丙氨酸)(峰15)可能是其抗肝癌活性的主要成分。