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Developing a duplex ARMS-qPCR method to differentiate genotype Ⅰ and Ⅱ African swine fever viruses based on their B646L genes 被引量:2
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作者 DING Lei-lei REN Tao +6 位作者 HUANG Lian-yu Weldu TESFAGABER zhu yuan-mao LI Fang SUN En-cheng BU Zhi-gao ZHAO Dong-ming 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2023年第5期1603-1607,共5页
Africanswinefever(ASF),causedbythe African swine fever virus (ASFV), is an acute, hemorrhagic, and contagious disease of domestic pigs and wild boars.The disease is notifiable and listed by the World Organization for ... Africanswinefever(ASF),causedbythe African swine fever virus (ASFV), is an acute, hemorrhagic, and contagious disease of domestic pigs and wild boars.The disease is notifiable and listed by the World Organization for Animal Health (WOAH)(Wang N et al. 2019). 展开更多
关键词 SWINE FEVER DUPLEX
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老年人颞下颌关节脱位的诊治-附10例报告 被引量:2
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作者 朱远茂 满城 +2 位作者 郑德鑫 江海涛 蒋练 《中华老年口腔医学杂志》 2023年第2期98-101,共4页
目的探讨颞下颌关节脱位复位的治疗方法。方法对10例老年人颞下颌关节脱位直接复位困难且患有基础疾病的患者,全麻风险高,采用局麻加强化麻醉下行颞下颌关节脱位闭合性手法复位,术后予以颌间牵引钉进行颌间牵引限制下颌运动,观察治疗效... 目的探讨颞下颌关节脱位复位的治疗方法。方法对10例老年人颞下颌关节脱位直接复位困难且患有基础疾病的患者,全麻风险高,采用局麻加强化麻醉下行颞下颌关节脱位闭合性手法复位,术后予以颌间牵引钉进行颌间牵引限制下颌运动,观察治疗效果。结果术中麻醉效果好,术后患者恢复良好,无并发症。结论针对颞下颌关节脱位直接复位困难且患有基础疾病的老年患者,可采用局麻加强化麻醉下闭合性手法复位,结合牵引钉颌间牵引,能够有效治疗颞下颌关节脱位。 展开更多
关键词 颞下颌关节脱位 手法复位 局部麻醉 强化麻醉 老年患者 颌间牵引
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Identification of two novel linear epitopes on the p30 protein of African swine fever virus
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作者 YU Si-hui SHAN Zhao-meng +8 位作者 YANG Jing-jing LIU Yi-ning WU Chang-de ZHANG Zhen-jiang zhu yuan-mao MENG Bo ZHAN Jia-xing WEN Xue-xia ZHANG Ying 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2023年第6期1945-1949,共5页
African swine fever(ASF) is a hemorrhagic disease caused by African swine fever virus(ASFV), which belongs to the Asfarviridae family. ASF has become prevalent in Africa since it was first reported in Kenya in 1921(Ro... African swine fever(ASF) is a hemorrhagic disease caused by African swine fever virus(ASFV), which belongs to the Asfarviridae family. ASF has become prevalent in Africa since it was first reported in Kenya in 1921(Rowlands et al. 2008;Costard et al. 2009). In 1957, it was introduced to Portugal in Europe, after which ASFV rapidly spread to other European countries and has already been eradicated in several countries except Sardinia(Mur et al. 2016). In 2007, ASF was introduced to Georgia and has continued its spread to other countries in Europe(Smietanka et al. 2016;Kolbasov et al. 2018;Garigliany et al. 2019;Linden et al. 2019). In China, an ASF outbreak was first reported on August 3, 2018 in a pig farm in Shenyang, Liaoning Province(Zhou et al. 2018). Since then, the dramatic spread of ASF throughout China has caused huge economic losses to the swine industry(Jiang et al. 2021). 展开更多
关键词 AFRICAN continued SPREAD
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一株牛肠道病毒的分离与鉴定 被引量:6
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作者 宋文凤 向文杰 +4 位作者 林俊 李德栋 陈瑞红 朱远茂 薛飞 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第3期34-39,共6页
本研究从内蒙古某牛场患呼吸道病牛鼻拭子中分离到1株病毒,命名为NM575,并对其进行了鉴定。分离的病毒能够抵抗100μg/m L的DNA抑制剂5-溴脱氧尿苷,确定为RNA病毒。电镜观察可见无囊膜球形的病毒粒子,直径约30 nm,与小RNA病毒形态学特... 本研究从内蒙古某牛场患呼吸道病牛鼻拭子中分离到1株病毒,命名为NM575,并对其进行了鉴定。分离的病毒能够抵抗100μg/m L的DNA抑制剂5-溴脱氧尿苷,确定为RNA病毒。电镜观察可见无囊膜球形的病毒粒子,直径约30 nm,与小RNA病毒形态学特征相符。理化特性鉴定结果表明分离病毒对乙醚、氯仿及胰酶具有一定抵抗力,耐酸,对热敏感,与牛肠道病毒特性相符。应用牛肠道病毒P1基因的特异性引物,通过RT-PCR可从病毒细胞培养物中扩增出特异性片段,对其进行序列测定并与Gen Bank中登录的牛肠道病毒参考毒株及其他种属的肠道病毒参考株相应的序列进行比对及系统进化分析,结果显示分离毒株NM575与牛肠道病毒BHV-261株的核苷酸同源率为80%,进一步说明分离株为牛肠道病毒,且基因分型为EV-F1。病毒的体外细胞培养嗜性试验结果显示,NM575株可感染牛、仓鼠、猪、犬和鸡等多种动物细胞,尤其在牛源细胞中复制滴度最高,为10^(7.6) TCID_(50)/m L。综合以上结果分析确定所分离的病毒株NM575为牛肠道病毒,这是我国首次从患呼吸道病牛鼻拭子中分离获得。 展开更多
关键词 牛肠道病毒 分离 鉴定 理化特性
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绵羊副流感病毒3型PE2019株的分离与鉴定 被引量:2
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作者 朱远茂 陈瑞红 +2 位作者 林俊 杨木娇 薛飞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期434-438,共5页
为了确定引起绵羊呼吸道传染病的病原,本研究于2019年对一患急性呼吸道疾病死亡绵羊的病料进行了病毒分离,从其胸腔积液中分离到一株绵羊副流感病毒3型(OPIV3),命名为PE2019株。该病毒能够在MDBK细胞上增殖,产生细胞圆缩、集聚成簇等为... 为了确定引起绵羊呼吸道传染病的病原,本研究于2019年对一患急性呼吸道疾病死亡绵羊的病料进行了病毒分离,从其胸腔积液中分离到一株绵羊副流感病毒3型(OPIV3),命名为PE2019株。该病毒能够在MDBK细胞上增殖,产生细胞圆缩、集聚成簇等为特征的细胞病变;电子显微镜观察可见OPIV3 PE2019株为直径约300 nm的圆形粒子;经检测该分离株病毒滴度为107.8TCID50/mL。分离株对小鼠和豚鼠的红细胞血凝价均为164,不凝集鸡、兔、绵羊和牛的红细胞。参考山羊副流感病毒3型全基因组序列(MK091103),设计其N和M基因特异性引物,通过RT-PCR可从病毒细胞培养物中扩增到特异性片段,对其进行序列分析,结果显示,分离株N基因序列与山羊、牛和人副流感病毒3型参考株的基因同源性分别为84.0%、82.1%和78.8%,M基因序列与山羊、牛和人副流感病毒3型参考株的基因同源性分别为81.5%、78.4%和77.6%,OPIV3 N和M基因均为独立一个分支。本研究首次于国内分离到OPIV3,为了解国内OPIV3的流行情况及疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 绵羊副流感病毒3型 分离 鉴定
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牛病毒性腹泻病毒重组p80蛋白的间接ELISA方法的建立 被引量:4
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作者 陈瑞红 林俊 +3 位作者 杨立新 杨木娇 朱远茂 薛飞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期252-257,共6页
为建立以牛病毒性腹泻病毒(BVDV)非结构蛋白p80为包被抗原的间接ELISA方法,本研究将重组质粒pET30a-p80转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达菌,将转化菌培养并诱导后,通过SDS-PAGE证实了p80蛋白以包涵体形式获得了表达,将纯化后的重组p80蛋白... 为建立以牛病毒性腹泻病毒(BVDV)非结构蛋白p80为包被抗原的间接ELISA方法,本研究将重组质粒pET30a-p80转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达菌,将转化菌培养并诱导后,通过SDS-PAGE证实了p80蛋白以包涵体形式获得了表达,将纯化后的重组p80蛋白作为包被抗原,通过方阵滴定优化反应条件,建立了检测BVDV血清抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果显示,该方法与BVDV阳性血清反应呈阳性,而与牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛呼吸道合胞体病毒、口蹄疫病毒及猪瘟病毒等常见病原的阳性血清无交叉反应,特异性较强。敏感性试验结果显示本实验建立的间接ELISA方法在阳性血清11280倍稀释时检测结果仍呈阳性,而病毒中和试验结果显示该阳性血清稀释度在1512时检测结果就已为阴性,表明该方法的敏感性较高。重复性试验结果显示批内批间变异系数均小于10%,表明该方法重复性较好。采用本实验建立的方法与病毒中和试验同时检测90份牛血清,结果显示二者的符合率为95%。利用本研究建立的间接ELISA方法对188份采自国内两个不同地区的牛血清样品进行了检测,检出BVDV阳性血清162份,阳性血清检出率为86.2%。本研究建立的检测BVDV血清抗体的间接ELISA方法可用于国内BVDV的血清流行病学调查,为相关疫病的防控提供技术支持。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 重组p80蛋白 间接ELISA
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牛副流感病毒3型核衣壳蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立
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作者 李德栋 向文杰 +2 位作者 林俊 朱远茂 薛飞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期495-500,共6页
为建立以牛副流感病毒3型(BPIV3)核衣壳蛋白(NP)为包被抗原的间接ELISA方法,本研究扩增BPIV3的NP基因并克隆于原核表达载体,获得重组表达质粒p ET30-NP。将其转化至表达菌BL21(DE3),获得了可溶性表达的重组N蛋白,用镍柱在非变性条件下... 为建立以牛副流感病毒3型(BPIV3)核衣壳蛋白(NP)为包被抗原的间接ELISA方法,本研究扩增BPIV3的NP基因并克隆于原核表达载体,获得重组表达质粒p ET30-NP。将其转化至表达菌BL21(DE3),获得了可溶性表达的重组N蛋白,用镍柱在非变性条件下纯化后将其作为包被抗原,建立了检测BPIV3抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果显示作为包被抗原的重组N蛋白仅与BPIV3阳性牛血清发生特异性反应,与牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒等牛的常见病原无血清学交叉反应,表明其特异性较强。牛BPIV3阳性血清在1:640倍稀释时按该方法检测仍为阳性,显示该方法具有较高的敏感性。重复性试验显示批内变异系数小于6%,批间变异系数小于12%,表明该方法具有较好的稳定性。对94份牛血清的比较试验显示,本研究建立的间接ELISA方法与病毒中和试验的符合率为98%。利用该方法检测了394份采自接种过BPIV3灭活苗牛场的血清样品和95份未接种疫苗牛场的血清样品,结果接种疫苗的牛血清均呈强阳性,而95份未接种疫苗牛血清的阳性率为80%。本研究建立的间接ELISA方法可以试用于国内BPIV3的流行病学调查和免疫监测,为国内BPIV3的防控提供技术支持。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3型 重组N蛋白 间接ELISA
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Evaluation of an attenuated vaccine candidate based on the genotype C of bovine parainfluenza virus type 3 in albino guinea pigs
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作者 MA Lei zhu yuan-mao +1 位作者 YANG Ting XUE Fei 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2017年第9期2047-2054,共8页
Bovine parainfluenza virus type 3(BPIV3) is considered as one of the most important respiratory tract pathogens of both young and adult cattle, and widespread among cattle in the world. BPIV3 was first reported in C... Bovine parainfluenza virus type 3(BPIV3) is considered as one of the most important respiratory tract pathogens of both young and adult cattle, and widespread among cattle in the world. BPIV3 was first reported in China in 2008 and four strains of BPIV3 were isolated from Shandong Province, known as genotype C(BPIV3c). Pathogen investigations had shown that BPIV3 c infection was very common among cattle in China. To date, BPIV3 can be classified into genotypes A, B and C based on genetic and phylogenetic analysis. Serological survey also demonstrates that BPIV3 infection is widespread in China, however, there is still no available vaccine for BPIV3 prevention in China nowadays. In the present study, the BPIV3 c strain SD0835 was continuously passaged on Madin-Darby bovine kidney(MDBK) cells for hundreds of times, and the pathogenicity of passage 209 was reduced in guinea pigs. The passage 209 of BPIV3 c strain SD0835 was used as a live vaccine candidate to immunize the guinea pigs. The vaccination results revealed that two vaccinations could induce excellent serum neutralizing antibody responses as well as proliferation of T lymphocytes. The vaccinated guinea pigs were well protected against challenge with a low passage of BPIV3 c strain SD0835. Additionally, the percentages of CD4~+ and CD8~+ T cell subsets of animals in vaccinated group increased after immunization; T cell subsets on day 2 after challenge in both groups decreased, and the decline of CD4~+ and CD8~+ T cell subsets levels of four guinea pigs in vaccinated group was relatively moderate, comparing with that of the control group. These data support further testing of the attenuated virus as an effective candidate vaccine. 展开更多
关键词 bovine parainfluenza virus type 3 attenuated vaccine genotype C guinea pig
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