【目的】目前,越来越多的研究证明环状RNA(circRNA)在牛肌肉发育过程中扮演着重要的角色,但其分子调控机理尚未完善。通过挖掘与牛肌肉发育相关的circRNA的作用机制,为进一步阐明其调控牛肌肉发育的分子机制奠定基础。【方法】以前期分...【目的】目前,越来越多的研究证明环状RNA(circRNA)在牛肌肉发育过程中扮演着重要的角色,但其分子调控机理尚未完善。通过挖掘与牛肌肉发育相关的circRNA的作用机制,为进一步阐明其调控牛肌肉发育的分子机制奠定基础。【方法】以前期分析的增殖期(GM)与成肌分化期(DM)黄牛肌肉干细胞(MuSCs)的RNA-seq测序结果为基础,筛选出显著差异表达的circRNA,circCEP85L。采集新鲜黄牛胎牛的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、肠和胃的组织样本,分离培养黄牛肌肉干细胞并诱导成肌分化,收集黄牛体外培养的GM与DM细胞,分别提取RNA并反转录为cDNA。通过实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,qRT-PCR)检测circCEP85L在不同组织及不同细胞状态的表达规律。同时,设计特异性引物扩增circCEP85L全长,构建过表达载体p-circCEP85L,质粒转染MuSCs后收集过表达circCEP85L细胞样本。以过表达质粒pCD5-ciR细胞样本为对照,采用qRT-PCR、流式细胞术、Western Blot及免疫荧光等技术检测过表达circCEP85L对黄牛MuSCs增殖、凋亡及成肌分化的影响。【结果】PCR电泳结果证明circCEP85L环化位点真实存在。CircCEP85L在多种组织中表达,并在DM期的表达量显著高于GM期(P<0.001);为了进一步探究对circCEP85L黄牛MuSCs的影响。将过表达载体p-circCEP85L与对照载体pCD5-ciR转染体外培养的黄牛MuSCs,继续培养24 h之后,EdU结果表明过表达circCEP85L能显著降低EdU阳性细胞比例(P<0.001);流式周期检测结果表明,过表达circCEP85L增加了G0/G1期细胞比例,显著减少S期细胞比例(P<0.001);流式凋亡结果表明,过表达circCEP85L显著抑制MuSCs的凋亡率(P<0.05)。QRT-PCR及Western blot检测黄牛MuSCs增殖及凋亡相关基因的表达情况,结果表明过表达circCEP85L后显著降低了黄牛MuSCs增殖及凋亡相关基因的mRNA表达水平(P<0.001),凋亡蛋白BAX的表达量也显著降低(P<0.01)。此外,为了检测过表达circCEP85L对黄牛MuSCs成肌分化的影响,在转染24h后更换分化培养基诱导细胞分化,Western blot及免疫荧光结果显示过表达circCEP85L后显著促进分化标志基因MyH6的表达水平(P<0.001),细胞融合形成肌管的数量和大小均显著高于对照组。【结论】研究表明,circCEP85L通过抑制黄牛MuSCs增殖和凋亡、促进细胞成肌分化,从而影响黄牛骨骼肌的生长发育过程,为circRNA调控黄牛骨骼肌的生长发育机制研究奠定基础。展开更多
目的通过meta分析系统评价整体性正骨理筋手法治疗膝骨关节炎(KOA)的有效性及安全性。方法检索建库至2022年12月在Pub Med、Web of Science、中国知网、万方数据知识服务平台、维普网发表的评价整体性正骨理筋手法治疗KOA的文献,提取文...目的通过meta分析系统评价整体性正骨理筋手法治疗膝骨关节炎(KOA)的有效性及安全性。方法检索建库至2022年12月在Pub Med、Web of Science、中国知网、万方数据知识服务平台、维普网发表的评价整体性正骨理筋手法治疗KOA的文献,提取文献信息,采用Rev Man 5.4进行meta分析。结果共纳入12项研究,涉及922例KOA患者,其中治疗组464例,对照组458例。治疗组干预措施为整体性正骨理筋手法,对照组干预措施为膝关节局部手法治疗。meta分析结果显示,治疗组总有效率高于对照组(RD=0.15,95%CI:0.10~0.20,P<0.00001)。治疗组视觉模拟评分法评分(MD=-0.80,95%CI:-0.97~-0.63,P<0.00001)、西安大略麦克马斯特大学骨关节炎疼痛评分(MD=-1.19,95%CI:-1.70~-0.68,P<0.00001)、西安大略麦克马斯特大学骨关节炎僵硬评分(MD=-0.61,95%CI:-0.91~-0.31,P<0.0001)、西安大略麦克马斯特大学骨关节炎功能障碍评分(MD=-6.27,95%CI:-7.55~-4.98,P<0.00001)低于对照组。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(RD=0,95%CI:-0.02~0.03,P=0.83)。结论整体性正骨理筋手法治疗KOA在有效性和症状功能改善方面优于膝关节局部手法治疗,受纳入研究数量和质量的限制,尚需更多高质量、大样本研究予以验证。展开更多
文摘【目的】目前,越来越多的研究证明环状RNA(circRNA)在牛肌肉发育过程中扮演着重要的角色,但其分子调控机理尚未完善。通过挖掘与牛肌肉发育相关的circRNA的作用机制,为进一步阐明其调控牛肌肉发育的分子机制奠定基础。【方法】以前期分析的增殖期(GM)与成肌分化期(DM)黄牛肌肉干细胞(MuSCs)的RNA-seq测序结果为基础,筛选出显著差异表达的circRNA,circCEP85L。采集新鲜黄牛胎牛的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、肠和胃的组织样本,分离培养黄牛肌肉干细胞并诱导成肌分化,收集黄牛体外培养的GM与DM细胞,分别提取RNA并反转录为cDNA。通过实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,qRT-PCR)检测circCEP85L在不同组织及不同细胞状态的表达规律。同时,设计特异性引物扩增circCEP85L全长,构建过表达载体p-circCEP85L,质粒转染MuSCs后收集过表达circCEP85L细胞样本。以过表达质粒pCD5-ciR细胞样本为对照,采用qRT-PCR、流式细胞术、Western Blot及免疫荧光等技术检测过表达circCEP85L对黄牛MuSCs增殖、凋亡及成肌分化的影响。【结果】PCR电泳结果证明circCEP85L环化位点真实存在。CircCEP85L在多种组织中表达,并在DM期的表达量显著高于GM期(P<0.001);为了进一步探究对circCEP85L黄牛MuSCs的影响。将过表达载体p-circCEP85L与对照载体pCD5-ciR转染体外培养的黄牛MuSCs,继续培养24 h之后,EdU结果表明过表达circCEP85L能显著降低EdU阳性细胞比例(P<0.001);流式周期检测结果表明,过表达circCEP85L增加了G0/G1期细胞比例,显著减少S期细胞比例(P<0.001);流式凋亡结果表明,过表达circCEP85L显著抑制MuSCs的凋亡率(P<0.05)。QRT-PCR及Western blot检测黄牛MuSCs增殖及凋亡相关基因的表达情况,结果表明过表达circCEP85L后显著降低了黄牛MuSCs增殖及凋亡相关基因的mRNA表达水平(P<0.001),凋亡蛋白BAX的表达量也显著降低(P<0.01)。此外,为了检测过表达circCEP85L对黄牛MuSCs成肌分化的影响,在转染24h后更换分化培养基诱导细胞分化,Western blot及免疫荧光结果显示过表达circCEP85L后显著促进分化标志基因MyH6的表达水平(P<0.001),细胞融合形成肌管的数量和大小均显著高于对照组。【结论】研究表明,circCEP85L通过抑制黄牛MuSCs增殖和凋亡、促进细胞成肌分化,从而影响黄牛骨骼肌的生长发育过程,为circRNA调控黄牛骨骼肌的生长发育机制研究奠定基础。
文摘目的通过meta分析系统评价整体性正骨理筋手法治疗膝骨关节炎(KOA)的有效性及安全性。方法检索建库至2022年12月在Pub Med、Web of Science、中国知网、万方数据知识服务平台、维普网发表的评价整体性正骨理筋手法治疗KOA的文献,提取文献信息,采用Rev Man 5.4进行meta分析。结果共纳入12项研究,涉及922例KOA患者,其中治疗组464例,对照组458例。治疗组干预措施为整体性正骨理筋手法,对照组干预措施为膝关节局部手法治疗。meta分析结果显示,治疗组总有效率高于对照组(RD=0.15,95%CI:0.10~0.20,P<0.00001)。治疗组视觉模拟评分法评分(MD=-0.80,95%CI:-0.97~-0.63,P<0.00001)、西安大略麦克马斯特大学骨关节炎疼痛评分(MD=-1.19,95%CI:-1.70~-0.68,P<0.00001)、西安大略麦克马斯特大学骨关节炎僵硬评分(MD=-0.61,95%CI:-0.91~-0.31,P<0.0001)、西安大略麦克马斯特大学骨关节炎功能障碍评分(MD=-6.27,95%CI:-7.55~-4.98,P<0.00001)低于对照组。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(RD=0,95%CI:-0.02~0.03,P=0.83)。结论整体性正骨理筋手法治疗KOA在有效性和症状功能改善方面优于膝关节局部手法治疗,受纳入研究数量和质量的限制,尚需更多高质量、大样本研究予以验证。
