hKDR^(+/+)人源化及Rag1^(-/-)基因缺陷新型双靶点遗传修饰荷瘤小鼠模型的建立

目的通过增强血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)人源化小鼠(hKDR^(+/+))接纳不同来源的小鼠肿瘤细胞系的潜力,建立能支持多种肿瘤细胞系成瘤的、可评价针对VEGFR靶点药物的新型荷瘤小鼠模型。方法首先建立基于hKDR^(+/+)人源化小鼠模型评价针对VEGFR靶点抗体体内活性的方法,同时采用CRISPR/Cas9技术构建重组激活基因1(recombination activating gene 1,Rag1)敲除的C57BL/6N小鼠(命名为Rag1^(-/-)小鼠)。然后将Rag1^(-/-)小鼠与hKDR^(+/+)小鼠交配,筛选获得双基因纯合、双靶点基因修饰的hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠。最后在hKDR^(+/+)、Rag1^(-/-)、hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)和C57BL/6N小鼠上测试不同小鼠品系来源肿瘤细胞系的体内肿瘤生长差异。结果针对VEGFR靶点设计的抗体在hKDR^(+/+)小鼠体内表现出明显的抗肿瘤活性,与PBS组相比,肿瘤体积明显减小(P<0.01),肿瘤质量明显减轻(P<0.05)。Rag1^(-/-)小鼠、hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠的外周血B细胞和T细胞数量均明显减少(P<0.05,P<0.001)。C57BL/6小鼠来源的MC38细胞接种7 d后,在hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)、Rag1^(-/-)、C57BL/6N和hKDR^(+/+)四组小鼠体内均可见肿瘤生长。BALB/c小鼠来源的CT26细胞接种10 d后,仅在hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)和Rag1^(-/-)小鼠体内见到肿瘤生长,在C57BL/6N及hKDR^(+/+)小鼠中均未见肿瘤生长;接种后3周,hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠的成瘤体积明显大于Rag1^(-/-)小鼠(P<0.01)。结论获得了Rag1基因敲除小鼠,并进一步筛选获得新型hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)双靶点基因修饰小鼠模型;Rag1基因缺失时,不同品系小鼠来源的肿瘤细胞系更易成瘤。这提示可以通过降低hKDR^(+/+)人源化小鼠的免疫反应能力,增强或扩大该模型小鼠接纳肿瘤细胞系的范围,构建多种可用于评价VEGFR靶点药物的荷瘤小鼠模型。

“间”的日本性——矶崎新的建筑时空观研究

“回归”和“虚无”是日本文化中对于时间与空间的理解,源自于日本日常生活中的“间”文化。通过分析“间”所表现出的“日本性”,同时以矶崎新在西方反响热烈的“间”文化展为脉络,解读“间”思想影响下矶崎新的时间与空间观念,并探寻融入在矶崎新的建筑作品空间与形式的组织和体验当中的“间”思想。

风翼液压系统故障诊断方法综述

风翼助航是实现船舶绿色化发展的有效途径之一。液压系统作为风翼动力系统的重要组成部分,其运行状态决定风翼助航船运行的可靠性与节能效果。以风翼液压系统为对象,综合分析其故障部位、方式、特点以及故障后果,通过梳理国内外液压系统的故障诊断方法,分析各类诊断方法在风翼液压系统上的适用性,并总结各类诊断方法的特点和不足。结果表明:具有多层次诊断结构的智能诊断方法在提升大型复杂液压系统故障诊断精度及降低诊断模型复杂度方面具有优势,将成为船舶风翼液压故障诊断研究的发展趋势。

鄂尔多斯盆地东缘大宁-吉县区块及邻区山西组山2段物源分析

鄂尔多斯盆地东缘山西组山2段具备优质的源储配置条件,是区域油气勘探的重要储集层位。结合露头古流向、重矿物及碎屑锆石测年数据,对大宁−吉县区块进行山2段物源分析,认为山2段沉积期大宁−吉县区块为南、北双物源共同控制,主要证据有3方面:①大宁−吉县东部露头区2段砂岩古流向发生显著变化,北部临汾市管头镇为由北向南的古流向,南部台头镇却为由南向北的古流向特征。②大宁−吉县油气探区山2亚段砂岩重矿物差异显著,以二郎山旅游区附近为界,超稳定重矿物锆石以及稳定重矿物白钛矿发生了显著的南北分异。③大宁−吉县探区内锆石样品测年峰值南北表现不统一,北部砂岩锆石测年表现为1800~2000 Ma和2400~2500 Ma 2个年龄峰值,南部砂岩锆石年龄峰值表现为300~700 Ma、1100~1200 Ma、1800~2000 Ma和2400~2600 Ma等4个峰值。该认识不仅为大宁−吉县油气探区砂体展布刻画提供指导性线索的同时,也将为区域山2段沉积期古地理背景研究提供重要证据。

长沙市酸雨自动观测与人工观测的对比分析

为考察酸雨人工观测切换至自动观测后数据的可靠性,采用长沙站酸雨为期一年的数据,通过均值法、差值法、正态分布法等对比两者的pH值和电导率K值在采样情况、均值、酸性分布、偏差等方面差异。研究表明:与酸雨人工观测相比,自动观测系统的pH值缺测率为3.5%;自动pH年均值为4.68,大于人工的4.42,pH值月均偏差范围为0.06~0.72,总体偏差集中在(-0.4,0.9),对应的正态函数为N(0.27,0.30),占整体量的87.3%。自动观测电导率K值缺测率为11.4%,年均值为18.15μS/cm,略低于人工的19.31μS/cm,月均偏差在冬季最大,为31.5μS/cm,4月最小,为-2.6μS/cm,其余月均在-1.6~1.6μS/cm。K值总体偏差集中在-15~15μS/cm,对应的正态分布为NK(-0.88,4.38)。两者的偏差主要由仪器性能、采样过程、测量环境和实际操作等因素引起。结果表明,酸雨人工观测切换至自动观测具有良好的延续性和可靠性。

从“天柱”到“树”——矶崎新建筑作品中的延续性

“天柱”是矶崎新在第一手法主义时期常用的建筑形式,“树”与“林”的有机形式是矶崎新在21世纪初进行的探索。从“天柱”到“树”的演变过程体现出矶崎新建筑创作中的手法延续性,同时表现了矶崎新融合日本传统和时代特性的折衷理念。因此,文章从日本文化中的“神柱”出发,分别梳理矶崎新以“天柱”到“树”为手法创作的建筑作品,以此探索矶崎新在六十余年的创作历程中不断延续和发展的建筑形式。

人源化CSF-1R 基因敲入小鼠模型的构建

目的利用CRISPR-Cas9技术构建CSF-1R基因敲入小鼠模型。方法将人CSF-1R基因的3到11外显子cDNA的部分序列,加上TGA密码子及WPRE-PolyA原件,插入到了小鼠CSF-1R基因外显子3的第20位丙氨酸下游。在鉴定获得阳性模型后,进一步通过RT-qPCR分析基因的表达特征并进行精子冷冻保种繁殖。结果该基因正确插入设计位点,转录水平显示转入基因能在小鼠模型心脏、肝、脾、肺、肾、脑等脏器中表达,冷冻精子复苏后体外受精的平均受精率达67.74%,平均产仔率16.06%,并经过PCR检测得到阳性小鼠。结论成功构建了人源化CSF-1R基因敲入小鼠模型,为评价肿瘤免疫抗体药效及相关靶向抗肿瘤药物筛选提供了动物模型。

基于组合赋权-改进集对分析的岩爆倾向性预测研究

岩爆是地下工程中的主要地质灾害之一,具有强破坏性、不确定性、突发性等特点。为准确、有效地预测地下工程中的岩爆倾向性,基于组合赋权-改进集对分析理论,建立了岩爆倾向性预测模型。首先从岩性、应力、围岩3个方面确立预测指标;其次利用组合数有序加权平均算子赋权法(Combination Weighting Averaging,C-OWA)、关联准则重要性赋权法(Criteria Importance Though Intercrieria Correlation,CRITIC)、博弈论分别计算出主观权重、客观权重,组合权重;最后将传统集对分析理论中的三元联系度改进为四元联系度,用改进后的集对分析理论计算出综合联系度来预测出岩爆等级。将该模型应用于西藏甲玛铜多金属矿等工程的岩爆倾向性预测中,得出该矿的综合联系度为u1=-0.3029,为弱岩爆,与实际相符。研究表明:所建立的模型适用于岩爆倾向性预测,与交互式多准则决策预测模型和逼近理想解排序法预测模型对比,准确性、可靠性较优,为岩爆倾向性预测提供了一种新的途径。

大宁-吉县区块深层煤岩多尺度孔缝结构特征

针对单一技术手段难以定量表征大宁-吉县区块深层煤岩储层复杂的多尺度孔缝结构问题,基于全直径CT扫描、微米CT扫描、FIB-SEM电镜扫描、氩离子抛光场发射扫描电镜等多种实验方法,利用多尺度的数字岩心技术对煤岩样品进行扫描及分析。结果表明:大宁-吉县区块深层煤岩发育多尺度孔缝系统,纳米尺度以气孔和组织孔发育为主,微米尺度以微裂缝和矿物溶孔发育为主,毫米尺度发育有高角度裂缝和割理组合;全直径CT扫描技术可有效识别毫米级的裂缝、割理及溶孔;建立了D20井煤岩段岩心孔-缝模型,计算得到裂缝孔隙度为1.55%,裂缝密度为22.5条/m,裂缝平均开度为1.1 mm;微米孔隙平均半径为2.99~4.15μm,微米喉道平均半径为1.16~1.80μm;微裂缝平均开度为3.75~4.84μm;纳米孔隙平均半径为51.21~80.65 nm,纳米喉道平均半径为19.44~32.06 nm;通过微、纳米孔隙数据拼接,获得多尺度分布特征,小孔数量最多,平均表面积占比为63.68%,大孔(大于103 nm)数量少但贡献了大量的孔隙体积。研究成果可为深层煤层气勘探开发提供技术支撑。

基于物质平衡反演法的致密砂岩气藏地层压力计算

压力是气藏的“灵魂”,地层压力是评价气井产能,分析气藏潜力的基础。然而,受到资料完整程度、方法适用条件等因素的限制,大部分气井无法准确获取地层压力。为了评价致密砂岩气藏地层压力,基于少量压力监测资料,采用数学反演思维,提出物质平衡反演法。首先,利用拟稳定流动状态下气井生产数据,拟合Blasingame图版,计算气井动态储量。而后,通过动态储量及一个测压数据进行反演,建立物质平衡方程,代入累产气量,评价地层压力,最后,以大宁–吉县区块致密砂岩气井为例,进行地层压力计算。结果表明:(1)物质平衡反演法仅需一个测压点,可以评价气井的地层压力变化。(2)气井原始地层压力差异大,单井地层压力变化复杂,存在多个压力系统。(3)压力系统不一致与储层非均质性强有关。研究结果对于致密气单井压力计算和致密气藏压力评价提供了可靠的方法,为致密气藏开发方案调整和效益开发奠定了基础。

Effect of vanadium on hydrogen embrittlement of grade 12.9 high-strength bolt steels

In this study, the effect of vanadium addition(0.25%) on microstructure and hydrogen embrittlement(HE) was investigated in grade 12.9 bolt steels, and hydrogen diffusion was analyzed by hydrogen permeation.The results show that the addition of 0.25% vanadium in bolt steels can significantly improve the HE resistance.Vanadium addition can form a large number of vanadium precipitates, resulting in the uniform distribution of hydrogen and reduction of hydrogen accumulated at local grain boundaries, which promotes the inhibition of hydrogen-induced cracking.

中国主要食用菌子实体γ-氨基丁酸含量测定及产量影响因素

氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种功能性非蛋白氨基酸,在维持人体健康方面发挥着重要作用。为探明食用菌子实体的GABA含量水平和影响食用菌GABA产量的因素,本研究通过对食用菌GABA提取和衍生条件优化,建立了食用菌GABA检测的9-芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl)柱前衍生HPLC法;利用该方法测定了20种中国主要食用菌子实体的GABA含量,并进一步探究了培养料氮源含量和种类、栽培时间对GABA含量的影响。食用菌GABA提取的最佳料液比、时间和温度分别为1:100、1 h和65℃。20种食用菌子实体的GABA含量在0.20-3.02 mg/g DW,存在显著种间差异,其中黄白银耳GABA含量最高(3.02 mg/g DW),香菇、银耳、金针菇、双孢蘑菇的GABA含量也较高,为1-2 mg/g DW。增加培养料含氮量可显著促进GABA积累,且添加尿素的促进效果明显优于添加麦麸。栽培时间也可影响子实体GABA产量,第二茬和三茬子实体的GABA含量显著高于第一茬子实体。综上可知,食用菌GABA含量不仅与品种密切相关,而且受到培养料中氮源含量和种类、栽培时间的影响。

基于GNSS-RTK定位的无人机L波段探空系统标定方法

随着我国北斗卫星导航探空观测系统升级换代工作逐步推进,降低L波段探空系统测风数据差异的需求尤为迫切。利用无人机GNSS-RTK定位信息研究新的标定方法,相较传统标定手段,避免人为因素干扰、极大的降低测量误差,新的标定方法更加科学有效,对保证测风数据的有效性,提高高空气象观测数据质量具有重要应用意义。