【目的】本研究旨在克隆西方蜜蜂Apis mellifera RNA m 6A甲基转移酶14(methyltransferase 14,METTL14)基因AmMETTL14,分析AmMETTL14的理化性质和分子特性以及AmMETTL14在工蜂不同发育阶段和不同组织中的表达模式,并制备AmMETTL14多克...【目的】本研究旨在克隆西方蜜蜂Apis mellifera RNA m 6A甲基转移酶14(methyltransferase 14,METTL14)基因AmMETTL14,分析AmMETTL14的理化性质和分子特性以及AmMETTL14在工蜂不同发育阶段和不同组织中的表达模式,并制备AmMETTL14多克隆抗体,为持续深入开展AmMETTL14的功能研究提供参考和基础。【方法】通过PCR扩增西方蜜蜂AmMETTL14的CDS并进行Sanger测序验证。使用相关生物信息学软件对AmMETTL14进行生物信息学分析,并构建系统进化树。通过原核表达系统诱导表达AmMETTL14融合蛋白,免疫新西兰白兔以制备多克隆抗体,利用ELISA和Western blot分别检测抗体的效价及特异性。采用RT-qPCR检测AmMETTL14在卵、幼虫、预蛹、蛹及工蜂成虫中以及刚出房工蜂成虫的触角、毒腺、脑、中肠、咽下腺、脂肪体和表皮7种组织中的相对表达量。【结果】成功克隆到西方蜜蜂AmMETTL14的CDS;AmMETTL14的分子式为C 1957 H 3113 N 567 O 589 S 15,分子量约为44.49 kD,脂溶系数为79.97,理论等电点为8.58,平均亲水系数为-0.59,不含典型的跨膜结构域和信号肽,可同时定位于细胞核、线粒体和细胞质;西方蜜蜂、中华蜜蜂A.cerana cerana、黑大蜜蜂A.laboriosa、东方蜜蜂A.cerana、大蜜蜂A.dorsata、小蜜蜂A.florea、欧洲熊蜂Bombus terrestris、金环胡蜂Vespa mandarinia、美洲东部熊蜂B.impatiens和黑腹果蝇Drosophila melanogaster的METTL14均含有MT-A70结构域和3个相同的保守基序;AmMETTL14与黑大蜜蜂的METTL14的氨基酸序列一致性最高(65.60%)且亲缘关系最近。制备的AmMETTL14多克隆抗体效价较高(大于512 K)且特异性较强。AmMETTL14在7和8日龄预蛹与卵中的表达量相近且均显著高于在3日龄幼虫中的表达量,在12日龄蛹中的表达量显著高于卵、幼虫和预蛹中的表达量,在6,12和15日龄工蜂成虫体内的表达量显著高于1日龄工蜂成虫体内的表达量;AmMETTL14在刚出房工蜂成虫脑和咽下腺中的表达量与触角中的表达量相近且均显著高于在毒腺、中肠、脂肪体和表皮中的表达量。【结论】研究结果表明,AmMETTL14可能为亲水性、非跨膜和胞内蛋白,AmMETTL14在幼虫生长发育中发挥潜在的调控作用,制备得到的AmMETTL14的多克隆抗体效价高、灵敏度高和特异性强,为进一步探究AmMETTL14的功能及其参与的表观调控机制打下了基础。展开更多
目的分析孕妇尿可替宁水平与2岁儿童神经认知发育的关联,探究孕妇尿可替宁水平对儿童神经发育产生影响的敏感窗口期。方法基于武汉市的一项出生队列研究,利用贝利婴幼儿发展量表—中国城市修订版评估队列中2岁儿童的神经认知发育情况,...目的分析孕妇尿可替宁水平与2岁儿童神经认知发育的关联,探究孕妇尿可替宁水平对儿童神经发育产生影响的敏感窗口期。方法基于武汉市的一项出生队列研究,利用贝利婴幼儿发展量表—中国城市修订版评估队列中2岁儿童的神经认知发育情况,评估结果由智力发展指数(mental development index,MDI)和运动发展指数(psychomotor development index,PDI)表示,MDI评分或PDI评分<80分定义为评分异常。利用广义估计方程,分析孕早、中、晚三期尿中可替宁水平与2岁儿童神经认知发育情况的关联。结果本研究纳入989对母子对,经尿比重校正后孕早、中、晚期尿液中可替宁浓度的M(P 25,P 75)分别为3.49(2.14,6.33)、3.48(1.99,6.30)和2.61(1.45,4.80)ng/mL。调整潜在混杂因素后,孕早期尿液中可替宁水平每升高1个ln浓度,MDI评分降低1.66(95%CI:-2.97,-0.35)分。在调整混杂因素后,孕早、中期尿液中可替宁的浓度与儿童MDI评分异常的风险之间存在显著的正向关联,OR(95%CI)值分别为1.25(1.03,1.51)、1.26(1.04,1.53)。未发现孕早、中、晚期尿液可替宁浓度与儿童PDI评分或者PDI评分异常之间的关联(P>0.05)。结论孕早、中期尿可替宁水平与2岁儿童神经认知发育呈显著负相关。可替宁是尼古丁的主要代谢产物,因此孕妇在孕早、中期应该避免尼古丁暴露以降低儿童神经认知发育异常的风险。展开更多
Vanadium redox flow batteries(VRFBs)are one of the most promising energy storage systems owing to their safety,efficiency,flexibility and scalability.However,the commercial viability of VRFBs is still hindered by the ...Vanadium redox flow batteries(VRFBs)are one of the most promising energy storage systems owing to their safety,efficiency,flexibility and scalability.However,the commercial viability of VRFBs is still hindered by the low electrochemical performance of the available carbon-based electrodes.Defect engineering is a powerful strategy to enhance the redox catalytic activity of carbon-based electrodes for VRFBs.In this paper,uniform carbon defects are introduced on the surfaces of carbon felt(CF)electrode by Ar plasma etching.Together with a higher specific surface area,the Ar plasma treated CF offers additional catalytic sites,allowing faster and more reversible oxidation/reduction reactions of vanadium ions.As a result,the VRFB using plasma treated electrode shows a power density of 1018.3 mW/cm^(2),an energy efficiency(EE)of 84.5%,and the EE remains stable over 1000 cycles.展开更多
文摘【目的】本研究旨在克隆西方蜜蜂Apis mellifera RNA m 6A甲基转移酶14(methyltransferase 14,METTL14)基因AmMETTL14,分析AmMETTL14的理化性质和分子特性以及AmMETTL14在工蜂不同发育阶段和不同组织中的表达模式,并制备AmMETTL14多克隆抗体,为持续深入开展AmMETTL14的功能研究提供参考和基础。【方法】通过PCR扩增西方蜜蜂AmMETTL14的CDS并进行Sanger测序验证。使用相关生物信息学软件对AmMETTL14进行生物信息学分析,并构建系统进化树。通过原核表达系统诱导表达AmMETTL14融合蛋白,免疫新西兰白兔以制备多克隆抗体,利用ELISA和Western blot分别检测抗体的效价及特异性。采用RT-qPCR检测AmMETTL14在卵、幼虫、预蛹、蛹及工蜂成虫中以及刚出房工蜂成虫的触角、毒腺、脑、中肠、咽下腺、脂肪体和表皮7种组织中的相对表达量。【结果】成功克隆到西方蜜蜂AmMETTL14的CDS;AmMETTL14的分子式为C 1957 H 3113 N 567 O 589 S 15,分子量约为44.49 kD,脂溶系数为79.97,理论等电点为8.58,平均亲水系数为-0.59,不含典型的跨膜结构域和信号肽,可同时定位于细胞核、线粒体和细胞质;西方蜜蜂、中华蜜蜂A.cerana cerana、黑大蜜蜂A.laboriosa、东方蜜蜂A.cerana、大蜜蜂A.dorsata、小蜜蜂A.florea、欧洲熊蜂Bombus terrestris、金环胡蜂Vespa mandarinia、美洲东部熊蜂B.impatiens和黑腹果蝇Drosophila melanogaster的METTL14均含有MT-A70结构域和3个相同的保守基序;AmMETTL14与黑大蜜蜂的METTL14的氨基酸序列一致性最高(65.60%)且亲缘关系最近。制备的AmMETTL14多克隆抗体效价较高(大于512 K)且特异性较强。AmMETTL14在7和8日龄预蛹与卵中的表达量相近且均显著高于在3日龄幼虫中的表达量,在12日龄蛹中的表达量显著高于卵、幼虫和预蛹中的表达量,在6,12和15日龄工蜂成虫体内的表达量显著高于1日龄工蜂成虫体内的表达量;AmMETTL14在刚出房工蜂成虫脑和咽下腺中的表达量与触角中的表达量相近且均显著高于在毒腺、中肠、脂肪体和表皮中的表达量。【结论】研究结果表明,AmMETTL14可能为亲水性、非跨膜和胞内蛋白,AmMETTL14在幼虫生长发育中发挥潜在的调控作用,制备得到的AmMETTL14的多克隆抗体效价高、灵敏度高和特异性强,为进一步探究AmMETTL14的功能及其参与的表观调控机制打下了基础。
文摘目的分析孕妇尿可替宁水平与2岁儿童神经认知发育的关联,探究孕妇尿可替宁水平对儿童神经发育产生影响的敏感窗口期。方法基于武汉市的一项出生队列研究,利用贝利婴幼儿发展量表—中国城市修订版评估队列中2岁儿童的神经认知发育情况,评估结果由智力发展指数(mental development index,MDI)和运动发展指数(psychomotor development index,PDI)表示,MDI评分或PDI评分<80分定义为评分异常。利用广义估计方程,分析孕早、中、晚三期尿中可替宁水平与2岁儿童神经认知发育情况的关联。结果本研究纳入989对母子对,经尿比重校正后孕早、中、晚期尿液中可替宁浓度的M(P 25,P 75)分别为3.49(2.14,6.33)、3.48(1.99,6.30)和2.61(1.45,4.80)ng/mL。调整潜在混杂因素后,孕早期尿液中可替宁水平每升高1个ln浓度,MDI评分降低1.66(95%CI:-2.97,-0.35)分。在调整混杂因素后,孕早、中期尿液中可替宁的浓度与儿童MDI评分异常的风险之间存在显著的正向关联,OR(95%CI)值分别为1.25(1.03,1.51)、1.26(1.04,1.53)。未发现孕早、中、晚期尿液可替宁浓度与儿童PDI评分或者PDI评分异常之间的关联(P>0.05)。结论孕早、中期尿可替宁水平与2岁儿童神经认知发育呈显著负相关。可替宁是尼古丁的主要代谢产物,因此孕妇在孕早、中期应该避免尼古丁暴露以降低儿童神经认知发育异常的风险。
基金Project(Xiang Zu [2016] 91) supported by the “100 Talented Teams” of Hunan Province,ChinaProject(2018RS3077) supported by the Huxiang High-level Talents Program,China+2 种基金Project(22002009) supported by the National Natural Science Foundation of ChinaProject(2021JJ40565) supported by the Natural Science Foundation of Hunan Province,ChinaProject(19C0054) supported by the Scientific Research Foundation of Hunan Provincial Education Department,China。
文摘Vanadium redox flow batteries(VRFBs)are one of the most promising energy storage systems owing to their safety,efficiency,flexibility and scalability.However,the commercial viability of VRFBs is still hindered by the low electrochemical performance of the available carbon-based electrodes.Defect engineering is a powerful strategy to enhance the redox catalytic activity of carbon-based electrodes for VRFBs.In this paper,uniform carbon defects are introduced on the surfaces of carbon felt(CF)electrode by Ar plasma etching.Together with a higher specific surface area,the Ar plasma treated CF offers additional catalytic sites,allowing faster and more reversible oxidation/reduction reactions of vanadium ions.As a result,the VRFB using plasma treated electrode shows a power density of 1018.3 mW/cm^(2),an energy efficiency(EE)of 84.5%,and the EE remains stable over 1000 cycles.
