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盖塔病毒E2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定
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作者 孟慧 鹿田原 +2 位作者 周景业 牟春晓 陈振海 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2023年第3期51-58,共8页
为制备盖塔病毒(GETV)E2蛋白单克隆抗体,通过大肠埃希菌表达系统表达重组E2蛋白,经过镍柱吸附、切胶纯化,获得E2蛋白,将其作为免疫原免疫BALB/c小鼠,3次免疫后加强免疫,细胞融合,通过间接免疫荧光筛选阳性杂交瘤细胞,最终筛选出1株针对G... 为制备盖塔病毒(GETV)E2蛋白单克隆抗体,通过大肠埃希菌表达系统表达重组E2蛋白,经过镍柱吸附、切胶纯化,获得E2蛋白,将其作为免疫原免疫BALB/c小鼠,3次免疫后加强免疫,细胞融合,通过间接免疫荧光筛选阳性杂交瘤细胞,最终筛选出1株针对GETV E2蛋白的阳性杂交瘤细胞9E8,将该杂交瘤细胞注射入小鼠腹腔内生产腹水。经间接免疫荧光试验和蛋白免疫印迹试验鉴定,该单抗可与GETV发生特异性反应。经IP试验证明,该单抗可识别天然结构的GETVE2蛋白。对E2单抗进行抗原表位鉴定,确定其所识别的多肽序列为66KIRYIAGHD74。与GenBank上登录的其他GETV毒株序列对比,发现该段序列高度保守。综上,E2单抗9E8免疫学反应特性良好,为研究该病毒提供了有效的免疫学检测工具。 展开更多
关键词 盖塔病毒 E2蛋白 单克隆抗体 抗原表位
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猪盖塔病毒感染性克隆构建及病毒拯救
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作者 周景业 孟慧 +2 位作者 鹿田原 牟春晓 陈振海 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2023年第6期62-69,共8页
为研究盖塔病毒(GETV)致病机制,需搭建可靠的盖塔病毒(GETV)反向遗传操作平台。首先构建GETV/HuN1株的全长感染性克隆质粒,并在nsP4基因与C基因之间或E1基因与3′UTR之间插入亚基因组启动子26S和报告基因EGFP,将3个重组质粒分别转染至BH... 为研究盖塔病毒(GETV)致病机制,需搭建可靠的盖塔病毒(GETV)反向遗传操作平台。首先构建GETV/HuN1株的全长感染性克隆质粒,并在nsP4基因与C基因之间或E1基因与3′UTR之间插入亚基因组启动子26S和报告基因EGFP,将3个重组质粒分别转染至BHK-21细胞中,拯救病毒,鉴定重组病毒和外源基因稳定性,测定病毒滴度并绘制生长曲线。以重组质粒pACYC-177-GETV为模板进行RT-PCR扩增,结果显示,GETV每个蛋白基因均能正确扩增出相应条带。IFA鉴定结果显示,E2与6K蛋白抗体能与rGETV特异性结合。将EGFP基因分别插入到C基因的上游或E1基因的下游,产生报告病毒rGETV-EGFP/C和rGETV-EGFP/E1。在2种报告病毒感染的BHK-21细胞上均能观察到EGFP高表达,将报告基因插入E1基因下游,可保持其更高的稳定性。此外,生长曲线显示,重组病毒具有与亲代病毒相似的生长速度。综上,GETV反向遗传操作平台的成功建立为研究GETV蛋白功能和研发疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 盖塔病毒 感染性克隆 病毒拯救 报告基因
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基于模型参数不确定的欠驱动非对称自主水下航行器全局镇定控制研究 被引量:5
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作者 邸青 周竞烨 +2 位作者 方凯 姚佳琪 李家旺 《兵工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第5期950-957,共8页
针对欠驱动自主水下航行器水平面镇定控制过程中存在的模型参数未知等问题,设计一种基于非对称模型的全局反馈镇定控制算法。基于仅知模型参数上下界值的自适应模型参数观测器获取模型参数估计值;通过全局坐标变换,将镇定控制系统解耦... 针对欠驱动自主水下航行器水平面镇定控制过程中存在的模型参数未知等问题,设计一种基于非对称模型的全局反馈镇定控制算法。基于仅知模型参数上下界值的自适应模型参数观测器获取模型参数估计值;通过全局坐标变换,将镇定控制系统解耦为推进子系统和偏航子系统分别进行设计,消除了非对称作用项引起的耦合影响;引入2阶滤波器,使得偏航角速度在推进子系统状态未收敛至零点状态下始终具有持续激励特征,保证镇定误差收敛至零点附近的一个有界区域。李雅普诺夫稳定性分析证明了该控制算法能够在模型参数未知情况下,以任意初始条件实现镇定控制目标。数值仿真实验结果表明,该控制算法是有效的,且具有较好的控制精度和一定对未知环境干扰的鲁棒性。 展开更多
关键词 欠驱动自主水下航行器 非对称模型 参数不确定性 镇定控制
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矿场集输原油处理过程VOCs排放量计算 被引量:1
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作者 刘洋 王北福 +1 位作者 周靖也 张明强 《机械工程师》 2020年第2期17-19,共3页
为了更精准地估算矿场集输过程中处理原油时挥发性有机物的挥发量,提出一种基于处理原油过程中温度和压力变化引起溶解度变化,来近似估算原油处理全年VOCs排放量的模型。该模型利用蒸馏曲线和API重度可以得出轻组分化合物C1-C6在原油中... 为了更精准地估算矿场集输过程中处理原油时挥发性有机物的挥发量,提出一种基于处理原油过程中温度和压力变化引起溶解度变化,来近似估算原油处理全年VOCs排放量的模型。该模型利用蒸馏曲线和API重度可以得出轻组分化合物C1-C6在原油中溶解度的相互关系,并将调查区域收集到的现场值与该区域模拟分析的预测值进行对比。结果表明,利用该模型模拟出的溶解度结果和收集到的现场数据所得到的溶解度相似,将API重度和蒸馏曲线对原油中挥发性有机化合物的各组分的溶解度变换量进行求和,可以建立出一种预测排放量的模型。因此,建立的估算原油处理全年VOCs排放量模型可应用到估算矿场集输原油处理过程中VOCs排放量的研究当中。 展开更多
关键词 矿场集输 挥发有机化合物 溶解度 模型建立
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Three-Dimensional Trajectory Tracking Control of Underactuated Autonomous Underwater Vehicles with Input Saturation 被引量:3
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作者 HUANG Hantao zhou jingye +2 位作者 DI Qing zhou Jiawei LI Jiawang 《Journal of Shanghai Jiaotong university(Science)》 EI 2020年第4期470-477,共8页
This paper addresses a three-dimensional(3D)trajectory tracking problem of underactuated autonomous underwater vehicles(AUVs)subjected to input saturation and external disturbances.The proposed controller can achieve ... This paper addresses a three-dimensional(3D)trajectory tracking problem of underactuated autonomous underwater vehicles(AUVs)subjected to input saturation and external disturbances.The proposed controller can achieve practical convergence of tracking errors for general reference trajectories,including persistently exciting(PE)time varying trajectories and fixed points.At first,a modified error state formulation is introduced to tackle the situation that desired velocities do not satisfy PE condition.Then,on the basis of the backstepping technique and a Nussbaum-type even function,a saturated controller is designed so that the tracking errors can converge to a bounded neighborhood of the origin.The stability analysis based on Lyapunov theory shows that the tracking errors are globally ultimately uniformly bounded.Finally,some simulation results illustrate the effectiveness and robustness of the proposed control strategy. 展开更多
关键词 underactuated autonomous underwater vehicles(AUVs) trajectory tracking control stabilization control input saturation Nussbaum-type function
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