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免疫亲和层析技术协同酶联免疫吸附法检测赭曲霉毒素A
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作者 张蕴哲 张先舟 +1 位作者 袁耀武 张伟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第10期257-264,共8页
利用免疫亲和层析技术(immunoaffinity chromatography,IAC)对样品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)进行捕获与浓缩,利用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法对IAC捕获的目标物OTA进行测定。IAC与ELISA中的抗OTA... 利用免疫亲和层析技术(immunoaffinity chromatography,IAC)对样品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)进行捕获与浓缩,利用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法对IAC捕获的目标物OTA进行测定。IAC与ELISA中的抗OTA单克隆抗体来自不同的克隆株,分属不同独特型,与OTA结合靶点的选择性存在差异,IAC与ELISA协同检测,可以有效过滤OTA结构类似物造成的干扰,提高免疫分析的特异性与灵敏度。该方法用于加标样品测定时,OTA的检出限为0.2 ng/g,定量限为0.4 ng/g,OTA的平均回收率为75.9%,与单一的ELISA法相比,该方法虽然回收率略低,但灵敏度可以显著提高,达到ELISA法的60倍。通过对49份样品的实际检测,该方法检出阳性样品与国标法的符合率达到100%,漏检率为0%,由此可见,该方法在准确性上表现出明显的优势。作为一种综合免疫分析技术,该方法不需要大型仪器设备,对操作环境没有严格要求,便于基层实验室对样品中OTA的分析。 展开更多
关键词 免疫亲和层析技术 酶联免疫吸附法 检测 赭曲霉毒素A
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G-四链体与As-PCR联用可视化检测沙门氏菌 被引量:1
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作者 刘健慧 张先舟 +4 位作者 张蕴哲 王红静 李雪瑶 耿凤珍 檀建新 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第5期371-380,共10页
沙门氏菌是食源性病原菌,常在食品媒介中传播,因此快速检测是控制该病原菌的关键。本研究用沙门氏菌基因组DNA作模板,通过对不对称PCR(As-PCR)扩增条件的优化,证明当非限制性引物HF终浓度0.4μmol/L,与限制性引物GR终浓度比10∶1、退火... 沙门氏菌是食源性病原菌,常在食品媒介中传播,因此快速检测是控制该病原菌的关键。本研究用沙门氏菌基因组DNA作模板,通过对不对称PCR(As-PCR)扩增条件的优化,证明当非限制性引物HF终浓度0.4μmol/L,与限制性引物GR终浓度比10∶1、退火温度58℃,扩增40个循环时可获得最大浓度的单链DNA(ssDNA)产物。带有G-四链体序列的ssDNA与40μmol/L氯化血红素作用60 min时,G-四链体显示出最高的过氧化物酶活性。在此基础上,将As-PCR和G-四链体联用,实现了可视化检测沙门氏菌invH基因,在2 pg/μL~258 ng/μL的质量浓度区间,质量浓度对数与吸光值A421nm呈线性关系(y=0.0691x+0.3085,R2=0.9729)。对污染的牛奶样品检测,检出灵敏度高,为35 CFU/mL,且操作便捷,为病原微生物检测提供了新技术支撑。 展开更多
关键词 不对称PCR 可视化检测 沙门氏菌 G-四链体
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2010–2017年藏北高寒退化草地禁牧恢复效果评价 被引量:15
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作者 冯云飞 李猛 +7 位作者 李少伟 邸迎伟 沈振西 张宪洲 余成群 严俊 席永士 武建双 《草业科学》 CAS CSCD 2019年第4期1148-1162,I0006,共16页
针对退化草地进行禁牧封育是现行草原生态保护奖励补助政策的重要举措之一,科学地评估禁牧成效并探究其对气候的响应机制对于未来禁牧工程布局优化具有重要意义。本研究以西藏那曲和阿里两地市2 413块禁牧地为对象,计算草原生态保护补... 针对退化草地进行禁牧封育是现行草原生态保护奖励补助政策的重要举措之一,科学地评估禁牧成效并探究其对气候的响应机制对于未来禁牧工程布局优化具有重要意义。本研究以西藏那曲和阿里两地市2 413块禁牧地为对象,计算草原生态保护补助奖励政策实施前(2000–2009年)和政策实施后(2010–2017年)禁牧草地归一化植被指数(normalized difference vegetation index, NDVI)均值差(ΔMean_(NDVI))和趋势差(ΔTrend_(NDVI))来评价禁牧有效性,并结合两个时段内生长季温度和降水的均值差和趋势差探讨气候变化对高寒草地禁牧效果的影响。研究发现:(1)前后两个时段禁牧有效ΔMean_(NDVI)> 0和ΔTrend_(NDVI)> 0地块比例分别为67.3%和40.5%,禁牧出现负面影响,ΔMean_(NDVI) <0和ΔTrend_(NDVI) <0的地块比例分别为22.5%和31.0%;禁牧无显著影响,ΔMean_(NDVI)≈0和ΔTrend_(NDVI)≈0的地块比例分别为10.2%和28.4%;(2) NDVI与生长季温度和降水相关性系数平均值分别0.27和0.37;前后两个时段NDVI与生长季温度相关性没有显著改变;草原和荒漠区禁牧地NDVI与生长季降水相关系数从0.236提升到0.370。(3)线性回归和方差分析均显示生长及温度和降水对NDVI影响显著但解释度很低(约2%)。本研究表明,藏北高原围栏禁牧对草地植被恢复有效性及其效益规模具有明显的空间异质性。因此,建议禁牧已出现负面影响的地块应及时开放为放牧地,有效的地块未来应探明其最佳禁牧年限,无效的地块应探讨除气候变化以外人文因素的影响。 展开更多
关键词 藏北草原 生态补偿 补奖政策 草地恢复 气候变化
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基于NPP分配的生产和生态功能协同提升模式——以西藏拉萨河谷半农半牧村为例 被引量:8
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作者 武俊喜 潘影 +4 位作者 李振男 张燕杰 赵忠旭 张宪洲 余成群 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期4596-4605,共10页
在人类占用净初级生产力(HANPP)等研究基础上,提出了净初级生产力(NPP)权衡假设,即生态系统供给、调节服务的权衡受到HANPP各组分分配比例的影响;基于NPP权衡假设构建了生产生态协同提升模式效果的分析框架。以西藏拉萨河流域白朗村为例... 在人类占用净初级生产力(HANPP)等研究基础上,提出了净初级生产力(NPP)权衡假设,即生态系统供给、调节服务的权衡受到HANPP各组分分配比例的影响;基于NPP权衡假设构建了生产生态协同提升模式效果的分析框架。以西藏拉萨河流域白朗村为例,基于实地采样、监测数据,分析了生态修复前、协同提升及河谷种草模式下,白朗村的HANPP组分、空间格局,以及生产、生态功能(牲畜养殖数量、碳固定服务和空气净化服务)。结果表明:在实施生态修复前,白朗村共有牲畜15990羊单位,HANPP为35.0 g C/m^(2),占潜在NPP的13.8%,其中收获导致的HANPPharv占40.0%;生态系统空气净化服务为12.0 g SO_(2) m^(-2)a^(-1),碳固定服务为6245.4 g C m^(-2)a^(-1)。协同提升后,HANPP总量基本保持不变,但结构发生了变化,其中HANPPharv提高了4.2%,土地利用导致的HANPPluc降低了1.8%。同时,养殖牲畜数量增加6.3%,生态系统调节服务基本保持同一水平。在河谷种草模式下,HANPP总量相比实施生态修复前降低了67.0%,结构变化更加剧烈。HANPPharv增加了84.2%,为25.8 g C/m^(2);HANPPluc降低了167.0%,为-14.2 g C/m^(2)。牲畜数量大幅增加了2.2倍(35195.0羊单位);而空气净化服务也提高了15.1%(13.8 g SO_(2)m^(-2)a^(-1)),碳固定服务提高了5.0%(6560.1 g C m^(-2)a^(-1))。研究表明,NPP权衡假设可以为定量分析区域尺度生态系统服务权衡提供一定的理论支持,促进生产生态功能协同提升的生态修复模式优化。 展开更多
关键词 生态系统服务权衡 HANPP 高寒草地 生态修复 白朗村
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2003-2005年中国通量观测研究联盟(ChinaFLUX)碳水通量观测数据集 被引量:43
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作者 张雷明 罗艺伟 +29 位作者 刘敏 陈智 苏文 何洪林 朱治林 孙晓敏 王艳芬 周国逸 赵新全 韩士杰 欧阳竹 张宪洲 张一平 刘琪璟 郝彦宾 闫俊华 张德强 李英年 王安志 吴家兵 李发东 赵风华 石培礼 张扬建 何永涛 林露湘 宋清海 王辉民 刘允芬 于贵瑞 《中国科学数据(中英文网络版)》 CSCD 2019年第1期14-30,共17页
基于微气象学理论的涡度相关通量观测技术实现了对生态系统尺度的生产力、能量平衡和温室气体交换等功能和过程的直接测定,其观测数据为陆地生态系统碳水循环过程的机理研究以及碳源/汇和水分利用的时空分布评价提供了重要的观测数据。... 基于微气象学理论的涡度相关通量观测技术实现了对生态系统尺度的生产力、能量平衡和温室气体交换等功能和过程的直接测定,其观测数据为陆地生态系统碳水循环过程的机理研究以及碳源/汇和水分利用的时空分布评价提供了重要的观测数据。本数据集为中国通量观测研究联盟(ChinaFLUX)首批观测站点的生态系统通量观测数据,包括森林、草地和农田在内的8个典型生态系统,并基于ChinaFLUX数据处理体系形成了标准化的生态系统碳水通量和关键气象要素数据集。本数据集可以为分析我国典型陆地生态系统对全球变化的响应及其机制提供重要的科学知识和数据基础。 展开更多
关键词 涡度相关技术 通量观测 气象要素 碳水循环 陆地生态系统
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黄曲霉毒素B1核酸适配体筛选和检测方法的建立 被引量:5
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作者 张敏 张先舟 +6 位作者 李聪 高浩 刘健慧 田益玲 马雯 李英军 檀建新 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第24期295-303,共9页
建立一种高灵敏的快速检测黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的方法。基于氧化石墨烯(graphene oxide,GO)通过π-π共轭吸附单链寡核苷酸(single-strand DNA,ssDNA),对已结合靶标的ssDNA吸附能力较弱的特性,设计针对AFB1核酸适配体的筛... 建立一种高灵敏的快速检测黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的方法。基于氧化石墨烯(graphene oxide,GO)通过π-π共轭吸附单链寡核苷酸(single-strand DNA,ssDNA),对已结合靶标的ssDNA吸附能力较弱的特性,设计针对AFB1核酸适配体的筛选方案。经过10轮筛选,共获得45条ssDNA序列。挑选具有代表性的6条序列进行亲和力分析实验,其解离常数Kd分别为16.29、27.88、18.54、23.11、47.94、22.31 nmol/L。选用亲和力较高的AFB-5、AFB-8进行特异性实验,结果显示所筛选的适配体能特异性吸附AFB1。最后利用适配体AFB-8作为识别元件建立了基于纳米金比色检测AFB1的方法。在优化的检测条件下,AFB1质量浓度与A520 nm值有良好的线性关系,其回归方程为y=-0.00709x+0.46142(R^2=0.9979),线性范围为0.025~10 ng/mL,检出限为0.025 ng/mL。通过特异性实验和对大米样品加标回收实验,加标回收率为83.36%~105.74%,证明本方法的可行性。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 核酸适配体 指数富集的配体系统进化技术 比色检测 纳米金
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西藏河谷地区人工种草的投入产出比较分析 被引量:3
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作者 潘影 武俊喜 +4 位作者 赵延 张燕杰 张晓庆 张宪洲 余成群 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期4488-4498,共11页
分析了西藏河谷地区六种草地的经济投入、产出和生态系统服务价值,模拟了投入增加下村落草地利用结构的改变与经济、生态产出的响应。结果表明:草地恢复管理中,围栏草地成本最低,为67元/hm^2,是一年生人工刈割草地的0.9%。围栏等草地恢... 分析了西藏河谷地区六种草地的经济投入、产出和生态系统服务价值,模拟了投入增加下村落草地利用结构的改变与经济、生态产出的响应。结果表明:草地恢复管理中,围栏草地成本最低,为67元/hm^2,是一年生人工刈割草地的0.9%。围栏等草地恢复管理的经济产出为772元/hm^2,其中补贴收入占14.6%,另85.4%来自打工收入;而多年生人工放牧和一年生人工刈割草地的经济产出为4250元/hm^2与13135元/hm^2。相比经济产出,不同草地管理方式下生态系统服务价值差距有限,最大仅为27%。草地投入增加下,天然放牧草地转变为围栏草地及一年生人工刈割草地,并最终保持约1∶1的面积比。合理配置围栏草地与一年生人工刈割草地,可以实现区域较大的经济收入增长和生态系统服务的保障。 展开更多
关键词 人工草地 投入产出 土地利用 围栏 生态系统服务
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湖北省63种药品价格、药品流通成本现状调查与规范价格政策研究 被引量:2
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作者 王竞 周文犁 +5 位作者 刘刚 周延安 周本宏 张先洲 张洪 邹军 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第8期1019-1026,共8页
目的:为制定药品价格调控政策、促进药品价格合理化提供参考。方法:按照世界卫生组织和国际健康行动组织药品价格标准化调查法,对湖北省3个不同经济发展水平区域常用的、销售额较大的63种药品在各级医疗卫生机构和药品零售企业的零售价... 目的:为制定药品价格调控政策、促进药品价格合理化提供参考。方法:按照世界卫生组织和国际健康行动组织药品价格标准化调查法,对湖北省3个不同经济发展水平区域常用的、销售额较大的63种药品在各级医疗卫生机构和药品零售企业的零售价格进行抽样问卷调查(辅以现场考察),计算并统计药品中位价格比(MPR),同时以药品批发和零售企业管理人员、医院药学管理人员为对象就该省药品流通成本进行了初步访谈调查(辅以文献调查),在分析和探讨的基础上提出了控制流通成本、规范药品价格的政策建议。结果:药品价格调查共发放问卷120份,回收有效问卷118份,有效回收率为98.33%;药品流通成本调查中共有来自药品批发和零售企业、医院药学部门的30名管理人员参与了访谈。63种药品在不同类型样本单位的MPR为0.05~44.55。样本一级医疗卫生机构53种药品的67个品规中有38个(56.72%)零售价中位数高于国际参考价,样本二级医疗卫生机构63种药品的79个品规中有57个(72.15%)零售价中位数高于国际参考价,样本三级医疗卫生机构63种药品的80个品规中有63个(78.75%)零售价中位数高于国际参考价,样本药品零售企业37种药品的50个品规中有42个(84.00%)零售价中位数高于国际参考价。在所有样本单位中的MPR最高值<1的有13个品规,在1~<2之间的有12个品规,在2~<5之间的有23个品规,在5~<10之间的有15个品规,≥10的有17个品规。药品MPR比较方面,样本三级医疗卫生机构高于样本二级、一级医疗卫生机构和药品零售企业(P<0.01),样本二级医疗卫生机构和药品零售企业高于样本一级医疗卫生机构(P<0.01),而样本二级医疗卫生机构与药品零售企业比较差异无统计学意义(P>0.05);经济发展好的区域样本单位高于经济发展中等、一般区域样本单位(P<0.01),经济发展中等区域样本单位高于经济发展一般区域样本单位(P<0.01);不同类型样本单位的原研药品均高于相应的仿制药品(P<0.01),且不同类型样本单位的原研药品比较差异均无统计学意义(P>0.05),同时,仿制药品样本三级医疗卫生机构高于样本二级、一级医疗卫生机构和药品零售企业(P<0.05或P<0.01),样本二级医疗卫生机构和药品零售企业高于样本一级医疗卫生机构(P<0.05),而样本二级医疗卫生机构与药品零售企业比较差异无统计学意义(P>0.05)。湖北省药品生产、流通成本以及集中招标采购价格均高于全国水平。结论:湖北省药品价格水平较高,尤其是三级医疗卫生机构药品价格水平明显高于其他单位,经济发展好的区域药品价格水平高于经济发展中等和一般区域,而原研药品价格水平高于仿制药品。医药工业成本、药品流通费用、使用环节价格加成等因素最终导致药品零售价格较高。需要采取综合政策措施控制药品流通全过程的成本,规范药品价格。 展开更多
关键词 湖北省 药品价格 药品流通成本 药品中位价格比 调查
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基于灰主成分分析法的变形信息提取研究 被引量:2
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作者 张拯 张献州 +2 位作者 罗保林 刘伟 吴开岩 《铁道科学与工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1369-1375,共7页
基于液体静力水准仪系统应用于高铁实时沉降监测时,受施工机械振动,往来列车振动和温度气压变化等因素的影响,其测量结果存在系统性漂移和随机波动。因而,与同步进行的二等水准测量成果之间存在一定差异。在系统研究PCA原理及数学模型... 基于液体静力水准仪系统应用于高铁实时沉降监测时,受施工机械振动,往来列车振动和温度气压变化等因素的影响,其测量结果存在系统性漂移和随机波动。因而,与同步进行的二等水准测量成果之间存在一定差异。在系统研究PCA原理及数学模型的基础上,针对PCA应用于时序变形信息提取的不足,将灰色系统思想引入到PCA中,构建GPCA模型,对PCA中基本特征向量进行改进,进而实现时序变形信息的提取。 展开更多
关键词 GPCA PCA 变形信息提取 灰色系统 液体静力水准仪 准确性
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2002-2010年中国典型生态系统辐射及光能利用效率数据集 被引量:1
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作者 朱先进 于贵瑞 +41 位作者 何洪林 陈智 王秋凤 郑涵 车涛 陈世苹 郭继勋 古松 韩士杰 郝彦宾 黄辉 贾根锁 李彦 李英年 林光辉 孟平 欧阳竹 饶良懿 石培礼 孙春健 吴金水 王传宽 王辉民 王艳芬 王跃思 肖文发 闫俊华 杨大文 查同刚 张法伟 张劲松 张军辉 张宪洲 张旭东 张一平 赵斌 赵风华 赵亮 赵新全 赵仲辉 周广胜 周国逸 《中国科学数据(中英文网络版)》 CSCD 2019年第1期93-105,共13页
辐射是陆地生态系统能量的主要来源,其利用效率表现为光能利用率,反映了生态系统转化光能、生成有机物质的能力。揭示典型生态系统的辐射及光能利用效率可以为评估区域光能资源及其利用效率提供参考,也为评估区域有机物质固定能力及碳... 辐射是陆地生态系统能量的主要来源,其利用效率表现为光能利用率,反映了生态系统转化光能、生成有机物质的能力。揭示典型生态系统的辐射及光能利用效率可以为评估区域光能资源及其利用效率提供参考,也为评估区域有机物质固定能力及碳吸收能力提供依据。基于中国陆地生态系统通量观测研究联盟(ChinaFLUX)的长期观测结果及已发表文献的公开数据,构建了2002–2010年中国典型生态系统辐射及光能利用效率数据集,包含51个生态系统126个站点年辐射、光能利用效率及吸收光能利用效率的观测记录。另外,本数据集还包含生态系统代码、年份、经度、纬度、海拔、生态系统类型、年均气温、年总降水量、年均CO2质量浓度、年均叶面积指数、最大叶面积指数等生物气候信息。本数据集可以为评估生态系统生产能力、应对气候变化等方面的研究提供数据支持。 展开更多
关键词 碳循环 辐射 生产力 涡度相关 陆地生态系统
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藏北高原草甸土壤固碳微生物群落特征随海拔和季节的变化 被引量:15
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作者 高静 Said Muhanmmad +4 位作者 岳琳艳 何永涛 斯确多吉 张宪州 孔维栋 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期3816-3824,共9页
研究土壤固碳微生物丰度、群落结构、多样性差异及其影响因子对了解青藏高原土壤碳循环和固碳潜力具有重要意义。采用定量PCR(qPCR)、末端限制性片段分析(T-RFLP)、克隆文库和测序方法,研究了青藏高原草甸土壤固碳微生物丰度与群落结构... 研究土壤固碳微生物丰度、群落结构、多样性差异及其影响因子对了解青藏高原土壤碳循环和固碳潜力具有重要意义。采用定量PCR(qPCR)、末端限制性片段分析(T-RFLP)、克隆文库和测序方法,研究了青藏高原草甸土壤固碳微生物丰度与群落结构随海拔和季节的变化,主要结果如下:1)随海拔升高高寒草甸土壤固碳微生物丰度显著升高,但季节变化不明显,不同类别微生物固碳基因cbbL丰度依次为:Form IC>Form IAB>Form ID,其中Form IC类固碳微生物可达10~8拷贝数/g土壤,cbbL基因丰度与海拔、土壤含水量和铵态氮含量(NH_4^+-N)呈正相关关系,与土壤温度和pH值负相关;2)固碳微生物多样性和丰富度随海拔升高而升高,在4800m达到最大,且二者受季节影响较小,其群落结构随海拔升高而逐渐变化,主要受土壤pH值、海拔和土壤水分影响;3)Form IC类固碳微生物主要包括放线菌门和和变形菌门,其中α变形菌门是高寒草甸土壤优势固碳微生物类群。本研究有助于理解土壤微生物群落功能及其在土壤碳循环过程中的作用,为更准确评估高寒草甸土壤碳循环过程提供了科学依据。 展开更多
关键词 高寒草甸 固碳微生物 RubisCO酶 海拔梯度 青藏高原
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藏北高原牧区人工草地建设布局的适宜性分析 被引量:29
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作者 段呈 石培礼 +1 位作者 张宪洲 宗宁 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期5517-5526,共10页
人工草地是缓解天然草地退化和提升草地生产力的一种有效途径,但人工草地建设发展需注重区域布局、种植区划、经营管理等战略问题,尤其是在高寒牧区建立人工草地,目前还存在诸多值得探讨的科学问题。为此,选取藏北高原高寒牧区为研究区... 人工草地是缓解天然草地退化和提升草地生产力的一种有效途径,但人工草地建设发展需注重区域布局、种植区划、经营管理等战略问题,尤其是在高寒牧区建立人工草地,目前还存在诸多值得探讨的科学问题。为此,选取藏北高原高寒牧区为研究区,基于遥感数据,土壤数据,气象数据,地形和土地利用数据,结合野外实地调查,从可利用土地资源角度考虑,通过分析藏北现有人工草地建设的立地条件,识别出区域适宜人工草地建设的潜在分布区,并与现有人工草地分布位置及其面积进行对比分析和验证,以期为区域未来人工草地建设布局提供科学指导。研究结果表明:在各种约束因子的限制下,藏北满足人工草地建设条件的适宜区域极其有限,难以发展大面积的人工草地建设工程。水热条件和海拔是限制区域人工草地建设的主要地理因素,尤其是那曲地区,绝大部分区域无法满足人工牧草生长活动的积温需求。因此,区域牧草种植规划中需重点考虑牧草品种的生物学特性。另一方面,在藏北高寒牧区建立人工草地必须慎重,今后人工草地种植规划还需要加强牧草的抗寒性和抗旱性研究,在人工草地的管理方面要特别关注已建人工草地的可持续性和稳定性,防止出现草地退化和沙化等问题。 展开更多
关键词 藏北高原 高寒牧区 人工草地布局 适宜性分析
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基于G-四链体的PCR-RCA双重扩增技术检测沙门氏菌 被引量:4
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作者 刘健慧 张先舟 +5 位作者 张蕴哲 李兰茹 王红静 高洁 耿凤珍 檀建新 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第12期325-333,共9页
将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)联用,并把G-四链体互补序列嵌入到RCA扩增所需的哑铃环状模板上,通过PCR和RCA的双重扩增及特异性结合G-四链体的硫黄素T荧光信号增... 将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)联用,并把G-四链体互补序列嵌入到RCA扩增所需的哑铃环状模板上,通过PCR和RCA的双重扩增及特异性结合G-四链体的硫黄素T荧光信号增强的作用,达到基于G-四链体的PCR-RCA技术检测沙门氏菌(Salmonella)的目的。在优化的检测体系下,确定了沙门氏菌基因组DNA浓度对数与486 nm波长处的荧光信号强度具有良好的线性关系,回归方程为y=2.101x+2.8723(R^(2)=0.9925),线性范围为17 fg/μL~1.7 ng/μL。根据实验的特异性分析,表明此方法适用于沙门氏菌属的检测,对人工污染沙门氏菌牛奶样品进行检测,检出限为4.28 CFU/mL。该方法具有特异性强、灵敏度高、检出限低等优点,为实现食源性致病菌的快速检测提供新的方法。 展开更多
关键词 G-四链体 聚合酶链式反应 滚环扩增技术 沙门氏菌 荧光信号检测
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定点突变对低温脂肪酶活性和热稳定性的影响 被引量:2
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作者 陈海清 于凡 +4 位作者 王红静 张先舟 亢春雨 马雯 檀建新 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期96-102,共7页
使用在线预测软件PoPMuSiC-2.1对粘质沙雷氏菌菌株L1的脂肪酶(lipA)每个氨基酸突变后的去折叠自由能变化(ΔΔG)进行预测、筛选,用重叠延伸PCR法构建了2个脂肪酶突变体lipA-Asn86Glu、lipAAsn132Lys。经大肠杆菌表达和酶蛋白纯化后,对... 使用在线预测软件PoPMuSiC-2.1对粘质沙雷氏菌菌株L1的脂肪酶(lipA)每个氨基酸突变后的去折叠自由能变化(ΔΔG)进行预测、筛选,用重叠延伸PCR法构建了2个脂肪酶突变体lipA-Asn86Glu、lipAAsn132Lys。经大肠杆菌表达和酶蛋白纯化后,对其酶学特性进行了表征。2个突变体和野生型的脂肪酶最适温度为30℃、最适pH值为8。与野生型相比,lipA-Asn86Glu的比酶活提高了8%,lipA-Asn132Lys的比酶活比野生型降低了19%;lipA-Asn86Glu在50℃下酶的半衰期与野生型相似,Km和Kcat值有所下降,而lipAAsn132Lys的50℃时半衰期、Km和Kcat都明显降低。上述结果为通过理性设计突变位点对酶进行分子改造,以提高酶活力或热稳定性,提供了借鉴和途径。 展开更多
关键词 脂肪酶 定点突变 重叠延伸PCR PoPMuSiC 酶活力
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G-四联体与聚合酶链式反应联用可视化检测沙门氏菌 被引量:2
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作者 刘健慧 耿凤珍 +4 位作者 张先舟 高浩 李聪 高洁 檀建新 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第22期331-338,共8页
建立对沙门氏菌的G-四联体与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)联用可视化检测方法。以沙门氏菌属特异性基因invH为检测目标,设计5’端含有G-四联体互补序列的上下游引物,通过PCR的特异性识别并扩增目标序列,获得大量含G-... 建立对沙门氏菌的G-四联体与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)联用可视化检测方法。以沙门氏菌属特异性基因invH为检测目标,设计5’端含有G-四联体互补序列的上下游引物,通过PCR的特异性识别并扩增目标序列,获得大量含G-四联体的双链DNA,变性后与氯高铁血红素结合生成具有过氧化物酶活性的模拟酶(DNAzyme),并催化H_(2)O_(2)与2,2’-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑琳-6-磺酸)二胺盐由无色变为绿色,实现G-四联体与PCR联用对沙门氏菌的可视化检测。在优化的检测体系下,沙门氏菌基因组的质量浓度对数与421 nm处的吸光度具有良好的线性关系,其回归方程为y=0.1299x+0.2179,R^(2)=0.9945,线性范围0.07~771.6 ng/μL,灵敏度为0.07 ng/μL。特异性分析表明:此方法适用于沙门氏菌属的检测,可成功应用于人工污染沙门氏菌牛奶的检测,检出限为1.2×10^(2) CFU/mL。通过检测30种市售样品,发现其结果与国标检测方法结果一致。本研究为食源性致病菌的检测提供了新的策略。 展开更多
关键词 G-四联体 聚合酶链式反应扩增 沙门氏菌 可视化检测
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2000-2010年中国典型陆地生态系统实际蒸散量和水分利用效率数据集 被引量:3
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作者 郑涵 于贵瑞 +46 位作者 朱先进 王秋凤 张雷明 陈智 孙晓敏 何洪林 苏文 王艳芬 韩士杰 周国逸 赵新全 王辉民 欧阳竹 张宪洲 张扬建 石培礼 李英年 赵亮 张一平 闫俊华 王安志 张军辉 郝彦宾 赵风华 张法伟 周广胜 林光辉 陈世苹 刘绍民 赵斌 贾根锁 张旭东 张玉翠 古松 刘文兆 李彦 王文杰 杨大文 张劲松 张志强 赵仲辉 周石硚 郭海强 沈彦俊 徐自为 黄辉 孟平 《中国科学数据(中英文网络版)》 CSCD 2019年第1期55-68,共14页
蒸散是陆地生态系统水分循环和能量平衡的关键过程,水分利用效率是反映生态系统碳水循环间耦合关系的重要指标,二者在生态学、农学、水文学、气候学等多个学科中均具有重要的应用价值。涡度相关法被认为是现今唯一能直接测量生物圈与大... 蒸散是陆地生态系统水分循环和能量平衡的关键过程,水分利用效率是反映生态系统碳水循环间耦合关系的重要指标,二者在生态学、农学、水文学、气候学等多个学科中均具有重要的应用价值。涡度相关法被认为是现今唯一能直接测量生物圈与大气间物质与能量交换通量的标准方法,已成为生态系统尺度碳水交换通量观测的主要方法。本文通过整合中国陆地生态系统通量观测联盟(ChinaFLUX)的长期观测数据和中国区域其他观测站点基于涡度相关法发表的文献数据,构建了一套中国典型陆地生态系统实际蒸散量和水分利用效率数据集。本数据集共有实际蒸散量数据记录143条、水分利用效率数据记录96条,涉及5种生态系统类型45个生态系统,时间跨度为2000–2010年。本数据集可以为陆地生态系统碳水循环、生态系统管理和评估、全球变化等相关领域的研究提供数据支持。 展开更多
关键词 实际蒸散量 水分利用效率 涡度相关 陆地生态系统 中国 CHINAFLUX
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2004-2010年当雄高寒草甸碳水通量观测数据集 被引量:1
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作者 柴曦 何永涛 +4 位作者 石培礼 张宪洲 牛犇 张雷明 陈智 《中国科学数据(中英文网络版)》 CSCD 2021年第1期64-73,共10页
青藏高原地理环境独特,为研究高海拔、高寒生态系统碳水循环提供了良好的实验平台。但由于自然条件的限制,青藏高原腹地碳水通量的研究还比较欠缺,迫切需要对其进行长期的数据监测及整理。本数据集为高寒草原化草甸生态系统2004–2010... 青藏高原地理环境独特,为研究高海拔、高寒生态系统碳水循环提供了良好的实验平台。但由于自然条件的限制,青藏高原腹地碳水通量的研究还比较欠缺,迫切需要对其进行长期的数据监测及整理。本数据集为高寒草原化草甸生态系统2004–2010年通量观测数据,数据采集地位于青藏高原腹地的中国科学院当雄高寒草甸研究站(简称当雄站),基于中国通量观测研究网络(ChinaFLUX)数据处理体系形成了标准化的生态系统碳水通量和关键气象要素数据集。本数据集对准确评价青藏高原高寒草甸生态系统碳水通量在区域和全球碳水循环中的地位和作用具有重要意义。 展开更多
关键词 涡度相关 青藏高原 高寒草甸 碳水通量 气象观测
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Effects of Grazing Exclusion on Plant Productivity and Soil Carbon, Nitrogen Storage in Alpine Meadows in Northern Tibet, China 被引量:22
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作者 XIONG Dingpeng SHI Peili +2 位作者 SUN Yinliang WU Jianshuang zhang xianzhou 《Chinese Geographical Science》 SCIE CSCD 2014年第4期488-498,共11页
Grazing exclusion is widely adopted in restoring degraded alpine grasslands on the Qinghai-Tibetan Plateau. However, its effectiveness remains poorly understood. In this study, we investigated the effects of grazing e... Grazing exclusion is widely adopted in restoring degraded alpine grasslands on the Qinghai-Tibetan Plateau. However, its effectiveness remains poorly understood. In this study, we investigated the effects of grazing exclusion on plant productivity, species diversity and soil organic carbon(SOC) and soil total nitrogen(STN) storage along a transect spanning from east to west of alpine meadows in northern Tibet, China. After six years of grazing exclusion, plant cover, aboveground biomass(AGB), belowground biomass(BGB), SOC and STN were increased, but species diversity indices declined. The enhancement of AGB and SOC caused by grazing exclusion was correlated positively with mean annual precipitation(MAP). Grazing exclusion led to remarkable biomass increase of sedge species, especially Kobresia pygmaea, whereas decrease of biomass in forbs and no obvious change in grass, leguminous and noxious species. Root biomass was concentrated in the near surface layer(10 cm) after grazing exclusion. The effects of grazing exclusion on SOC storage were confined to shallow soil layer in sites with lower MAP. It is indicated that grazing exclusion is an effective measure to increase forage production and enhance soil carbon sequestration in the studied region. The effect is more efficient in sites with higher precipitation. However, the results revealed a tradeoff between vegetation restoration and ecological biodiversity. Therefore, carbon pools recover more quickly than plant biodiversity in the alpine meadows. We suggest that grazing exclusion should be combined with other measures to reconcile grassland restoration and biodiversity conservation. 展开更多
关键词 植物生产力 中国北方 土壤碳 封育 高寒草甸 物种多样性指数 土壤有机碳储量 地上生物量
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Simulating .net primary production of grasslands in northeastern Asia using MODIS data from 2000 to 2005 被引量:10
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作者 XING Xiaoxu XU Xingliang +4 位作者 zhang xianzhou ZHOU Caiping SONG Minghua SHAO Bin OUYANG Hua 《Journal of Geographical Sciences》 SCIE CSCD 2010年第2期193-204,共12页
The net primary production (NPP) of grasslands in northeastern Asia was estimated using improved CASA model with MODIS data distributed from 2000 and ground data as driving variables from 2000 to 2005. Average annua... The net primary production (NPP) of grasslands in northeastern Asia was estimated using improved CASA model with MODIS data distributed from 2000 and ground data as driving variables from 2000 to 2005. Average annual NPP was 146.05 g C m^-2 yr^-1 and average annual total NPP was 0.32 Pg C yr^-1 in all grasslands during the period. It was shown that average annual grassland NPP in the whole northeastern Asia changed dramatically from 2000 to 2005, with the highest value of 174.80 g C m^-2 yr^-1 in 2005 and the lowest value of 125.65 g C m^-2 yr^-1 in 2001. On regional scale, average annual grassland NPP of 179.71 g C m^-2 yr^-1 in southeastern Russia was the highest among the three main grassland regions in the six years. Grasslands in northern China exhibited the highest average annual total NPP of 0.16 Pg C yr^-1 and contributed 51.42% of the average annual total grassland NPP in northeastern Asia. Grassland NPP in northeastern Asia also showed a clear seasonal pattern with the highest NPP occurred in July every year. Average monthly grassland NPP in southeastern Russia was the highest from May to August while average monthly grassland NPP in northern China showed the highest NPP before May and after August. The change rate distribution of grassland NPP between the former three years and the latter three years showed grassland NPP changed slightly between the two stages in most regions, and that NPP change rate in 80.98% of northeastern Asia grasslands was between -0.2 and 0.2. Grassland NPP had close correlation with precipitation and temperature, that indicates climate change will influence the grassland NPP and thus have a great impact on domestic livestock in this region in future. 展开更多
关键词 northeastern Asia GRASSLAND MODIS CASA model NPP
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IGM-FM串联模型在高铁路基沉降预测中的应用 被引量:8
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作者 张献州 夏晨翕 +2 位作者 陈霄 蒋英豪 陈建营 《重庆交通大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期99-108,共10页
高速铁路路基沉降素有“变形量级小、数据波动大”的特点。针对现有对指数曲线法、三点法、灰色系统等单项预测模型不能恰当地反映高速铁路路基建设周期内沉降变形规律的问题。笔者利用改进灰色预测傅里叶-马尔科夫残差式组合预测模型,... 高速铁路路基沉降素有“变形量级小、数据波动大”的特点。针对现有对指数曲线法、三点法、灰色系统等单项预测模型不能恰当地反映高速铁路路基建设周期内沉降变形规律的问题。笔者利用改进灰色预测傅里叶-马尔科夫残差式组合预测模型,对路基沉降变形数据存在串联式叠加的规律进行预测研究,以期提高预测的整体精度和稳健性。应用该模型于经过线性插值补全的某高速铁路路基沉降实测数据中,研究结果表明:该组合预测模型构造有效,利用傅里叶级数和Markov状态转移矩阵对一次残差进行二次组合预测,更好地拟合高速铁路路基沉降监测数据的变化趋势,预测精度得到明显提高。 展开更多
关键词 铁道工程 路基沉降变形监测 改进GM(1 1)模型 傅里叶级数 MARKOV链 串联式组合预测
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