基于正常大鼠物质能量代谢的栀子不同炮制品寒热药性研究

目的通过检测栀子不同炮制品对正常大鼠物质代谢与能量代谢水平的影响,以期阐明炒制引起栀子寒热药性变化的科学内涵。方法雄性SD大鼠随机分为对照组、生栀子组、炒栀子组及焦栀子组。对照组大鼠灌胃蒸馏水(1 mL·100 g^(-1)),生栀子组、炒栀子组及焦栀子组大鼠分别灌胃给予等体积的相应炮制品水提取物,连续给药9天。记录各组大鼠给药期间体质量、肛温变化。酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠肝脏组织中物质能量代谢相关指标GCK、PFK、PK、Acetyl-CoA、PDH、CS、ICD、α-KGDHC、PYGL、GSK-3、ATGL、CCR、COX、ATPs、ADK、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、ATP、ADP、NAD及NADH的含量。免疫组化法(Immunohistochemistry,IHC)检测AMPK/mTOR信号通路关键蛋白的表达。结果与对照组相比,生栀子极显著性降低大鼠体质量、肛温、PK、PDH、Acetyl-CoA、CS、ICD、PYGL、GSK-3、ATGL、CCR、ATPs、ADK、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、ATP、NAD^(+)、NADH、AMPK(P<0.01),显著性降低大鼠GCK、PFK、α-KGDHC、COX、ADP水平(P<0.05),极显著升高大鼠mTOR水平(P<0.01);炒栀子极显著性降低大鼠体质量、肛温、PK、PDH、Acetyl-CoA、CS、ICD、PYGL、ATGL、ATPs、ADK、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、ATP、NAD^(+)、NADH水平(P<0.01),显著性降低大鼠PFK、α-KGDHC、GSK-3、COX、ADP及AMPK水平(P<0.05),极显著升高大鼠mTOR水平(P<0.01);焦栀子极显著性降低大鼠肛温、PK、Acetyl-CoA、CS、ICD、PYGL、ATGL、ATPs、ADK、NAD^(+)水平(P<0.01),显著降低大鼠体质量、PDH、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、ATP及NADH(P<0.05),极显著升高大鼠mTOR水平(P<0.01)。与生栀子组相比,炒栀子极显著性升高大鼠PK、PDH、Acetyl-CoA、ICD、ADK及NADH水平(P<0.01),显著性升高大鼠PDH水平(P<0.05);焦栀子极显著性升高大鼠PK、PDH、Acetyl-CoA、CS、ICD、ADK、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、NAD^(+)及NADH水平(P<0.01),显著性升高大鼠GSK-3、ATPs及AMPK水平(P<0.05)。与炒栀子组相比,焦栀子可极显著性升高大鼠Na^(+)-K^(+)-ATP酶及NADH水平(P<0.01)。结论生栀子组、炒栀子组及焦栀子组均能显著降低正常大鼠物质能量代谢水平,说明三者均属于寒性,这与《中国药典》记载的生栀子、炒栀子、焦栀子均属寒性一致。就大鼠物质能量代谢而言,焦栀子组高于炒栀子组,炒栀子组高于生栀子组,说明焦栀子寒性弱于炒栀子,炒栀子寒性弱于生栀子。

山茶油干预的阿尔茨海默病小鼠尿液代谢组学分析

目的:基于超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flightmassspectrometry,UPLC-Q/TOF-MS)技术,利用代谢组学方法探讨山茶油干预的阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)小鼠尿液的代谢组学变化。方法:将小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药组、山茶油组,除对照组外其余各组小鼠均由β-淀粉样蛋白25-35肽诱导AD,并取尿液样本。尿液沉淀蛋白后进行UPLC-Q/TOF-MS分析,获得小鼠尿液代谢物数据,使用SIMCA-P14.1软件进行主成分分析(principalcomponent analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析,使用HMBD、MassBank、MetaboAnalyst、京都基因与基因组百科全书在线数据库对生物标志物进行鉴定、通路富集分析和代谢网络的构建。结果:在PCA得分图中,山茶油组样本点远离模型组样本点区域,更接近正常对照组样本点区域。鉴定得到48个生物标志物,主要涉及的通路有牛磺酸和次牛磺酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,半胱氨酸和蛋氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等。结论:山茶油通过调节能量代谢、氨基酸代谢等改善了AD小鼠体内代谢,为山茶油干预AD的进一步研究提供参考。

基于GC-MS和化学计量学的怀菊不同部位挥发性成分差异分析

目的 通过对怀菊不同部位(花、茎、叶)挥发性成分进行分析鉴定,为怀菊资源综合利用奠定理论基础。方法 采用水蒸气蒸馏法分别提取不同批次怀菊不同部位中的挥发油,运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对其组成成分进行分析,通过谱库检索、文献查询等方式鉴定分析化合物,采用面积归一化法得到各化合物的相对百分含量,采用韦恩图、主成分分析和聚类热图分析其成分的差异。结果 从怀菊不同部位共鉴定出62个挥发性成分,主要是单萜和倍半萜及其衍生物,以及少量脂肪族化合物。花、茎和叶中分别鉴定出32、42和40个挥发性成分,共有成分17个,特有成分分别为5、6和16个。化学计量学方法分析结果表明,主成分分析和聚类热图分析均能将怀菊花、茎和叶分开,其挥发性成分具有差异性。结论 怀菊花、茎和叶中挥发性成分的种类和含量有一定的差异性,这为怀菊不同部位进一步药用或工业开发提供科学依据。

基于CiteSpace的我国课程思政研究现状可视化分析(2017—2021)

目的通过对2017年-2021年课程思政研究领域文献进行可视化分析,探索我国课程思政的研究进程、当前研究热点和未来发展趋势。方法以中国知网(CNKI)为检索平台,收集有关课程思政研究的相关文献,利用可视化分析软件CiteSpace 5.8R3c,将作者、发文机构、关键词等内容构建知识图谱。结果共检索到中文文献5158篇,其中中文核心文献460篇,中文文献和中文核心文献发文量最多的机构均发表6篇相关文献。中文文献和中文核心文献中出现频次最多的关键词分别是“课程思政”与“思政课程”。当前关于在线教学和实践教学的研究较流行。结论课程思政研究领域目前正处于起步阶段,当前各机构之间合作较少,加强各机构之间的交流合作有利于相关领域的发展。在线教学和实践教学与课程思政的结合是未来课程思政教学的发展趋势。

大型仪器设备在培养实践创新型人才中的自主上机模式探索

“双一流”建设背景下,高校大型仪器设备数量逐年增多,但如果仅将大型仪器设备用来测试数据则不能充分发挥其作用,自主上机模式为提高仪器设备使用率和培养实践创新型人才提供了很好的思路。为了将我校分析测试中心大型仪器设备的作用发挥到极致,以扫描电镜为例,探索了一种大型仪器设备自主上机模式。通过培训学生获得自主上机操作证书,借助学生力量实现多台大型仪器设备的开放共享,提高共享率的同时培养了一批实践创新型人才,同时为学生今后的就业或升学奠定坚实基础。

怀菊花中化学成分的分离与鉴定

目的研究怀菊花Chrysanthemum morifolium Ramat的化学成分。方法怀菊花提取物采用Diaion HP-20、Toyopearl HW-40、MCI Gel CHP-20、ODS、硅胶、半制备液相等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从怀菊花提取物中分离得到18个化合物,分别鉴定为3β-hydroxy-β-ionone-3-O-β-D-glucopyranoside(1)、pisumionoside(2)、(2E)-2-methyl-2-butene-1,4-diol-1-O-β-D-glucopyranoside(3)、(Z)-5′-hydroxyjasmone-5′-O-β-D-glucopyranoside(4)、(2E,8E)-十四烯-4,6-二炔-1,12,14-三羟基-1-O-β-D-葡萄糖苷(5)、对羟基苯丙醇(6)、3,4-二羟基苯乙醇(7)、6,7-二羟基香豆素(8)、对羟基苯乙酮(9)、芝麻素(10)、2-methylphenyl-O-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside(11)、chakyunglupalin B(12)、(R)-vicianin(13)、尿嘧啶(14)、胸腺嘧啶(15)、尿嘧啶核苷(16)、2′-脱氧胸腺嘧啶核苷(17)、L-苯丙氨酸(18)。结论化合物1~17为首次从该植物中分离得到。

β-谷甾醇对OVA诱导的过敏性哮喘大鼠模型中Th17/Treg免疫失衡的调节

目的:探讨β-谷甾醇对卵白蛋白(OVA)诱导的过敏性哮喘大鼠的干预作用及潜在作用机制。方法:SD雄性大鼠随机分为正常组(CON)、模型组(M)、阳性药地塞米松组(DEX,0.075 mg/kg)、β-谷甾醇组(Sit,50 mg/kg),采用腹腔注射OVA氢氧化铝溶液致敏,雾化吸入OVA激发建立过敏性哮喘大鼠模型。雾化激发前30 min灌胃给药,连续给药7 d后,检测大鼠咳喘指标、气管酚红排泌量;HE染色观察肺组织病理变化;流式细胞术检测大鼠原代肺细胞活性氧(ROS)、凋亡水平及外周血中Th17和Treg细胞比例;生化法检测大鼠肺组织中MDA含量及T-SOD、GSH-Px活力;ELISA检测Th17、Treg相关细胞因子(TNF-α、IL-4、IL-6、IL-17A、IL-35)水平。结果:与模型组相比,β-谷甾醇明显延长了过敏性哮喘大鼠的咳嗽及引喘潜伏期,减少了咳嗽及喘息次数,促进了气管酚红排泌;显著减轻了哮喘大鼠肺组织炎症浸润;显著降低了哮喘大鼠肺组织MDA含量、原代肺细胞ROS和凋亡水平,提高了T-SOD及GSH-Px活力;显著降低了Th17细胞比例及促炎细胞因子TNF-α、IL-4、IL-6、IL-17A水平,提高了Treg细胞比例及抑炎细胞因子IL-35水平。结论:β-谷甾醇能够改善OVA诱导的过敏性哮喘大鼠气道炎症和氧化损伤,其作用机制可能与β-谷甾醇对Th17/Treg免疫失衡及氧化应激反应的调节有关。

血清骨桥蛋白、癌胚抗原及CK18的表达对胃癌的诊断价值

目的:测定胃癌患者血清中骨桥蛋白(OPN)、癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白18(CK18)的表达情况,探讨其在胃癌诊断中的意义。方法:选择80例胃癌患者作为胃癌组,80名健康体检者作为对照组,观察胃癌组和对照组血清OPN、CEA和CK18含量,血清OPN和CEA、CK18诊断胃癌的灵敏度、特异度及ROC曲线下面积,血清OPN、CEA和CK18含量和胃癌病理特征的关系。结果:胃癌组患者血清OPN、CEA和CK18含量均高于对照组(P<0.05)。血清OPN诊断胃癌的ROC曲线下面积大于血清CEA和CK18,两两联合指标诊断胃癌的ROC曲线下面积大于单独指标,三者联合诊断胃癌的ROC曲线下面积最大。随着联合指标的增多,诊断胃癌的灵敏度升高。结论:胃癌患者血清OPN、CEA和CK18水平升高,多指标联合检测诊断胃癌的灵敏度比较高。

怀中1号地黄不同炮制品中脂溶性成分比较及体外抗氧化活性研究

目的比较怀中1号地黄不同炮制品(鲜地黄、生地黄和熟地黄)中脂溶性成分的差异,并初步评价其体外抗氧化活性。方法采用索氏提取法获得地黄3种炮制品的脂溶性提取物,采用气相色谱-串联质谱法对其进行成分分析。采用NIST98系统谱库自动检索组分的质谱信息,结合有关文献和与八峰索引、EPA/NIH库对照对化合物进行结构鉴定,并使用Hewlett Packard软件按峰面积归一化法计算各化合物的相对含量。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法考察3种地黄炮制品中脂溶性成分的抗氧化活性。结果从地黄不同炮制品中共鉴定出79个脂溶性成分,从鲜地黄、生地黄和熟地黄中分别鉴定出48、52和37个脂溶性成分,其相对含量分别占总成分的92.69%、86.29%、92.89%;三者中共有脂溶性成分20个,其相对含量分别占各炮制品中脂溶性成分含量的88.73%、80.89%、85.87%,且均以亚油酸甲酯、棕榈酸甲酯、油酸甲酯等脂肪酸类成分为主。另外,鲜地黄中独有的脂溶性成分有18个,多为萜类化合物;生地黄和熟地黄中独有的脂溶性成分分别有17、6个,多为烷烃类化合物。抗氧化实验结果显示,三者中脂溶性成分对DPPH自由基的半数清除浓度分别为0.756、0.660、0.758 mg/mL。结论不同地黄炮制品中的共有脂溶性成分多为脂肪酸类化合物,鲜地黄中独有的脂溶性成分多为萜类化合物,生地黄和熟地黄中独有的脂溶性成分多为烷烃类化合物;其脂溶性成分均具有一定的体外抗氧化活性。

虎掌南星(掌叶半夏)的化学成分及药理活性研究进展

虎掌南星来自于天南星科半夏属植物掌叶半夏(Pinellia pedatisecta Schott)的块茎,具有燥湿化痰,祛风止痉,散结消肿等功效.目前从虎掌南星中已分离得到一百多个化合物,包括生物碱、环二肽类、氨基酸类、脂肪油类、糖类、凝集素类等成分.查阅近几十年来的国内外相关文献,对虎掌南星主要的化学成分、药理作用研究成果进行归纳总结,以期为虎掌南星今后的研究开发提供参考.

小白菊内酯及其衍生物抗实体瘤作用机制的研究进展

目的了解近年来小白菊内酯及其衍生物抗肿瘤作用机制的研究进展。方法查阅文献并归纳总结,综述近年来小白菊内酯及其衍生物的抗实体瘤作用的机制。结果为获得溶解性更好、低毒高效的抗肿瘤新药,用多种方法合成小白菊内酯(partheno-lide)衍生物,本文列出其中9种衍生物的分子结构。研究发现,小白菊内酯及其衍生物可通过多种机制抑制肝癌和胰腺癌等多种实体瘤细胞的增殖、侵袭和迁移。结论小白菊内酯及其衍生物的抗肿瘤机制研究取得了一定进展,但仍需进一步深入探讨。

基于慕课的生物化学课程混合式教学法探索

"慕课"是一种全新的教学模式,目前国内高校生物化学课程"慕课"资源较少。本文在开展基于"慕课"生物化学课程混合式教学法探索的基础上,从生物化学"慕课"现状、混合式教学实践、混合式教学成绩评价、以及运行过程中的一些问题等方面,我们探索了将"慕课"在线教学与传统教学相结合的混合式教学,这将提高生物化学课程的教学质量,提高学生的学习效果,为促进医学院校生物化学课程教学改革提供经验。

混合式教学模式下生物化学2种教学安排的比较

混合式教学目前是我国高校教学改革的重点。在构建相应的混合式教学模式后,确定了线上教学和线下教学的学时。针对在日常教学中,线上教学和线下教学的不同时间安排对教学效果的影响,进行了教学实践。最终结果表明,线上教学和线下教学在同一模式下进行时,不同的时间安排对学生学习成绩影响不大。因此,在进行线上教学和线下教学安排时,线上教学时间以周课时量为基准,将整块时间交给学生自己支配,尽量减少教师对学生的束缚,对学生的自理和自学能力的培养可能更有利。

中医学专业生物化学教学模式探索

生物化学是中医学专业重要的医学基础课程。根据河南中医药大学中医学专业实际情况,秉承"以学生为中心"的教学理念,从学情分析、教学手段优化、教学互动环节设计和教学反思等方面,对生物化学课程教学模式进行探索,以达到促进学生自主学习、激发学生学习兴趣的目的。

中医院校生物化学混合式教学模式的构建

随着在线教育的发展,利用MOOC平台,进行混合式教学,探索MOOC和传统教学的最优结合方式是目前我国高校教育改革的一个重点。综合MOOC和传统教育的优势,构建相应的混合教学模式是非常必要的。文章分析了混合式教学模式的构建原因,从网络课程建立、教学基本程序及课程总成绩评定进行了设计,为下一步教学实践制定相应的操作程序,并可为同类院校的课堂教学改革提供参考。

中药学专业生物化学糖类化学教学设计案例

对生物化学课程中糖类化学章节,从学情分析、教学内容、教学目标、教学策略、教学互动环节和教学反思等方面进行教学设计,以探索新的教学经验,增强课堂教学效果。

大学生创新学习项目进展中的思索与实践

随着各高校"大学生创新学习项目"工作的深入推进,参与学生数、投入经费数大幅增长。河南中医学院药学院立足现状,积极探索"大学生创新学习项目",笔者就所带的项目谈谈自己的体会。

Box-Behnken设计-响应面法优化山茱萸叶总三萜提取工艺

目的:优化山茱萸叶总三萜提取工艺。方法:在山茱萸叶充分溶胀的基础上,采用加热回流法提取其总三萜。在单因素试验中考察乙醇体积分数、液料比、提取时间和提取次数对山茱萸叶总三萜含量的影响;以齐墩果酸为对照品,采用紫外-可见分光光度法测定总三萜含量。在单因素试验的基础上,固定提取次数为3次,以总三萜含量为响应值,以乙醇体积分数、液料比、提取时间为响应因素,采用Box-Behnken设计-响应面法优化山茱萸叶总三萜的提取工艺并进行验证。结果:山茱萸叶总三萜的最佳提取工艺为乙醇体积分数73%、液料比38∶1(mL/g)、提取时间60 min。3次验证试验结果显示,山茱萸叶总三萜的含量分别为6.92%、6.91%、6.84%,平均含量为6.89%(RSD=0.63%),与预测值(7.28%)的相对误差为5.36%。结论:优化的提取工艺稳定、可靠,可用于山茱萸叶总三萜的提取。

网络药理学辅助探究牛膝及其不同炮制品对肾病综合征大鼠的保护作用

目的探究牛膝、盐牛膝及酒牛膝对肾病综合征模型大鼠的影响及潜在机制。方法60只雄性SD大鼠,除正常组(6只)外,其余大鼠尾静脉注射阿霉素(4 mg·kg^(-1)),并于7 d后再次尾静脉注射阿霉素(3.5 mg·kg^(-1)),正常组2次均尾静脉注射等剂量生理盐水。第2次尾静脉注射阿霉素7 d后检测反映模型是否复制成功的相关指标,即血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平。将模型复制成功的30只大鼠随机分成5组:模型组、阳性药醋酸泼尼松组(12.5 mg·kg^(-1))、牛膝组(4 g·kg^(-1))、盐牛膝组(4 g·kg^(-1))和酒牛膝组(4 g·kg^(-1)),每组6只,按照上述剂量每天灌胃给药1次,模型组给予等量水,持续2周。HE染色观察大鼠肾脏病理变化;比色法检测血清中Cr、BUN及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物歧化酶(GSH-Px)水平;ELISA法检测血清及肾组织中白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)水平。网络药理学预测牛膝治疗肾病综合征的潜在机制并进行实验验证。Western Blotting法检测肾组织中NF-κB p-p65、NF-κB p65、p-smad3、smad3蛋白表达水平。结果实验结果显示,模型组血清中Cr、BUN水平与正常组比较明显降低(P<0.01,P<0.05),模型复制成功。牛膝及其炮制品均能不同程度地改善肾组织病理损伤,降低血清中Cr、BUN、MDA水平,升高GSH-Px、SOD水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001);降低血清和肾组织中IL-6、IL-18、TNF-α、IFN-γ水平,升高IL-2水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。网络药理学发现牛膝治疗肾病综合征可能主要通过TNF、转录因子AP(JUN)、IL-6等9个靶基因以及NF-κB、造血细胞调控、TGF-β信号通路等多条通路发挥作用。验证实验表明,与模型组比较,牛膝及其炮制品均能降低肾组织中NF-κB p-p65/NF-κB p65、p-smad3/smad3蛋白比值(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论牛膝及其2种炮制品对阿霉素肾病综合征模型大鼠均有不同程度的保护作用,且盐牛膝和酒牛膝作用优于牛膝,可能通过TNF及IL-6等靶点、NF-κB及TGF-β等信号通路对肾病综合征发挥作用。

红花DBB基因家族全基因组鉴定及生物信息学分析

DBB(Double B-box)转录因子在植物生长发育过程中起着重要作用,本研究利用生物信息学方法对红花DBB基因家族进行了全基因组鉴定和分析。研究表明,红花DBB基因家族有5个亚家族共26个成员。序列分析显示,红花DBB蛋白N端含有一个或两个B-box结构域,在C端偶尔包含一个CCT结构域。理化性质分析表明,红花DBB基因家族成员编码蛋白质的氨基酸数目为197~789、理论等电点为4.12~7.68、相对分子量为21.96~87.82 kD,大多数成员都位于细胞核。染色体定位表明,26个红花DBB基因家族成员不均匀地分布在红花的12条染色体上。对红花DBB基因上游1500 bp启动子区域顺式作用元件分析表明,绝大多数基因受到光的调控,部分基因受到生长素、赤霉素、脱落酸等植物激素的调控。蛋白互作网络分析显示,红花DBB基因家族成员可能参与光形态建成、开花和光周期等生长发育过程。本研究为今后深入研究红花DBB基因的功能和调控机制提供基础,也为寻找红花中的光响应基因提供了参考。