RANBP17在胶质母细胞瘤中的生物学功能研究

目的探讨RAN结合蛋白17(RANBP17)基因在胶质母细胞瘤(GBM)中的生物学功能。方法采用UALCAN和CGGA数据库分析RANBP17在GBM中的表达及预后价值。采用LinkedOmics数据库筛选与RANBP17表达相关的基因并通过DAVID数据库进行基因功能富集分析。采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测RANBP17在GBM和正常胶质细胞(HEB)中的表达水平。采用CCK8、流式细胞术、Tran-swell方法检测过表达RANBP17对GBM U251细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响;采用ENCORI、miRWalk和miRDB数据库预测RANBP17的上游miRNA。结果RANBP17在GBM中的表达水平低于正常组织(P<0.05);RANBP17在41岁以下、继发性GBM、IDH突变型、MGMT启动子甲基化和1p19q联合缺失的GBM患者中高表达(均P<0.01);500个RANBP17表达相关的基因富集分析显示RANBP17表达相关基因能参与炎症反应、细胞粘附、凋亡过程的负向调控、紧密连接和亚油酸代谢等过程和信号通路;过表达RANBP17降低GBM U251细胞的增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡(均P<0.05);ENCORI、miRWalk和miRDB数据库中有8个共同的miRNAs(hsa-miR-650、hsa-miR-361-5p、hsa-miR-421、hsa-miR-9-5p、hsa-miR-3612、hsa-miR-299-5p、hsa-miR-2115-3p和hsa-miR-19b-3p)调控RANBP17。结论RANBP17可能作为一种抑癌基因参与GBM的发生发展,是GBM潜在的预后生物标志物和治疗靶点。

联合TERT启动子和IDH1的突变在原发性胶质母细胞瘤患者预后分层中的应用

目的探究原发性胶质母细胞瘤(GBM)患者中端粒酶逆转录酶(TERT)启动子突变(TERTp-mut)和异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)突变(IDH1-mut)分别与患者中位生存期(OS)的关系,进一步联合TERTp-mut和IDH1-mut进行预后分层分析。方法通过测序检测114例成人原发性GBM患者的TERTp-mut和IDH1-mut发生情况,采用X2分析TERTp-mut和IDH1-mut与患者年龄、性别之间的关系,单因素和多因素COX回归分析TERTp-mut、IDH1-mut与患者预后之间的关系;Pearson相关分析TERTp-mut与IDH1-mut的相关关系,最后联合TERTp-mut和IDH1-mut进行患者预后的分层分析。结果 114例成人原发性GBM患者中,52例患者(46%)发生TERTp-mut,19例(17%)患者发生IDH1-mut,TERTp-mut和IDH1-mut都与患者性别、年龄无关(均P>0.05)。TERTp-mut、IDH1-mut为患者预后的独立因素(均P<0.05),TERTp-mut患者中位生存显著低于TERTp-wt患者(OS分别为13.1个月及20.6个月;P<0.01);IDH1-mut患者中位生存显著优于IDH1-wt患者(OS分别为46.5个月及3.1个月;P<0.01);TERTp-mut与IDH1-mut负相关,联合TERTp-mut和IDH1-mut将原发性GBM患者分为3个预后分层,其中TERTp-mut/IDH1-mut患者的生存期最长(OS=46.5个月),TERTp-mut/IDH1-wt+TERTp-mut/IDH1-mut次之(OS=16.8个月),TERTp-wt/IDH1-wt生存期最短(OS=13.1个月)(P=0.001)。结论 TERTp-mut和IDH1-mut都是原发性GBM患者独立的预后因素,TERTp-mut提示不良预后,IDH1-mut提示良好预后,TERTp-mut与IDH1-mut负相关,联合TERTp-mut与IDH1-mut分析有助于原发性GBM患者的预后分层。

A new type of dinosaur eggs from Early Cretaceous of Gansu Province, China

甘肃省早白垩世地层中,出土了大量恐龙骨骼以及恐龙足迹化石,但是至今未有蛋化石的报道。根据发现于兰州-民和盆地下白垩统河口组的蛋壳化石,建立一恐龙蛋新蛋属、蛋种,并将其归于一新蛋科:Polyclonoolithidae(多小枝蛋科)。新发现的蛋化石标本不同于所有已知的恐龙蛋类型,具有独特的显微特征组合:分叉的蛋壳单元向外延伸至蛋壳外表面,并未在靠近蛋壳外表面处融合成层;弦切面上具相互链接或独立的多角形的蛋壳单元;以及不规则的气孔道。中国的恐龙蛋化石大多出自晚白垩世地层,仅在辽宁有早白垩世恐龙蛋的报道。新发现扩展了中国恐龙蛋化石的地质和地理分布,也有可能为圆形蛋科蛋壳结构的起源提供新的认识。

高效液相色谱法测定度鲁特韦的手性杂质

目的建立高效液相色谱法测定度鲁特韦的手性杂质。方法色谱柱为DAICEL OJ-RH(150 mm×4.6 mm,5.0 μm),0.2%磷酸水溶液为流动相A,甲醇为流动相B,乙腈为流动相C,梯度洗脱,柱温40℃,流速0.4 mL·min-1,进样量10 μL,检测波长254 nm。结果度鲁特韦与各手性杂质之间的分离度均>1.5;手性杂质A~C的检测限和定量限分别在25~30 ng·mL-1和83~100 ng·mL-1;度鲁特韦和手性杂质A~C在相应质量浓度范围内与峰面积线性关系良好,r均>0.999;手性杂质A~C平均加样回收率均在81.38%~100.7%,RSD<5.0%。1批制剂手性纯度100.0%;3批原料药手性纯度结果均为99.98%,手性杂质A、B均未检出,手性杂质C均为0.02%。结论该方法专属性强,重复性好,准确度高,可作为度鲁特韦手性杂质的控制方法。

TM7SF4在胶质母细胞瘤中的表达及生物学功能研究

目的探讨树突表达特异性7跨膜蛋白(TM7SF4)在胶质母细胞瘤(GBM)中的表达及对增殖、凋亡、肿瘤免疫浸润等生物学功能的影响。方法采用CCK8、流式细胞术、划痕实验、荧光定量PCR(RT-qPCR)分析TM7SF4在GBM中的表达和作用。采用生物信息学分析(包括TIMER、LinkedOmics、DAVID、String、TISIDB和cBioPortal数据库分析)TM7SF4基因的表达、相关差异基因、基因富集和功能分析、免疫细胞浸润等。结果TM7SF4在GBM组织和细胞系中低表达,差异有统计学意义(P<0.01);在GBM细胞U251中干扰TM7SF4基因促进细胞增殖和迁移,抑制细胞凋亡,差异有统计学意义(P<0.01);生物信息学分析TM7SF4表达相关基因主要参与免疫反应和细胞间信号传导等生物过程;TM7SF4的表达与GBM肿瘤免疫浸润B淋巴细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞的表达丰度均呈正相关(P<0.05);TM7SF4基因可能与CCR7、CD80、GZMB、CSF2、CD27、CCL4、CD2、CD1C等基因存在相互作用关系。结论TM7SF4在GBM中低表达,干扰TM7SF4能促进GBM细胞增殖和迁移和抑制细胞凋亡,TM7SF4可能是一个潜在的预后生物标志物和免疫治疗靶点。

采用碳纤维布加固的在役小箱梁承载力效果分析

基于某特大桥中的预制小箱梁段的典型病害,使用有限元软件进行了正截面、斜截面、极限承载力等验算,并提出不同维修加固方法的比选,得出对结构损伤小,施工工期短,且承载力提升多的方案。对加固后桥梁的承载力提升进行有限元模拟验算可知,加固后,小箱梁外边梁边跨跨中及中跨跨中截面、正截面抗弯承载能力提高约6%,满足正常使用要求。