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莱姆病螺旋体端粒解离酶的表达纯化及其晶体衍射分析
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作者 胡元森 王远 +3 位作者 吕扬勇 黄亮 张帅兵 李娜 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2024年第2期1-11,共11页
【目的】对莱姆病螺旋体(Borrelia burgdorferi)端粒解离酶(telomere resolvase,ResT)进行原核可溶性表达纯化,并筛选高衍射度的ResT-DNA复合物晶体,为探究ResT-DNA复合物的结构和功能奠定基础。【方法】合成pET28 b-ResT表达质粒,构建... 【目的】对莱姆病螺旋体(Borrelia burgdorferi)端粒解离酶(telomere resolvase,ResT)进行原核可溶性表达纯化,并筛选高衍射度的ResT-DNA复合物晶体,为探究ResT-DNA复合物的结构和功能奠定基础。【方法】合成pET28 b-ResT表达质粒,构建原核表达载体pSUMO-ResT,分析ResT可溶性蛋白在BL21(DE3)、BL21(DE3)pLysS、BL21 Gold(DE3)pLysS、BL21 Codon Plus(DE3)、Rosetta(DE3)和Rosetta(DE3)pLysS中的表达量,获得最优的ResT原核表达菌株。基于AlphaFold预测的ResT蛋白模型,利用定点突变及ResT可溶性蛋白表达分析,获得高效可溶性表达ResT突变体。经Ni-NTA亲和层析、HiTrap Heparin HP亲和层析及分子筛层析对ResT突变体ResT(W94H)进行蛋白纯化。利用EMAS检测ResT(W94H)与DNA的结合能力。使用蛋白晶体接种(seeding)和交叉接种(cross-seeding)方法,利用多种商业化结晶试剂盒筛选并优化ResT-DNA复合物的结晶条件,对复合物晶体进行X射线衍射分析。【结果】BL21 Gold(DE3)pLysS菌株是ResT最佳的高效可溶性表达菌株,W94H突变体比野生型具有更强的可溶性表达。获得了高纯度(95%)且高质量浓度(15 mg/mL)的ResT(W94H),其能够与底物DNA形成稳定的ResT-DNA复合物。在18℃下,ResT-DNA最佳结晶条件是:PEG3350150 g/L、二甲苯二酸钠0.1 mol/L(pH 6.6)、NaCl 0.15 mol/L,ResT-DNA晶体分辨率最高为3.52,晶体空间群为P4。【结论】得到了高纯度ResT(W94H)蛋白,获得了ResT-DNA复合物晶体。 展开更多
关键词 莱姆病螺旋体 端粒解离酶 原核表达和纯化 蛋白结晶 X-射线衍射
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AnHog1基因缺失对黑曲霉中赭曲霉毒素A生物合成的影响
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作者 张艺格 魏闪 +3 位作者 吕扬勇 翟焕趁 张帅兵 胡元森 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第6期76-82,共7页
黑曲霉菌株能够产生强致癌的赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA),对食品安全和人类健康存在巨大隐患。为深入研究OTA生物合成调控机理,构建了黑曲霉AnHog1基因缺失菌株,通过高效液相色谱-荧光检测器检测该基因对OTA合成的影响,采用荧光定量... 黑曲霉菌株能够产生强致癌的赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA),对食品安全和人类健康存在巨大隐患。为深入研究OTA生物合成调控机理,构建了黑曲霉AnHog1基因缺失菌株,通过高效液相色谱-荧光检测器检测该基因对OTA合成的影响,采用荧光定量PCR技术探究该基因缺失对OTA生物合成簇内基因表达水平的影响,并检测对过氧化氢(H_(2)O_(2))耐受性与活性氧(ROS)水平的影响。结果表明:AnHog1基因缺失不影响黑曲霉生长及产孢,但显著抑制OTA生物合成,OTA含量下降了40.8%;敲除AnHog1基因后,与OTA合成基因簇相关的基因pks、p450、nrps、hal和bzip的表达水平分别下调了64.19%、25.82%、18.88%、51.31%和48.92%;在H_(2)O_(2)胁迫条件下,AnHog1基因缺失菌株对H2O2敏感性增加,且菌丝体内ROS水平升高。AnHog1基因缺失后可能通过抑制OTA合成基因的表达和破坏氧化还原平衡抑制OTA生物合成,研究结果为挖掘真菌防控新靶标提供科学依据。 展开更多
关键词 黑曲霉 赭曲霉毒素A AnHog1 OTA合成基因簇 氧化还原平衡
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直播电商的促销方式与消费者购买意愿关系研究——以感知价值为中介变量
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作者 卢厚义 张帅兵 +2 位作者 赵诗雅 张敏 张平改 《商展经济》 2023年第19期54-58,共5页
随着网络技术的快速发展,直播电商成为一种新的电商业态。但当下直播电商的促销方式较为混杂。为探究对消费者购买意愿更有影响的促销方式,本文利用多元线性回归模型,以感知价值作为中介变量,分析折扣、满减、赠品三种促销方式对消费者... 随着网络技术的快速发展,直播电商成为一种新的电商业态。但当下直播电商的促销方式较为混杂。为探究对消费者购买意愿更有影响的促销方式,本文利用多元线性回归模型,以感知价值作为中介变量,分析折扣、满减、赠品三种促销方式对消费者购买意愿的直接影响效果。通过对所收集数据进行线性回归分析,得出在以感知价值为中介变量的购买过程中,赠品促销对消费者的购买意愿影响程度最强,希望此结论能为直播电商企业合理使用促销方式提供参考。 展开更多
关键词 线性回归模型 消费者购买意愿 直播电商 感知价值
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后疫情时代消费者网购意愿影响因素分析——基于因子分析法
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作者 金加卫 苗慧勇 +1 位作者 张帅兵 李玲玲 《攀枝花学院学报》 2023年第2期109-118,共10页
新冠肺炎疫情对我国经济和居民生活产生了巨大影响,疫情防控期间人们外出受到限制,将无法实现的线下购物需求转移到了线上,使得我国网购业务量产生了较大的变化。文章首先在前人研究基础上,利用因子分析法分析各特征变量对后疫情时代居... 新冠肺炎疫情对我国经济和居民生活产生了巨大影响,疫情防控期间人们外出受到限制,将无法实现的线下购物需求转移到了线上,使得我国网购业务量产生了较大的变化。文章首先在前人研究基础上,利用因子分析法分析各特征变量对后疫情时代居民网购意愿的影响方式及影响程度;其次,对影响消费者网购意愿的产品满意因子、保障因子和物流因子进行了检验;最后,采用最优尺度回归检验三个因子与消费者购买意愿的关系,证实三个因子对居民网购意愿都产生正向影响。 展开更多
关键词 后疫情时代 网购意愿 影响因素 因子分析法
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基于景观结构的眉县土地利用生态风险空间特征 被引量:17
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作者 李雅婷 赵牡丹 +3 位作者 张帅兵 吴宇鑫 鲁帅 刘仨 《水土保持研究》 CSCD 北大核心 2018年第5期220-225,233,共7页
在GIS与RS技术支持下,以眉县为研究区域,根据对遥感影像的解译获取2005年、2010年及2015年土地利用类型数据,划分1km×1km网格作为研究单元,根据景观扰动指数与景观脆弱指数构建生态系统模型,借助地统计学与GIS软件进行了空间分析,... 在GIS与RS技术支持下,以眉县为研究区域,根据对遥感影像的解译获取2005年、2010年及2015年土地利用类型数据,划分1km×1km网格作为研究单元,根据景观扰动指数与景观脆弱指数构建生态系统模型,借助地统计学与GIS软件进行了空间分析,对眉县土地利用变化影响下的生态风险空间分异特征进行了定量评价。结果表明:眉县土地利用类型中建设用地与林地面积逐年增加,耕地与未利用地面积总体减少,土地利用程度提高。空间自相关分析结果显示高值—高值(H-H)聚集区集中分布于北部首善镇、常兴镇附近,低值—低值(L-L)聚集区主要分布于研究区边界。眉县土地利用生态风险等级整体上呈现逐渐提高的趋势,高风险区主要集中在北部首善镇、常兴镇附近,此区域风险等级提高最为显著,南部生态风险普遍较低,形成北高南低的局面,高风险区、较高风险区面积逐渐扩大。研究结果可为区域生态安全格局构建、土地利用的优化布局提供借鉴。 展开更多
关键词 眉县 景观格局 生态风险 土地利用
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粮食储藏生理性变质研究进展 被引量:6
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作者 胡元森 田萍萍 +3 位作者 李棒棒 张帅兵 魏闪 吕扬勇 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第11期179-186,共8页
粮食是人类赖以生存的物质基础,粮食储藏变质对农业生产及食品加工影响巨大。粮食生理劣变是一个复杂、渐进的物理、化学与生物学过程,与其籽粒的生理活动密切相关。研究表明,粮食籽粒酶活性降低,呼吸作用下降,生命力减弱等是其生理变... 粮食是人类赖以生存的物质基础,粮食储藏变质对农业生产及食品加工影响巨大。粮食生理劣变是一个复杂、渐进的物理、化学与生物学过程,与其籽粒的生理活动密切相关。研究表明,粮食籽粒酶活性降低,呼吸作用下降,生命力减弱等是其生理变质的外在表现,储粮生理活动是引发其生理劣变的本质要素。深入了解粮食籽粒在储藏过程中生理活动及其变化规律对揭示储藏生理变质机理具有重要意义。本文主要介绍了粮食籽粒储藏衰老过程中种胚微观结构、营养物质转化、线粒体呼吸作用、细胞抗氧化系统、遗传物质变异等的研究现状,并对粮食储藏保鲜原理进行讨论,以期为提出延缓和预测粮食储藏劣变的方法提供参考。 展开更多
关键词 粮食 储藏 生理变质 品质
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自动电压控制保持器对发电机组稳定性影响分析
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作者 朱建华 刘国营 +2 位作者 张帅兵 屈少平 夏熙杰 《水电与新能源》 2023年第5期5-8,共4页
为研究自动电压控制对发电机组稳定性影响,提出了一种含自动电压控制保持器的阻尼转矩计算方法。对自动电压控制系统离散环节进行建模,得出对应的海佛容-飞利蒲斯模型,推导出含自动电压控制保持器的阻尼转矩表达式,实现发电机组稳定性... 为研究自动电压控制对发电机组稳定性影响,提出了一种含自动电压控制保持器的阻尼转矩计算方法。对自动电压控制系统离散环节进行建模,得出对应的海佛容-飞利蒲斯模型,推导出含自动电压控制保持器的阻尼转矩表达式,实现发电机组稳定性的量化评估。仿真结果表明,与传统算法相比,可以量化分析自动电压控制保持器对发电机组稳定的附加影响,并验证了本方法的有效性。 展开更多
关键词 保持器 自动电压控制 海佛容-飞利蒲斯模型 稳定分析
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“以学生为中心”的微生物学课程教学探索与实践 被引量:6
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作者 张帅兵 胡元森 屈建航 《科教文汇》 2021年第5期77-78,共2页
微生物学作为生命科学专业一门重要的专业基础课程,该课程的学习效果对学生的专业课学习和职业发展具有重要作用。在新的大学教育形式下,基于"以学生为中心"的教学理念,我们对微生物学的教学范式改革进行了探索。对教学过程... 微生物学作为生命科学专业一门重要的专业基础课程,该课程的学习效果对学生的专业课学习和职业发展具有重要作用。在新的大学教育形式下,基于"以学生为中心"的教学理念,我们对微生物学的教学范式改革进行了探索。对教学过程进行系统设计,通过引入课程思政、改变教学范式以及改革课程考核评价方式,有效激发了学生对微生物学的兴趣,提高了学生在微生物学习过程中的获得感和综合能力。通过对"以学生为中心"的微生物学课程教学探索与实践,学生的主动性、实践性和创新性得到了较为明显的提升,获得了良好的教学效果。 展开更多
关键词 以学生为中心 微生物学 课程思政 教学范式
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知识溢出、吸收能力、政府干预与区域创新研究 被引量:1
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作者 张帅兵 吴价宝 +1 位作者 刘旭 左劲中 《黑龙江工业学院学报(综合版)》 2022年第6期90-96,共7页
创新是我国实现可持续发展的重要保证,区域创新是实现创新发展的有力支撑。以长三角城市群2017—2020年统计数据为研究样本,采用定性比较分析法构建组态模型,探索区域创新发展的相关路径。研究结果表明:知识溢出*政府干预、研发投入支持... 创新是我国实现可持续发展的重要保证,区域创新是实现创新发展的有力支撑。以长三角城市群2017—2020年统计数据为研究样本,采用定性比较分析法构建组态模型,探索区域创新发展的相关路径。研究结果表明:知识溢出*政府干预、研发投入支持*政府干预、知识溢出*科技人才支撑*研发投入支持等3种组态均能促使区域创新的提升。根据长三角城市群创新发展实践所探索的区域创新路径也可以为其他地区提供借鉴。 展开更多
关键词 知识溢出 区域创新 定性比较分析
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降解黄曲霉毒素B1的绿脓杆菌的分离、鉴定及应用研究 被引量:9
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作者 郭钰婷 张帅兵 +5 位作者 李娜 翟焕趁 吕扬勇 蔡静平 胡元森 王金水 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2019年第3期33-38,49,共7页
黄曲霉毒素B1(AFB1)是霉变粮食和饲料中常见的真菌毒素之一,对其进行脱毒研究具有重要意义。利用以香豆素为唯一碳氮源的培养基分离出9个菌株,对AFB1的降解率均超过60%,其中YM-1菌株的降解率为91.48%。对YM-1菌株的16S rDNA基因进行测... 黄曲霉毒素B1(AFB1)是霉变粮食和饲料中常见的真菌毒素之一,对其进行脱毒研究具有重要意义。利用以香豆素为唯一碳氮源的培养基分离出9个菌株,对AFB1的降解率均超过60%,其中YM-1菌株的降解率为91.48%。对YM-1菌株的16S rDNA基因进行测序及序列比对,表明该菌株为绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)。对AFB1降解动力学研究发现,发酵96 h后YM-1绿脓杆菌可降解NB培养基中90.70%的AFB1,在24~48 h内降解速度最快,降解率为82.99%。绿脓杆菌YM-1发酵液中的降解活性主要位于发酵上清液中,同时细胞对AFB1也具有一定的吸附作用;蛋白酶K反应及热处理后的YM-1发酵上清液对AFB1的降解率明显降低,可初步判断上清液中可能存在可降解AFB1的酶类。将绿脓杆菌YM-1接种到含AFB1的霉变玉米粉中进行固态发酵6 d后,玉米粉中的AFB1降解了88.87%。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 生物降解 绿脓杆菌 玉米
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禾谷镰刀菌FgNST1对FgMGV1及DON毒素合成的影响 被引量:3
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作者 薛晓雯 翟焕趁 +7 位作者 屈建航 张帅兵 吕扬勇 李娜 魏闪 马平安 蔡静平 胡元森 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期985-994,共10页
为探究盐胁迫调控因子和促分裂素原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)信号途径对盐胁迫的响应,以禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)为研究对象,应用生物信息学对禾谷镰刀菌FgNST1和FgMGV1保守域及其同源蛋白进行分... 为探究盐胁迫调控因子和促分裂素原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)信号途径对盐胁迫的响应,以禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)为研究对象,应用生物信息学对禾谷镰刀菌FgNST1和FgMGV1保守域及其同源蛋白进行分析,采用酵母双杂交和荧光定量PCR分析了FgNST1和FgMGV1之间的相互关系,并检测了FgNST1基因对DON毒素的影响。结果表明,FgNST1含有盐胁迫负调控因子保守域,FgMGV1含有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化中心(Serine/Threonine protein kinase catalytic center,STKc)保守域;FgNST1与黄色镰刀菌的胁迫反应蛋白相似度最高。FgNST1与FgMGV1可以相互作用,在盐胁迫下FgNST1基因表达下调,而FgMGV1基因表达上调。在无盐胁迫下FgMGV1基因在FgNST1敲除突变体中几乎不表达,在盐胁迫下FgMGV1基因在FgNST1敲除突变体中的相对表达量高于野生型菌株。盐胁迫抑制禾谷镰刀菌在小麦基质中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)毒素合成。在无盐胁迫的小麦基质培养基中,FgNST1敲除突变体在产毒初期产生的DON毒素显著高于野生型,7 d后则显著低于野生型;在盐胁迫的小麦基质中,FgNST1敲除突变体产生的DON毒素始终高于野生型菌株。 展开更多
关键词 禾谷镰刀菌 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 调控 盐胁迫 促分裂原活化蛋白激酶
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小麦赤霉病菌FgVPS26与FgRab7的相互作用及对DON毒素合成的影响 被引量:3
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作者 孟瑶 翟焕趁 +4 位作者 张帅兵 吕扬勇 朱丽红 王亚君 蔡静平 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2019年第2期20-26,共7页
小麦赤霉病菌合成DON毒素是多基因控制的次级代谢过程,阐明各种基因的调控作用有利于进行科学防控。以赤霉病菌为研究对象,通过酵母双杂交、实时定量PCR及ELISA等技术研究FgVPS26与FgRab7的相互作用及对DON毒素生物合成的影响。结果表明... 小麦赤霉病菌合成DON毒素是多基因控制的次级代谢过程,阐明各种基因的调控作用有利于进行科学防控。以赤霉病菌为研究对象,通过酵母双杂交、实时定量PCR及ELISA等技术研究FgVPS26与FgRab7的相互作用及对DON毒素生物合成的影响。结果表明:FgVPS26和激活态FgRab7可以相互作用,但与原始态FgRab7不能相互合作。FgVPS26和FgRab7基因可相互影响其表达,与野生型菌株PH-1相比,当FgVPS26和FgRab7其中一个基因缺失时另一个基因的表达量将显著下降。另外,FgVPS26或FgRab7基因缺失也显著降低与DON毒素合成相关的Tri基因表达,从而导致同一生长时期突变菌株的DON毒素合成量比野生型菌株PH-1明显减少。因此,小麦赤霉病菌中FgVPS26和FgRab7可以相互作用并调控DON毒素的生物合成。 展开更多
关键词 呕吐毒素 赤霉病菌 相互作用 基因表达 调控
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储运粮食霉变状况的现场检测技术 被引量:3
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作者 朱冰洁 翟焕趁 +4 位作者 张帅兵 吕扬勇 李娜 胡元森 蔡静平 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2020年第2期107-113,共7页
以过氧化氢酶活性为指标,研究适用现场快速检测粮食霉变状况的方法,结果表明:用高速搅拌法制备检测菌悬液的检测值变异系数最小,耗时是振荡洗涤法等常规方法的1/20~1/10;检测液制备条件对检测结果有显著影响,选用粮食样品加水后不浸泡... 以过氧化氢酶活性为指标,研究适用现场快速检测粮食霉变状况的方法,结果表明:用高速搅拌法制备检测菌悬液的检测值变异系数最小,耗时是振荡洗涤法等常规方法的1/20~1/10;检测液制备条件对检测结果有显著影响,选用粮食样品加水后不浸泡、转速2300 r/min、搅拌时间40 s制备检测液,可减少粮食表皮破损率,获得稳定的检测结果。将建立的方法用于不同种类粮食及多个品种的霉变状况检测,结果表明,酶活性快速检测值与常规的带菌量检测结果相关性系数达到或超过0.99。当小麦霉变粒为2%时,酶活性检测与带菌量检测的结果分别为527 U/100 g和1.6×10^5cfu/g;酶活性检测、霉菌带菌量检测对不同比例霉变粒小麦检测值的相关性系数分别为0.99与0.97。因此,新建立的酶活性快速检测方法可较好地反映粮食的霉变状况,满足现场粮食快速检测的需求。 展开更多
关键词 粮食 霉变 带菌量 现场检测 快速检测
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降解AFB_(1)的克雷伯氏菌分离、鉴定及降解机理初步研究 被引量:4
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作者 谢澳文 樊磊 +4 位作者 韩一鸣 李文靖 王乐 张帅兵 吕扬勇 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2021年第2期64-70,共7页
为了获得对黄曲霉具有降解作用的菌株,以秸秆、牛粪、土壤、发霉玉米及花生为研究对象,以香豆素为唯一碳源,筛选获得了能够降解黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))的多个菌株。通过生理生化及16S rDNA基因序列分析确定菌株种类;通过优化获得了对A... 为了获得对黄曲霉具有降解作用的菌株,以秸秆、牛粪、土壤、发霉玉米及花生为研究对象,以香豆素为唯一碳源,筛选获得了能够降解黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))的多个菌株。通过生理生化及16S rDNA基因序列分析确定菌株种类;通过优化获得了对AFB_(1)具有最优降解效果的培养基组成;采用蛋白酶K和SDS处理发酵上清液,初步判断具有降解作用的物质;采用SDS-PAGE电泳分析比较了不同培养基中发酵培养基上清液的蛋白图谱,并选择差异条带进行质谱鉴定;采用不同萃取剂对降解后的产物进行萃取并进行全波长扫描与液质联用分析,确定降解产物的分子量,并对其可能的结构进行推测。结果表明:克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)N1在DJN培养基对黄曲霉毒素降解效果最好,37℃、72 h内降解率为74%,上清液中存在降解AFB_(1)的物质,初步推断为酶;差异蛋白条带质谱分析结果显示,对黄曲霉毒素有降解效果的酶可能为Mn-超氧化物歧化酶(SodA)或NADH-醌氧化还原酶(NuoB);降解产物的全波长扫描结果显示其最大吸收峰为310 nm左右;正丁醇作为最优萃取剂,采用LC-MS/MS对降解产物进行初步分析,结果显示其分子量为241.1,推测其呋喃环上的8、9位双键以及12位的甲氧基被破坏。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 生物降解 胞外酶 降解产物
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城市食物-能源-水系统的关联关系研究:以广州市为例 被引量:1
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作者 高成康 朱素龙 +3 位作者 张帅兵 余猛 孟祥禹 李晓军 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期709-717,共9页
食物-能源-水(food-energy-water,FEW)是人类赖以生存的基础资源,且三者之间存在密切的关联关系.2011年世界经济论坛首次将"FEW风险群"列为未来10年影响全球格局的3类重要风险集合.本文基于物质流和能量流的分析方法,识别出3... 食物-能源-水(food-energy-water,FEW)是人类赖以生存的基础资源,且三者之间存在密切的关联关系.2011年世界经济论坛首次将"FEW风险群"列为未来10年影响全球格局的3类重要风险集合.本文基于物质流和能量流的分析方法,识别出3种代谢网络中具有关联的节点和路径.基于识别出的关联节点和路径,分析了FEW间的关联及相关指标.结果表明:2017年广州市食物生产相关的用水总量为12.19×10^(8) m^(3),能源相关的用水量为22.91×10^(8) m^(3),食物生产有关的能源消耗为11.36×10^(4) tce,与水有关的能源消耗为21.27×10^(4) tce;广州市资源消耗水平逐渐增加,资源指数迅速恶化,资源自给率水平逐渐降低,对环境影响也呈加强趋势,各子系统间的依存度和关联逐渐加强. 展开更多
关键词 物质流 能量流 食品-能源-水关联关系 广州市 评价指标
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小麦病程相关蛋白wheatwin 1的表达及其对黄曲霉生长及产毒的影响
16
作者 王岩 张帅兵 +3 位作者 吕扬勇 翟焕趁 蔡静平 胡元森 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第2期82-86,共5页
黄曲霉在储粮中的大量生长可严重危害粮食的储藏品质甚至产生真菌毒素。研究表明,小麦籽粒中含有多种病程相关蛋白,具有较强储藏霉变抗性的小麦品种胚部含有较多的病程相关蛋白,但其对储粮霉菌的生长和产毒的影响尚不清楚。通过PCR手段... 黄曲霉在储粮中的大量生长可严重危害粮食的储藏品质甚至产生真菌毒素。研究表明,小麦籽粒中含有多种病程相关蛋白,具有较强储藏霉变抗性的小麦品种胚部含有较多的病程相关蛋白,但其对储粮霉菌的生长和产毒的影响尚不清楚。通过PCR手段扩增从小麦基因组DNA中扩增出了病程相关蛋白wheatwin 1基因并将其在大肠杆菌中进行了表达,对wheatwin 1蛋白进行复性和纯化后分析其对黄曲霉生长及产生毒素的影响。结果表明编码成熟wheatwin 1蛋白的DNA序列长度为378 bp,将其在大肠杆菌中与谷胱甘肽转移酶融合表达可获得包涵体蛋白。将包涵体蛋白复性并利用Thrombin酶切后获得了具有核酸酶活性的wheatwin 1,其可降解黄曲霉RNA;进一步研究表明100 g/m L wheatwin蛋白可显著抑制黄曲霉孢子的萌发和黄曲霉毒素的积累。为进一步揭示wheatwin蛋白对黄曲霉生长和产毒的机理研究奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 病程相关蛋白 wheatwin 1 黄曲霉 真菌毒素
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黑曲霉葡萄糖氧化酶在毕赤酵母中的表达及其高效发酵研究
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作者 卢洋 张帅兵 +4 位作者 翟焕趁 李娜 吕扬勇 胡元森 蔡静平 《河南工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2021年第1期63-69,共7页
葡萄糖氧化酶是一类能催化β-D-葡萄糖生成葡萄糖酸-δ-内酯的酶类,在食品、药品以及生物传感器等领域具有广泛的应用前景。从黑曲霉中克隆出葡萄糖氧化酶编码序列,在毕赤酵母中实现了组成型和诱导型表达并分析了其酶学性质和发酵条件... 葡萄糖氧化酶是一类能催化β-D-葡萄糖生成葡萄糖酸-δ-内酯的酶类,在食品、药品以及生物传感器等领域具有广泛的应用前景。从黑曲霉中克隆出葡萄糖氧化酶编码序列,在毕赤酵母中实现了组成型和诱导型表达并分析了其酶学性质和发酵条件。结果表明:黑曲霉葡萄糖氧化酶的编码基因长度为1 818 bp,编码605个氨基酸,具有21个氨基酸组成的信号肽。毕赤酵母组成型表达葡萄糖氧化酶的发酵上清液中葡萄糖氧化酶的酶活可达1.2 U/m L,利用镍离子亲和层析纯化后得到了分子质量约为100 kDa的葡萄糖氧化酶。利用糖苷内切酶H(Endo H)对葡萄糖氧化酶去糖基化后,其分子质量约为70 kDa,与推测的分子质量相近。对黑曲霉葡萄糖氧化酶的酶学性质研究表明,该酶的最适反应pH 6.0,最适反应温度35℃,比活力60.9 U/mg。为了进一步提高葡萄糖氧化酶在毕赤酵母中的表达量,构建了诱导型表达的毕赤酵母菌株并通过G418抗生素筛选获得了高效表达菌株。对该菌株进行高密度发酵(湿菌体200 g/L),甲醇添加量为2.5%,发酵至第7天时葡萄糖氧化酶发酵量可达133 U/m L,蛋白表达量约1.9 g/L。 展开更多
关键词 葡萄糖氧化酶 黑曲霉 毕赤酵母 高效发酵
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品质西安指标体系构建与评价 被引量:1
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作者 张帅兵 范少言 +2 位作者 李雅婷 刘喆 王泽 《城市地理┿城乡规划》 2019年第2期21-28,34,共9页
品质西安实质是西安建设具有历史文化特色国际化大都市的阶段性目标,对接轨建设国际化大都市指标体系的探索具有重要意义。研究在梳理国内外相关领域权威标准和部分品质之城指标体系研究成果的基础上,从定性、定量两方面构建主观、质量... 品质西安实质是西安建设具有历史文化特色国际化大都市的阶段性目标,对接轨建设国际化大都市指标体系的探索具有重要意义。研究在梳理国内外相关领域权威标准和部分品质之城指标体系研究成果的基础上,从定性、定量两方面构建主观、质量、发展三个层次,经济、文化、政府、环境、社会五个维度,经济发展、人民生活、政府服务、城市治理、宜居环境、对外开放、城市文化七个品质的框架体系。运用全排列多边形图示指标法来衡量不同时间点品质西安综合及分项建设成效,结果显示:2015—2017年品质西安总体建设水平稳步提升,但略有波动,系统协调发展度不高,综合建设水平处于一般阶段,预测2020年将达到良好阶段;现阶段各系统内部要素之间发展同步性不高,处于半隔离化发展状态,2020年系统发展要素之间逐步趋与协调,但不均衡性依然存在。 展开更多
关键词 城市品质 指标体系 全排列多边形图示指标法 西安
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地方本科院校学生专业实践能力关键影响因素研究 被引量:3
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作者 苗慧勇 张帅兵 +1 位作者 陶有田 陈凯 《商丘师范学院学报》 CAS 2022年第5期98-103,共6页
构建学生专业实践能力关键影响因素模型,并通过问卷调查收集安徽省7所地方本科院校和5家校企合作企业数据并进行实证,探寻学生专业实践能力的关键影响因素及其作用机理,明确学生专业实践能力提升具体路径。研究表明,地方本科院校、专业... 构建学生专业实践能力关键影响因素模型,并通过问卷调查收集安徽省7所地方本科院校和5家校企合作企业数据并进行实证,探寻学生专业实践能力的关键影响因素及其作用机理,明确学生专业实践能力提升具体路径。研究表明,地方本科院校、专业教师、合作企业、实践资源是学生专业实践能力的关键影响因素,其中,实践资源对专业实践能力的总影响最大,地方本科院校次之。培养高水平“双师型”教师、构建完善的校企合作互惠机制、建设高水平实践资源是学生专业实践能力提升的具体路径。 展开更多
关键词 地方本科院校 专业实践能力 影响因素
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Correlation of Gluten Molecular Conformation with Dough Viscoelastic Properties during Storage 被引量:2
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作者 JIA Feng zhang shuaibing +1 位作者 zhang Yijun WANG Jinshui 《Grain & Oil Science and Technology》 2018年第1期1-7,共7页
Significant correlations exist for the total sample between the dough viscoelastic properties and quality, but little information about these links is available. This study investigates the relationship between the gl... Significant correlations exist for the total sample between the dough viscoelastic properties and quality, but little information about these links is available. This study investigates the relationship between the gluten molecular conformation and the dough viscoelastic properties of the Zhengmai 379 wheat variety with different relative humidity(RH) values during storage.The results showed that protein extractability, free sulfhydryl(SH) groups, and wet gluten contents decreased to a certain degree during storage, while the glutenin quantity significantly varied. Significant negative correlation coefficients were found between the dough viscosity at 50% RH and the β-turn contents at 40% RH(-0.918) or 60% RH(-0.949)(P < 0.01), the dough viscosity at50% RH and the β-turn contents at 50% RH(-0.912)(P < 0.05), and the dough viscosity at 50% RH and the α-helix/β-sheet ratio at 40% RH(-0.875), 50% RH(-0.869), or 60% RH(-0.843)(P < 0.05). Significant correlation coefficients were further observed between the dough viscosity at 50% RH and the β-sheet contents at 60% RH(0.927)(P < 0.01) and between the dough viscosity at50% RH and the β-sheet contents at 40% RH(0.910) or 50% RH(0.908)(P < 0.05). A decrease in the free SH groups of gluten and an increase in the low-molecular weight contents suggested that gliadin was incorporated via SS crosslinking to the glutenin-like protein, which did not dissolve in ethanol. 展开更多
关键词 Wheat gluten Viscoelastic properties Free sulfhydryl groups Gluten secondary structure
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