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基于助推器无控再入稳定性分析的落点预示方法
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作者 张意国 赵长见 +1 位作者 高峰 李玉龙 《兵器装备工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期81-86,共6页
运载火箭助推器分离后的落点预示对于安全区的管控及回收系统的设计十分重要,然而助推器再入过程由于失去姿态控制能力导致姿态运动范围大、运动规律复杂,传统型号往往采用极限偏差组合或六自由度打靶的手段来进行助推器落点范围的预示... 运载火箭助推器分离后的落点预示对于安全区的管控及回收系统的设计十分重要,然而助推器再入过程由于失去姿态控制能力导致姿态运动范围大、运动规律复杂,传统型号往往采用极限偏差组合或六自由度打靶的手段来进行助推器落点范围的预示,存在预示范围过大、预示方法对落点预示范围正向设计指导意义不足的问题。采用一种基于非线性动平衡理论的分析方法,分析助推器无控再入过程三通道耦合姿态运动动态稳定特性,辨识固有周期性姿态运动模态,针对有限固有模态建立等效质点运动受力建模,快速、精确分析助推器分离后的落点范围,并能够对助推器特征参数对落区范围影响进行灵敏度分析,指导落区范围正向设计。仿真结果表明:该方法相较极限偏差组合法大幅提升助推器落点预示精度,相较六自由度打靶法更高效、更具有设计指导意义,为火箭助推类飞行器的航区安全性设计提供了重要支撑。 展开更多
关键词 非线性动平衡 模态辨识 助推器 无控 落点预示
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动力蛋白相关蛋白1抑制剂对肠黏膜上皮细胞缺血再灌注损伤的干预作用及其机制
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作者 图拉妮萨·喀迪尔 张贻帼 +5 位作者 景祎馨 廖师师 罗杰 丁可 陈榕 孟庆涛 《山东医药》 CAS 2024年第5期31-34,共4页
目的探讨动力蛋白相关蛋白1(Drp1)抑制剂对肠黏膜上皮细胞缺血再灌注损伤的干预作用并分析其机制。方法将人大肠黏膜上皮细胞系Caco-2分为对照组、模型组、Drp1抑制剂组,对照组正常培养细胞,模型组、Drp1抑制剂组均采用缺氧12 h后复氧2 ... 目的探讨动力蛋白相关蛋白1(Drp1)抑制剂对肠黏膜上皮细胞缺血再灌注损伤的干预作用并分析其机制。方法将人大肠黏膜上皮细胞系Caco-2分为对照组、模型组、Drp1抑制剂组,对照组正常培养细胞,模型组、Drp1抑制剂组均采用缺氧12 h后复氧2 h的方法构建缺氧复氧模型,Drp1抑制剂组在H/R前给予Drp1抑制剂Mdivi-1干预。采用CCK-8法检测细胞活力,线粒体超氧化物指示剂检测线粒体活性氧(ROS)含量,JC-1法检测线粒体膜电位,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞Drp1、线粒体融合蛋白2(Mfn2)蛋白。结果细胞活力对照组>Drp1抑制剂组>模型组(P均<0.05);细胞内线粒体ROS含量模型组>Drp1抑制剂组>对照组,线粒体膜电位对照组>Drp1抑制剂组>模型组(P均<0.05);细胞凋亡率模型组>Drp1抑制剂组>对照组(P均<0.05);细胞Drp1蛋白表达模型组>Drp1抑制剂组>对照组,Mfn2蛋白表达对照组>Drp1抑制剂组>模型组(P均<0.05)。结论Drp1抑制剂可减轻肠黏膜上皮细胞缺血再灌注损伤,其机制可能与改善线粒体功能障碍、减少细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 动力蛋白相关蛋白1 肠缺血再灌注损伤 线粒体融合蛋白2 线粒体功能 线粒体动力学
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基于FMQL的多通道数据采集实验平台设计与实现
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作者 马文建 张毅果 +3 位作者 陈凯 盛瀚民 周文建 陈世龙 《实验科学与技术》 2024年第5期20-27,共8页
为丰富电子信息类实验课教学内容,提高学生的系统工程能力,激发学生的学习热情和探索潜能,设计了一种基于FMQL的多通道数据采集全国产化实验平台。该平台利用集成FPGA和ARM的FMQL系列片上系统(SoC)芯片作为处理器,采用内部高级可扩展接... 为丰富电子信息类实验课教学内容,提高学生的系统工程能力,激发学生的学习热情和探索潜能,设计了一种基于FMQL的多通道数据采集全国产化实验平台。该平台利用集成FPGA和ARM的FMQL系列片上系统(SoC)芯片作为处理器,采用内部高级可扩展接口(AXI)总线实现采集数据的高速传输。通过该实验平台,使学生深入理解FPGA+ARM的体系架构,培养学生的软硬件协同设计与分析能力,引导学生认识信息技术自主可控对国家安全的重要性与紧迫性,推进新工科挑战性学习与研究型教学体系的建设与改革。 展开更多
关键词 FMQL 多通道数据采集 自主可控 软硬件协同设计
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轨道交通封站条件下应急疏散车辆路径优化 被引量:1
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作者 张仪果 屈云超 +1 位作者 尹浩东 吴建军 《山东科学》 CAS 2023年第4期80-88,共9页
针对轨道交通封站条件下站外滞留乘客需要应急疏散的现实需求,设计了一种疏散服务模式,在保证滞留旅客有效疏散的前提下,允许线路沿途旅客搭乘以提高车辆的利用效率。以车辆运营成本和乘客时间成本之和最小为优化目标,建立应急疏散车辆... 针对轨道交通封站条件下站外滞留乘客需要应急疏散的现实需求,设计了一种疏散服务模式,在保证滞留旅客有效疏散的前提下,允许线路沿途旅客搭乘以提高车辆的利用效率。以车辆运营成本和乘客时间成本之和最小为优化目标,建立应急疏散车辆路径优化模型,根据问题特点改进自适应大邻域搜索算法进行模型求解。最后,结合北京市城市交通数据,对应急疏散车辆进行路线设计并进行灵敏度分析,用算例验证了模型与算法的有效性。结果表明,相较于最短路径疏散方案,模型的优化结果节省了15.02%的乘客乘车时间,能够在保证乘客出行体验的前提下实现对站点滞留乘客的快速疏散,提升封站事件下轨道交通应急管理的精细化水平。 展开更多
关键词 城市轨道交通 应急疏散 车辆路径问题 轨道交通封站 自适应大邻域搜索算法
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肠道微生物群及其代谢物在肠缺血再灌注损伤中的研究进展
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作者 潘锐 景祎馨 +3 位作者 张贻帼 丁可 陈榕 孟庆涛 《医学综述》 CAS 2023年第16期3190-3196,共7页
肠缺血再灌注(IIR)损伤是一类病死率较高的危重病症,目前临床尚缺乏预防和治疗IIR损伤的有效措施。肠道微生物群及其代谢物在IIR损伤的发生、发展、诊断和治疗过程中起关键作用。不同肠道细菌的丰度、组成及其主要代谢物(短链脂肪酸、... 肠缺血再灌注(IIR)损伤是一类病死率较高的危重病症,目前临床尚缺乏预防和治疗IIR损伤的有效措施。肠道微生物群及其代谢物在IIR损伤的发生、发展、诊断和治疗过程中起关键作用。不同肠道细菌的丰度、组成及其主要代谢物(短链脂肪酸、次级胆汁酸和色氨酸代谢物等)水平变化可从不同角度阐述IIR损伤的致病机制,改变肠道微生物及其代谢产物水平可影响IIR的肠道损伤。因此,深入研究肠道微生物群及其代谢物在IIR中的作用机制,可以为IIR损伤的诊断、预防和治疗提供关键靶点。 展开更多
关键词 肠缺血再灌注损伤 肠道微生物群 肠道微生物代谢物
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2022年我国地热能发展进展及建议 被引量:1
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作者 陈龙 乔勇 +1 位作者 张益国 姜海 《水力发电》 CAS 2023年第12期1-4,63,共5页
为深入贯彻落实《关于促进地热能开发利用的若干意见》要求,多地从规划布局、示范项目建设、科技创新、行业管理以及政策支持等方面发力,推动我国地热产业高质量跃升发展。各地积极布局地热资源勘查和开发利用,将地热资源勘查开发作为... 为深入贯彻落实《关于促进地热能开发利用的若干意见》要求,多地从规划布局、示范项目建设、科技创新、行业管理以及政策支持等方面发力,推动我国地热产业高质量跃升发展。各地积极布局地热资源勘查和开发利用,将地热资源勘查开发作为重点工作纳入各类发展规划,加大地热示范项目建设力度;技术创新聚焦深部热储和深井换热,研发智能钻机及余热热泵;行业主管部门直面发展堵点,出台地热管理办法及实施细则,推动全国地热能项目信息化管理。2022年,我国地热能产业取得全面的实质性进展,地热资源逐步探明,规模化发展目标再上新台阶,科技创新明显突破,装备国产化水平稳步提高,开发管理逐步规范有序,信息化管理从无到有。 展开更多
关键词 地热能开发 技术创新 地热管理 地热政策 发展建议 中国
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窄基钢管塔振动特性的有限元分析 被引量:3
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作者 王璋奇 张益国 岑添添 《电力科学与工程》 2019年第8期30-35,共6页
输电工程中的小根开铁塔(简称窄基塔),占地面积小,经济效益高,可以满足立塔受限区段(地形陡峭、场地狭窄等)的工程需要。针对河北电力勘探设计研究院提出的窄基钢管塔模块,利用ANSYS对其中的GSZ2窄基钢管塔进行有限元动力分析,给出了窄... 输电工程中的小根开铁塔(简称窄基塔),占地面积小,经济效益高,可以满足立塔受限区段(地形陡峭、场地狭窄等)的工程需要。针对河北电力勘探设计研究院提出的窄基钢管塔模块,利用ANSYS对其中的GSZ2窄基钢管塔进行有限元动力分析,给出了窄基钢管塔的前5阶振动频率和振型;计算得到不同斜材模型下窄基钢管塔的前5阶振动频率,分析了不同斜材模型对窄基塔振动频率的影响。研究结果表明:相同阶次的横向弯曲和纵向弯曲的频率非常接近;在有限元模型中,考虑辅材的影响而将斜材简化成梁单元后,计算得到的各阶振动频率较斜材为杆单元时的各阶振动频率略有降低。 展开更多
关键词 窄基钢管塔 动力特性 斜材模型
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致密低渗气藏水平井新的产能评价“一点法” 被引量:7
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作者 曹朋亮 杨小松 +3 位作者 张一果 孟洁 李媛 李登伟 《油气井测试》 2019年第6期1-8,共8页
针对致密低渗气藏水平井修正等时测试井底流压难稳定、二项式曲线倒转的不足,依据该气藏水平井修正等时试井的理论,运用压力叠加原理,提出该类气藏水平井有效快速产能评价"一点法"。运用该方法对实际水平井修正等时测试资料... 针对致密低渗气藏水平井修正等时测试井底流压难稳定、二项式曲线倒转的不足,依据该气藏水平井修正等时试井的理论,运用压力叠加原理,提出该类气藏水平井有效快速产能评价"一点法"。运用该方法对实际水平井修正等时测试资料进行分析,解释的指数式方程系数为0.98,紊流效应极弱;在气田储层参数范围内分析储层有效渗透率、水平井有效长度、储层有效厚度对水平井紊流效应压降的影响,发现紊流效应压降在总压降中占比低于1%,紊流效应可忽略,二项式产能方程可简化为层流方程。该"一点法"只需求一个产能方程系数,较大程度节省测试时间,可为致密低渗气藏水平井产能评价提供技术支撑。 展开更多
关键词 致密气藏 水平井 产能方程 紊流效应 试井解释 修正等时试井
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间充质干细胞对髓源性抑制细胞免疫应答负性调控作用的影响 被引量:1
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作者 闵珂婷 张一国 +1 位作者 杨浩 吕欣 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第19期3084-3089,共6页
背景:髓源性抑制细胞是骨髓来源的一类异质性细胞群,能够抑制T细胞的功能,发挥免疫抑制作用。间充质干细胞是一种多能干细胞,可抑制先天性和适应性免疫反应。髓源性抑制细胞和间充质干细胞在免疫抑制功能上有许多相似之处,在肿瘤、炎症... 背景:髓源性抑制细胞是骨髓来源的一类异质性细胞群,能够抑制T细胞的功能,发挥免疫抑制作用。间充质干细胞是一种多能干细胞,可抑制先天性和适应性免疫反应。髓源性抑制细胞和间充质干细胞在免疫抑制功能上有许多相似之处,在肿瘤、炎症、移植等方面可产生相互联系。目的:综述基于髓源性抑制细胞的作用机制以及间充质干细胞对髓源性抑制细胞免疫应答负性调控作用的影响。方法:应用计算机检索Web of Science Core Collection数据库的相关文献,英文检索词为"Myeloid-derived suppressor cells""Mesenchymal stem cells""Stem cells",按纳入排除标准最终纳入49篇文献进行综述。结果与结论:髓源性抑制细胞通过分泌精氨酸酶1、诱导型一氧化氮合酶和吲哚胺2,3-双加氧酶等在体内发挥重要的免疫抑制功能。髓源性抑制细胞与间充质干细胞在自身免疫性疾病、器官移植、炎症感染、肿瘤等多种疾病治疗过程中通过不同机制相互作用,使肿瘤细胞逃避免疫监控,促进肿瘤进一步发展。在非肿瘤疾病中,髓源性抑制细胞发挥一定的良性调节作用,弱化机体自身的免疫反应,进而改善临床症状。 展开更多
关键词 髓源性抑制细胞 间充质干细胞 免疫抑制 肿瘤 炎症 器官移植 综述
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窄基钢管塔体型系数的风洞模拟试验研究 被引量:1
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作者 张益国 王璋奇 《电力科学与工程》 2020年第4期59-64,共6页
窄基钢管塔以占地面积小、经济效益高、谐调人文和自然环境而得到城市规划与建设的关注。采用风洞模拟的方法,制做窄基钢管塔的试验模型,利用风洞模拟均匀流场和均匀紊流场,测量不同风速、来流方向时窄基钢管塔横担、塔身、整塔的受力情... 窄基钢管塔以占地面积小、经济效益高、谐调人文和自然环境而得到城市规划与建设的关注。采用风洞模拟的方法,制做窄基钢管塔的试验模型,利用风洞模拟均匀流场和均匀紊流场,测量不同风速、来流方向时窄基钢管塔横担、塔身、整塔的受力情况,获得窄基钢管塔各部位的风载荷数据,并依据《钢结构设计规范》将各载荷转换成相应的系数,得到了横担载荷系数、塔身载荷系数及横担升力系数等随来流方向的变化规律。最后,结合试验结果分析了不同设计规范之间的差别,给出了窄基钢管塔设计所需要的体型系数值。 展开更多
关键词 输电线路 窄基钢管塔 体型系数 风洞试验
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苏里格气田东二区气水分布及产水控制因素分析 被引量:8
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作者 林孟雄 刘立 +2 位作者 张一果 常森 夏阳 《吉林大学学报(地球科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第2期627-634,共8页
针对低孔、低渗的致密砂岩气藏高效持续开发急需解决的气水分布及产水控制因素问题,通过苏里格气田东二区气藏地质和生产动态资料的综合分析,得出以下主要认识:地质构造和生烃强度控制本区气水分布的宏观格局,高产气井绝大多数发育在近... 针对低孔、低渗的致密砂岩气藏高效持续开发急需解决的气水分布及产水控制因素问题,通过苏里格气田东二区气藏地质和生产动态资料的综合分析,得出以下主要认识:地质构造和生烃强度控制本区气水分布的宏观格局,高产气井绝大多数发育在近烃源岩的低洼部位或微幅构造上;储层物性参数对气水分布起着关键的控制作用,物性好的砂体毛细管阻力小,天然气更易于驱替储集条件好的砂岩储层中的地层水形成气层,研究区气层孔隙度介于7%~14%之间,渗透率为(0.50~2.00)×10^-3μm^2;泥岩隔层等因素造成气水分布的复杂化,随着下伏山1段泥岩隔层厚度的增大,对应区域盒8段日产气量减小,日产水量增加;致密砂岩气藏产能受开发方式的影响很大,在气藏合理配产过程中,需要考虑压敏及速敏效应的影响:投产时间越长、配产及生产压差越大,气井出水速率越快,出水量越大。采用水平井开发,可增加气井的泄流面积、减小生产压差、提高产能、降低水气比,可以实现延长无水或低水采气期,从而提高采收率。 展开更多
关键词 苏里格气田 气水分布 孔隙度 渗透率 控制因素 开发方式 采收率
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基于多因子约束P中值模型的充电桩布局优化研究 被引量:8
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作者 陈振 王伟贤 +3 位作者 李卓群 张祎果 孙舟 孙绪坤 《北京交通大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期93-99,共7页
合理、高效的供电网络配置是降低充电桩火灾危险性,确保电动汽车安全推广的重要保障.针对充电桩布局中距离远、负载大的问题,首先,通过分析电动汽车用户充电时的效率导向,在考虑传统配置优化模型资源分布不均衡的基础上,利用充电需求、... 合理、高效的供电网络配置是降低充电桩火灾危险性,确保电动汽车安全推广的重要保障.针对充电桩布局中距离远、负载大的问题,首先,通过分析电动汽车用户充电时的效率导向,在考虑传统配置优化模型资源分布不均衡的基础上,利用充电需求、平均续航时间以及服务能力等参数对其配置公平性进行约束,建立了以出行效率和服务能力为求解思想的多因子约束P中值模型.然后,以该模型特征为依据,选取贪心算法对模型进行启发式求解,通过Matlab分段计算距离矩阵,构造各阶段局部最优解,在局部最优解的基础上迭代计算进而得到全局最优解.最后,通过实例进行验证,验证结果表明:模型优化后各布局点的资源均衡性和充电便捷性均得到显著提升,有效改善了充电需求点对供电配置网络的负载压力. 展开更多
关键词 电动汽车 充电桩 多因子约束P中值模型 布局优化
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苏里格气田苏东区块多层产量劈分新方法 被引量:4
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作者 林孟雄 成育红 +3 位作者 张林 王予 张一果 李鑫 《新疆地质》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期419-421,共3页
苏里格气田苏东区开发中虽然其主力层盒8、山1突出,但大部分井2-4层合层生产,因此造成地质、生产研究中对单层产量的获取和指标计算存在困难。本文旨在寻找劈分单层产量的新方法,通过数理分析、数值模拟等方法对单层产量进行劈分,分析... 苏里格气田苏东区开发中虽然其主力层盒8、山1突出,但大部分井2-4层合层生产,因此造成地质、生产研究中对单层产量的获取和指标计算存在困难。本文旨在寻找劈分单层产量的新方法,通过数理分析、数值模拟等方法对单层产量进行劈分,分析合层开采的影响因素,进而通过计算得到单层产量,为单层技术指标评价及后续多层系开发提供技术保障。 展开更多
关键词 合层开采 产量劈分 丛式井
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气井积液预警新方法应用技术研究 被引量:4
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作者 常森 马旭 +3 位作者 李和清 张一果 张紫阳 梁永恒 《钻采工艺》 CAS 北大核心 2019年第6期62-65,I0004,共5页
随着苏东地区开发的逐渐深入,积液井比例逐年升高,气井积液降产超过40×104m3/d。为解决现场常用积液判识方法不能预警气井积液的现状,给出了管流模型-动能因子气井积液预警判识方法,绘制了新井与连续油管井不同动能因子下配产与井... 随着苏东地区开发的逐渐深入,积液井比例逐年升高,气井积液降产超过40×104m3/d。为解决现场常用积液判识方法不能预警气井积液的现状,给出了管流模型-动能因子气井积液预警判识方法,绘制了新井与连续油管井不同动能因子下配产与井底流压关系图版,对于预警气井积液、制定合理的新井配产、确定连续油管接替时机等具有重要意义。 展开更多
关键词 积液预警 动能因子 应用技术
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苏东气藏地层压力与单位压降产气量分布特征分析
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作者 成育红 张一果 +2 位作者 杨洋 封莉 邓宝康 《重庆科技学院学报(自然科学版)》 CAS 2019年第4期51-55,共5页
苏东地区大多数井采用快速投产、井下节流等新工艺,利用常规的压力动态监测方法难以准确获取地层中部的压力。结合苏东气藏的实际情况,建立了新的地层压力评价方法,将表面套管压力转化为地层压力,应用于苏东气藏地层压力及单位压降产气... 苏东地区大多数井采用快速投产、井下节流等新工艺,利用常规的压力动态监测方法难以准确获取地层中部的压力。结合苏东气藏的实际情况,建立了新的地层压力评价方法,将表面套管压力转化为地层压力,应用于苏东气藏地层压力及单位压降产气量分布特征分析。 展开更多
关键词 苏东气藏 地层压力 套压 压降 产气量
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Maiden Flight of Smart Dragon 1——The Smallest Launch Vehicle in China
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作者 GONG Min zhang yiguo +2 位作者 GAO Feng REN Xinyu zhang Dong 《Aerospace China》 2019年第3期27-34,共8页
The Smart Dragon 1(SD-1) launch vehicle is the first commercial rocket developed by China Academy of Launch Vehicle Technology(CALT), targeting to the international launch market for small satellites. As the smallest ... The Smart Dragon 1(SD-1) launch vehicle is the first commercial rocket developed by China Academy of Launch Vehicle Technology(CALT), targeting to the international launch market for small satellites. As the smallest launch vehicle in China at present, SD-1 is one of the most efficient solid boost rockets nationwide in terms of launch capacity. Compared with current domestic rockets, it provides remarkable access to space with a faster response, higher orbit-injection accuracy and better payload accommodation at a lower cost. On August 17, 2019, SD-1 completed its maiden flight and delivered three satellites into the desired Sun Synchronous Orbit(SSO) of 550 km accurately. In this article, a technical review of SD-1 is presented detailing the design concept and the use of state of the art technology throughout its development. 展开更多
关键词 SD-1 smallest launch vehicle cost control commercial launch market
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外泌体miRNA提取方法的建立及优化
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作者 张益国 张美美 +4 位作者 王丽丽 王小鑫 马磊 张婷婷 陈国柱 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第5期598-604,共7页
目的建立及优化外泌体miRNA的提取方法,并与传统方法进行比较。方法以MSC、NK、CIK细胞外泌体miRNA为研究对象,用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测gDNA去除柱对外泌体miRNA中基因组DNA的去除效果;并以浓度、纯度及基因表达水平(Ct值... 目的建立及优化外泌体miRNA的提取方法,并与传统方法进行比较。方法以MSC、NK、CIK细胞外泌体miRNA为研究对象,用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测gDNA去除柱对外泌体miRNA中基因组DNA的去除效果;并以浓度、纯度及基因表达水平(Ct值)为评价指标,优化提取方法中的裂解液(外泌体G2裂解液及外泌体miRNA裂解液)及聚集试剂(无水乙醇及异丙醇)。采用建立的方法、Trizol法及Trizol磁珠法提取MSC、NK、CIK细胞外泌体及健康人血清外泌体miRNA,进行实时荧光定量PCR检测。结果gDNA去除柱可有效去除外泌体miRNA中的基因组DNA。外泌体miRNA裂解液提取MSC、NK、CIK细胞外泌体miRNA的浓度均显著高于外泌体G2裂解液(t=6.358,P=0.020);外泌体G2裂解液提取的miRNA样品纯度均偏低,存在杂蛋白污染,而外泌体miRNA裂解液可有效去除污染;外泌体miRNA裂解液提取CIK细胞外泌体miRNA的miR⁃Let⁃7i、miR⁃16⁃1、miR⁃150基因Ct值明显低于外泌体G2裂解液(t=30.120,P=0.008)。异丙醇提取MSC、NK、CIK细胞外泌体miRNA的浓度明显高于无水乙醇(t=8.567,P=0.010),纯度明显高于无水乙醇(t=6.214,P=0.020);两种聚集试剂提取CIK细胞外泌体miRNA的miR⁃Let⁃7i、miR⁃16⁃1、miR⁃150基因Ct值差异均无统计学意义(t=2.297,P=0.120)。与Trizol法及Trizol磁珠法比较,采用建立方法提取CIK、NK、MSC细胞及健康人血清外泌体miRNA的miR⁃Let⁃7i、miR⁃16⁃1、miR⁃Let⁃7a、miR⁃150基因表达量更丰富,总体Ct值较低;且熔解峰较突出、尖锐,表现为单一主峰。结论采用建立的方法提取的外泌体miRNA具有较高的浓度及纯度,Ct值稳定,且具有较高的灵敏度及良好的特异性。本研究为外泌体miRNA的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 外泌体miRNA 裂解液 聚集试剂 实时荧光定量PCR法
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高效提取细胞培养上清外泌体方法的建立
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作者 王小鑫 王丽丽 +4 位作者 张益国 高姣 马磊 张婷婷 陈国柱 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第8期975-982,988,共9页
目的建立一种快速、简单且高效提取细胞培养上清中外泌体的方法,以期促进外泌体在临床与疾病治疗中的应用。方法将羟基(OH)修饰磁珠与高分子化合物Buffer EXD结合,建立新的外泌体提取系统,并使用该系统提取细胞培养上清中的外泌体。通过... 目的建立一种快速、简单且高效提取细胞培养上清中外泌体的方法,以期促进外泌体在临床与疾病治疗中的应用。方法将羟基(OH)修饰磁珠与高分子化合物Buffer EXD结合,建立新的外泌体提取系统,并使用该系统提取细胞培养上清中的外泌体。通过Western blot法检测外泌体标志蛋白的表达变化;纳米颗粒追踪分析(nanoparticles tracking analysis,NTA)技术检测外泌体的粒径大小和浓度;透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)技术检测外泌体的形态结构。对Buffer EXD系统提取外泌体的方法进行优化(提取pH、Buffer EXD比例、孵育时间、磁珠用量及种类)。结合细胞培养和显微拍照技术分析新系统纯化的外泌体对A549细胞增殖的影响。结果新系统提取的外泌体样品中标志蛋白Alix、CD9和CD81等表达水平较高,而外泌体阴性蛋白Calnexin表达较少;新系统提取的外泌体粒径峰值在100 nm左右,具有茶托状的典型形状。新系统的pH为5.0,Buffer EXD浓度为20%,1.75%的OH磁珠与样品孵育时间为40 min时,提取的外泌体样品中标志蛋白含量最高。新系统提取的外泌体对A549细胞的增殖具有明显的促进作用。结论以OH修饰的磁珠为介质,结合高分子化合物Buffer EXD,成功建立了一种可快速、简单、高效地从细胞上清中提取结构完整、形态特征明显且具有生物学功能外泌体的新体系。 展开更多
关键词 外泌体 细胞培养上清 高分子化合物Buffer EXD 磁珠
原文传递
线粒体钙离子单向转运蛋白在Caco-2细胞缺氧复氧损伤中的作用及机制
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作者 图拉妮萨·喀迪尔 罗杰 +4 位作者 廖师师 景怡馨 张贻帼 陈榕 孟庆涛 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2024年第5期515-519,共5页
目的:探讨线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)在Caco-2细胞缺氧复氧损伤中的作用机制。方法:取正常对数期生长的Caco-2细胞,随机分为4组:对照组(CTL)(n=6)、对照+Ru360组(CTL+Ru360)(n=6)、缺氧/复氧组(H/R组)(n=6)、缺氧/复氧+Ru360组(H/R+... 目的:探讨线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)在Caco-2细胞缺氧复氧损伤中的作用机制。方法:取正常对数期生长的Caco-2细胞,随机分为4组:对照组(CTL)(n=6)、对照+Ru360组(CTL+Ru360)(n=6)、缺氧/复氧组(H/R组)(n=6)、缺氧/复氧+Ru360组(H/R+Ru360组)(n=6)。培养Caco-2细胞,采用缺氧12 h、复氧2 h的方法进行缺氧/复氧建立肠缺血再灌注损伤细胞模型。缺氧/复氧刺激前1 h予以MCU抑制剂Ru360干预。采用CCK-8法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞损伤情况,活性氧(ROS)检测试剂盒测定线粒体ROS水平,用JC-1标记的荧光探针检测线粒体膜电位水平,ATP检测试剂盒检测ATP含量,用Rhod-2 AM检测线粒体钙离子含量,Western Blot法检测细胞MCU蛋白表达水平。结果:与CTL组比较,H/R组细胞活力降低,LDH水平升高,细胞凋亡增加,线粒体膜电位降低,ATP含量降低,线粒体ROS产生增加,MCU蛋白水平增高,线粒体钙离子水平增加(P<0.05);经Ru360处理后,与H/R组比较,H/R+Ru360组细胞活力升高,LDH水平降低,细胞凋亡减少,线粒体膜电位升高,ATP含量升高,线粒体ROS产生减少,MCU蛋白水平降低,线粒体钙离子水平减少(P<0.05);CTL组与CTL+Ru360组比较上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Ru360抑制MCU激活,维持线粒体钙稳态,减轻线粒体功能障碍,从而保护Caco-2细胞H/R诱导的损伤。 展开更多
关键词 缺血再灌注 线粒体钙单向转运蛋白 缺氧/复氧损伤 线粒体 线粒体功能
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Ghrelin通过促进Sirt1表达激活自噬减轻肠缺血再灌注损伤
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作者 廖师师 张乐乐 +5 位作者 张贻帼 丁可 罗杰 图拉妮萨·喀迪尔 陈榕 孟庆涛 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2024年第6期643-650,共8页
目的:研究生长激素释放肽Ghrelin和Sirt1在肠缺血再灌注(IIR)损伤中的作用。方法:SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠24只,采用随机数字表法分为4组:假手术组(S组,n=6)、肠缺血再灌注组(IIR组,n=6)、肠缺血再灌注+Ghrelin组(IIR+G组,n=6)、... 目的:研究生长激素释放肽Ghrelin和Sirt1在肠缺血再灌注(IIR)损伤中的作用。方法:SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠24只,采用随机数字表法分为4组:假手术组(S组,n=6)、肠缺血再灌注组(IIR组,n=6)、肠缺血再灌注+Ghrelin组(IIR+G组,n=6)、肠缺血再灌注+Ghrelin+Sirt1抑制剂EX527组(IIR+G+E组,n=6)。采用夹闭肠系膜上动脉根部45 min,恢复血流2 h的方法制备小鼠IIR模型。再灌注结束后处死小鼠取小肠组织,HE染色观察组织病理学变化,透射电镜观察肠组织亚细胞结构,检测小肠组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平、ATP含量,Western Blot和qRT-PCR检测GHSR-1α、Sirt1及自噬关键分子的表达,免疫荧光检测Sirt1和LC3B的共表达情况。结果:与S组相比,IIR组Chiu's评分升高,线粒体明显肿胀且空泡化改变显著,嵴结构破坏严重,肠组织MDA生成增加,SOD活力及ATP含量降低,肠组织自噬体增多,Sqstm1 mRNA、p62蛋白表达下调,Becn1 mRNA、Beclin1蛋白表达上调,Map1lc3b mRNA、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值升高,Ghsr-1α mRNA、GHSR-1α蛋白及Sirt1 mRNA、Sirt1蛋白表达下调(P<0.05);与IIR组相比,IIR+G组Chiu's评分降低,线粒体超微结构破坏部分逆转,能量代谢改善,ATP含量显著增加,MDA生成减少,SOD活性增加,肠组织自噬体增多,Sqstm1 mRNA、p62蛋白表达下调,Becn1 mRNA、Beclin1蛋白表达上调,Map1lc3b mRNA、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,Ghsr-1α mRNA、GHSR-1α蛋白及Sirt1 mRNA、Sirt1蛋白表达上调(P<0.05);与IIR+G组比,IIR+G+E组Chiu's评分升高,线粒体减少且结构破坏加重,肠组织MDA生成增加,SOD活力及ATP含量降低,自噬体减少,Sqstm1 mRNA、p62蛋白表达上调,Becn1 mRNA、Beclin1蛋白表达下调,Map1lc3b mRNA、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值降低,Sirt1 mRNA、Sirt1蛋白表达下调(P<0.05),Ghsr-1α mRNA、GHSR-1α蛋白表达与IIR+G组差异无统计学意义。结论:Ghrelin可能通过促进Sirt1表达激活自噬减轻IIR损伤。 展开更多
关键词 GHRELIN SIRT1 肠缺血再灌注损伤 自噬
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