大麻叶片基因组DNA快速提取方法与应用

为满足大麻植物分子检测鉴定与大批量育种材料的分子标记辅助筛选、基因克隆、测序等需要,以改良的CTAB法为对照,通过对碱裂解法、TPS缓冲液法、TE缓冲液法等快速提取方法进行对比与优化,对可能影响DNA提取产量及质量的影响因素进行了分析,确定了提取液的组成及用量、样本量与采集方法、提取过程中各步骤操作与所需时间、保存时间及应用范围等技术参数,建立了一套微量、高效、快速的大麻叶片基因组DNA提取方法,即利用简易打孔器取2个直径为0.5 cm的叶片放入2 mL的离心管中,加入300μL的TE提取液(10 mmol/L EDTA,150~200 mmol/L Tris-HCl)及2粒钢珠,快速震荡30 s,震荡后的样品在13000 r/min下离心1 min,取100~150μL上清液于-18℃冷冻15 min,室温溶解后13000 r/min下离心1 min,可用于PCR扩增。该方法样品用量小、操作简单经济、用时短、效率高、易于大批量操作提取,使用安全,PCR扩增效果佳,可广泛应用于大麻分子鉴别与育种材料的分子标记辅助选择等。

不同工业大麻品种对铅的富集与转运特性

为了研究不同来源、不同基因型工业大麻品种对Pb富集特征的差异,以云麻6号(ym6)、云麻7号(ym7)、云麻杂2号(Z2)、云麻杂3号(Z3)4个工业大麻品种为研究材料,通过人工添加Pb胁迫的盆栽试验,研究了工业大麻植株响应Pb胁迫的农艺性状、生物量、不同器官Pb富集与转移规律变化。结果表明:(1)4个工业大麻品种在高Pb浓度(≥2000 mg/kg)胁迫下,对其株高、茎粗、根长均有一定程度的抑制,但抑制的程度均较小,植株生长良好;(2)高Pb浓度(≥2000 mg/kg)胁迫下,4个品种的总生物量下降了3.22%~40.26%,其中对Z3各个器官的生物量的影响小于其他3个品种;(3)工业大麻吸收的Pb主要富集在根部,占Pb总含量的54.57%~76.69%;茎、叶、纤维、种子对Pb的富集能力较低,且富集系数和转移系数均小于1;在4个品种中,Z3富集Pb的能力高于其余3个品种。综上所述,该研究能够为选择不同富集能力的工业大麻品种治理不同程度的Pb污染土壤提供科学依据。

基于UPLC对龙血通络胶囊特征图谱及5个成分含量的测定

目的:建立龙血通络胶囊超高效液相色谱法(UPLC)特征图谱,并测定7,4′-二羟基黄酮、4,4′-二羟基-2,6-二甲氧基二氢查耳酮、龙血素A、龙血素B、紫檀芪5个成分的含量。方法:采用Agilent Infinity Lab Poroshell 120 EC-C18色谱柱(150 mm×3.0 mm,2.7μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,柱温为35℃,流速为0.5 mL·min^(–1),进样体积为2μL,检测波长为280 nm。结果:建立了龙血通络胶囊UPLC特征图谱,标定了13批样品中的11个共有特征峰,相似度均大于0.95。5个成分在相应质量浓度范围内呈良好的线性关系(r>0.999 5),加样回收率为97.93%~107.33%,RSD均小于3.0%。结论:建立的UPLC操作简便、高效准确,可为龙血通络胶囊的质量控制提供参考。

不同工业大麻品种对田间5种重金属吸收积累特性的比较

为了分析不同工业大麻品种对不同重金属富集与转移的差异,以云南5个工业大麻主栽品种(ym1~ym5)为试验材料,修复云南矿区重金属污染严重的农田。结果表明:5个工业大麻品种中,成熟期的根系对Pb和Cd吸收量最大的为ym1,对As、Cu和Zn吸收量最大的为ym3,而ym5对Pb、Cu、Cd和Zn吸收量皆最小;茎叶对As、Cu和Cd吸收量最大的为ym3,对Pb和Zn吸收量最大的分别为ym1和ym2;种子对Pb和Cd吸收量最大的为ym2,对As和Cu吸收量最大的为ym5,对Zn吸收量最大则为ym3,ym1种子对Pb、As和Cu吸收量皆最小,对Cd、Zn吸收最小的品种分别为ym4和ym2;5个品种表现为除Cu外,茎叶富集系数皆大于根,根系向茎叶的转运系数均大于1。研究表明,ym1可作为Pb污染修复植物,ym3可作为As、Zn、Cu和Cd污染修复的适推品种。

不同改良剂对铅(Pb)污染土壤中工业大麻生长及Pb积累的影响

通过盆栽试验,研究了在高铅(Pb)污染土壤中施用乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、柠檬酸、有机肥和蚯蚓液4种改良剂对3个工业大麻品种生长发育及Pb积累特征的影响。结果表明:与对照相比,EDTA显著抑制了工业大麻的株高和茎粗生长,而促进了工业大麻对Pb的吸收,提高了工业大麻不同部位对Pb的富集能力,增强了Pb从地下部分向地上部分转移的能力;柠檬酸、有机肥和蚯蚓液这3种改良剂对工业大麻农艺性状的影响不显著,蚯蚓液和柠檬酸促进了工业大麻吸收Pb,有机肥抑制了工业大麻吸收Pb。

肿瘤患者产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌感染的临床分布和耐药性分析

目的:调查和分析肿瘤患者产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌感染的临床分布和耐药性,为临床用药和控制医院感染提供科学依据。方法:回顾性调查我院2014-01—2016-12分离的产ESBLs大肠埃希菌临床资料,分析其临床分布和耐药性情况。结果:共计培养出大肠埃希菌103株,其中产ESBLs大肠埃希菌69株,其检出率为67.0%;在年份、性别、年龄、感染部位、感染类别等分布中,产ESBLs大肠埃希菌检出率差异无统计学意义;在肿瘤种类分布中,消化系肿瘤患者产ESBLs大肠埃希菌检出率高于泌尿生殖器肿瘤患者(P=0.001)和其它部位肿瘤患者(P=0.010);在标本分布中,引流液标本产ESBLs大肠埃希菌检出率高于血标本(P=0.0027);产ESBLs菌株对多种临床常用抗菌药物的耐药率均高于非产ESBLs菌株,耐药率多在60%以上,对碳青霉烯类抗菌药物普遍敏感。结论:肿瘤患者产ESBLs大肠埃希菌检出率和耐药性均较高,应加强监测,合理使用抗菌药物,以预防和控制产ESBLs大肠埃希菌感染。

两种生态型大麻杂交F_(2)代主要农艺性状遗传变异分析

【目的】为探究两种生态型大麻杂交F代群体在不同生态环境种植下主要农艺性状间的遗传变异特点。【方法】以‘云麻1号’和‘Dame Blanche’杂交获得的F代株系群体作为研究对象,在3种生态环境种植下对亲本和F代分离群体的株高、茎粗和分枝数等10个农艺性状进行测定,并对这些农艺性状进行遗传变异分析、相关性分析及广义遗传力估算。【结果】8个农艺性状在3种生态环境种植下表现出显著差异(P<0.05)。F_(2)代群体中多数农艺性状平均值介于双亲之间,但群体中各农艺性状变异丰富,在3个生态环境中,10个农艺性状变异系数均超过10%,平均变异系数(3个生态环境下变异系数之和/3)由大到小依次为:第一分枝高>鲜重>分枝长>分枝数>株高>茎粗>叶宽>小叶宽>叶长宽比>叶长。各农艺性状间关系密切,除小叶宽、叶宽、叶长宽比(叶形)3个性状外,其余7个农艺性状在3个生态环境下均两两呈极显著正相关。株高、分枝数、分枝长等农艺性状分布呈连续正态分布,具有典型的数量性状遗传特征。10个农艺性状广义遗传力变化幅度为29.508%~82.575%,由大到小依次为:分枝长>株高>第一分枝高>叶长>分枝数>茎粗>叶宽>小叶宽>鲜重>叶长宽比,其中分枝长和株高广义遗传力超过80%。【结论】在F_(2)代群体中10个农艺性状变异丰富,表现出广泛的性状分离,各农艺性状间关系密切,具有典型的数量性状遗传特征。本研究初步探讨了两种生态型大麻杂交F代主要农艺性状遗传分离特征,结论可为大麻不同用途品种选育和相关性状的QTL定位提供理论基础。

汕头市学龄前儿童特应性皮炎患病情况及危险因素研究

目的:调查汕头市3~6岁儿童特应性皮炎(AD)的患病情况及其影响因素。方法:通过整群抽样抽取汕头市金平区9家幼儿园中3~6岁的儿童共782名,通过现场问卷调查收集研究对象的一般资料与皮肤健康情况并进行诊断,AD诊断采用"张氏标准"。结果:3~6岁儿童AD总患病率为27.11%,男女患病率接近。AD儿童中有家族过敏性疾病史者为98.12%,远远高于非AD儿童,AD儿童经常暴露于毛绒玩具、二手烟环境、居住平房及养宠物等危险因素中。结论:我国沿海城市儿童AD患病率已经接近发达国家;"张氏标准"同样适用于儿童AD的诊断;母乳喂养、混合喂养与人工喂养儿童AD的患病率接近。

Spectra of ^(230-238)U by 1/N Expansion with Consistent Q Framework

The energy levels and the E2 transition probabilities B(E2)of uranium isotopes ^(230-238)U are calculated by the 1/N expansion technique with the consistent Q framework in sdIBMl.The energy spectra for the five isotopes and B(E2)of ^(236)U can be reproduced quite well with a few number of parameters only.

基于LC-IT-TOF-MS技术的龙血通络胶囊体内代谢研究

龙血通络胶囊(Longxue Tongluo Capsules,LTC)临床上治疗缺血性脑中风恢复期血瘀证有很好疗效,其主要成分为龙血竭酚类提取物。该文在前期阐明了LTC主要酚类成分质谱裂解规律的基础上,采用LC-IT-TOF-MS对LTC主要药效成分龙血素A和龙血素C灌胃大鼠体内成分进行测定,分别鉴定了18个和55个代谢产物,初步阐明了其代谢途径。在此基础上,将LTC(500 mg·kg^(-1))灌胃SD大鼠,研究其在体内的血中移行成分,根据精确相对分子质量、特征碎片离子、对照品比对,结合课题组前期自建LTC化学成分数据库以及天然产物数据库,在给药大鼠血浆中共鉴定了18个原型成分和106个代谢产物,代谢产物主要以葡萄糖醛酸化、磺酸化、甲基化等形式为主,初步阐明了LTC主要成分在体内的血中移行成分,为进一步明确LTC的体内药效物质奠定了基础。

不同产区酸枣仁中斯皮诺素、6′′′-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B的含量测定

目的研究和比较全国7大产区不同产地酸枣仁药材中2种黄酮和2种皂苷的含量,筛选优质药材来源。方法 2016年和2017年2个年度对7大产区进行调查和样品收集,共收集样品74份,使用UPLC-UV-ELSD检测斯皮诺素和6′′′-阿魏酰斯皮诺素2种黄酮,以及酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B2种皂苷的含量。结果 2016、2017年采集样品中酸枣仁样品中斯皮诺素的质量分数分别为0.052%~0.102%和0.049%~0.144%,6′′′-阿魏酰斯皮诺素质量分数分别为0.021%~0.072%和0.026%~0.088%,酸枣仁皂苷A的质量分数分别为0.016%~0.061%和0.033%~0.054%,酸枣仁皂苷B的质量分数分别为0.008%~0.046%和0.005%~0.046%。结论经相关性分析,7个大产区间各成分含量基本上没有显著差异,斯皮诺素含量较高的产地有山西临汾(包括大宁和吉县)、河北涉县、河北迁安、甘肃庆阳、陕西眉县、陕西合阳、辽宁建昌、天津蓟县,酸枣仁皂苷A含量高的产地为山东各地,以及河北内丘和陕西渭南。综合比较山东各地2类成分含量普遍都高且变化较小。相关性分析也显示2种黄酮含量具有较好的相关性,而2种皂苷含量的相关性较差。

足月臀位外倒转术成功的影响因素分析

目的探讨影响足月臀位外倒转术(ECV)成功的因素。方法收集2018年2月至2020年12月在复旦大学附属妇产科医院就诊的所有接受臀位ECV的孕妇为研究对象。根据手术是否成功,分为成功组及失败组,将相关因素进行单因素分析后,采用非条件logistic回归分析臀位ECV成功的影响因素。结果134例足月孕妇行ECV,总成功率76.12%(102/134),成功后阴道分娩率75.49%(77/102);成功组与失败组之间单因素统计分析:生育史、胎盘位置、胎背方向、新生儿性别、术前麻醉情况差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果显示:生育史、胎盘位置是影响手术成功的因素(P<0.05)。结论生育史、胎盘位置是ECV成功率的影响因素。臀位ECV操作可靠性及安全性高,并发症少。有意愿孕妇均可评估后尝试实施。

妊娠期糖尿病相关基因研究进展

GDM是一种由环境、生活方式、遗传等多因素共同参与和相互作用导致的妊娠期并发症,对母儿健康危害极大,随着人类基因组计划的完成、功能基因组学研究的开展及高通量基因分型技术的进步,越来越多的证据表明妊娠糖尿病同T2DM一样,遗传因素在发病机理中起到了重要作用,全基因组关联研究(GWAS)发现T2DM部分易感基因及单核苷酸多态位点(SNP)与GDM遗传易感性相关,此外,近年来在表观遗传基因方面,微小RNA(microRNA,miRNA)与GDM发病机制之间的研究逐渐被报道,本文就GDM相关的遗传基因及其多态性及miRNA的最新研究进展进行综述。