基于网络药理学的百合抗抑郁作用机制研究

目的:采用网络药理学方法探究百合抗抑郁的作用机制。方法:通过检索中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、BATMAN等在线数据库并结合文献调研,构建百合成分数据库;通过SwissTargetPrediction平台预测各成分潜在作用靶点,构建“成分-靶点”网络;以抑郁症为背景从GeneCards、OMIM、DrugBank数据库获得疾病靶点;通过与百合各成分靶点比对获得百合及抑郁共有靶点;采用Cytoscape构建百合抗抑郁的“成分-靶点-通路”网络,并进行KEGG通路富集分析。结果:通过网络药理学方法筛选得到百合发挥抗抑郁作用的16个生物活性成分,这些成分可作用于88个抑郁症相关的靶标。其中百合皂苷可能是其抗抑郁主要活性成分。百合可通过多靶点(STAT3、AKT1、JUN、VEGFA、TNF、APP、MAPK14、ESR1、AR和HSP90AA1等)参与小胶质细胞激活或衰减及雌激素水平的调节发挥抗抑郁作用,其中晚期糖基化终末产物(AGE)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路、鞘脂信号通路、C型凝集素受体信号通路、雌激素信号通路可能是其抗抑郁关键途径。结论:预测了百合抗抑郁的活性成分和潜在靶点,为百合及其复方抗抑郁机制研究提供参考。

α-Glucosidase Inhibitory Activity-guided Identification of Compounds from Clerodendrum bungei Steud by HPLC-ESI-QTOF-MS/MS

Objective To identify the compounds withα-glucosidase inhibitory activity from Clerodendrum bungei Steud(Chou Mu Dan,臭牡丹)using HPLC-ESI-QTOF-MS/MS.Methods The ethanol extracts of Clerodendrum bungei Steud(Chou Mu Dan,臭牡丹)were partitioned with petroleum ether,ethyl acetate,n-butanol,and water.The assay forα-glucosidase inhibitory activity revealed strongα-glucosidase inhibitory activity in the ethyl acetate fraction,and the bioactive compounds present in this fraction were identified by the HPLCESI-QTOF-MS/MS method.Results A total of 29 compounds were determined,among the identified bioactive components;these included 12 phenylethanoid glycosides(compounds 5,6,17,20-22,24),7 flavonoids(compounds 10,19,23,25-28),5 phenolic acids(compounds 2-4,7,9),and 5 other compounds.Compounds 2-4,7,9-10,12-13,15,19,and 26,with a potentialα-glucosidase inhibitory activity,have been reported previously.Conclusions Our results show that the methodology used in this study is feasible,credible,and rapid in identifying known compounds and also for characterizing new natural glucosidase inhibitory candidates from Clerodendrum bungei Steud(Chou Mu Dan,臭牡丹).

整合网络药理学和生物信息学分析便可通片抗便秘性肠易激综合征分子机制

目的:采用网络药理学联合生物信息学的分析方法,探讨便可通片治疗便秘性肠易激综合征(C-IBS)的潜在作用机制。方法:构建便可通片归经络网,分析方中9味药合用的治疗规律。依托中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库,以口服生物利用度(OB)和类药性(DL)为标准筛选便可通的活性成分及靶点。通过GeneCards,人类孟德尔遗传数据库(OMIM),DrugBank和DisGeNet数据库获得C-IBS治疗相关靶标集,并构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,利用Cytoscape 3.7.2进行网络可视化,筛选关键靶点,在DAVID平台进行基因本体(GO)注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。采用冰水灌胃法制备C-IBS小鼠模型,通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)和免疫组化法验证整合分析中便可通片抗C-IBS关键靶点的表达。结果:大肠经为便可通片治疗的主要病位。便可通片中70个潜在活性成分,可作用于227个交集靶点,通过辅助性T细胞17(Th17)细胞分化,Toll样受体,肿瘤坏死因子等多条信号通路参与炎症反应、免疫调控、肠神经调节、激素调节和氧化应激反应,发挥治疗C-IBS的作用。在体实验发现便可通片可显著提高小肠推进率,上调C-IBS小鼠血清和结肠组织血管活性肠肽(VIP)的表达;且便可通片可降低血清及结肠组织中网络预测关键蛋白核转录因子-κB(NF-κB),白细胞介素-6(IL-6),Toll样受体2(TLR2)的表达,证实了整合分析的可靠性。结论:便可通片通过"多成分,多靶点,多途径"发挥协同抗C-IBS的作用,此研究为深入阐释便可通治疗C-IBS的临床研究及进一步实验验证提供了思路。

HPLC-Q-TOF-MS/MS快速鉴别吴茱萸中的生物碱类组分

目的:应用高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(HPLC-Q-TOF-MS/MS)快速获取吴茱萸中生物碱类组分信息。方法:采用Inter Sustain-C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),以0. 2%甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0 mL·min-1,进样量5μL。检测波长245 nm,采用正、负离子2种模式对色谱流出物进行检测与分析。结果:通过分子离子峰和二级质谱特征碎片离子,结合对照品的质谱信息和相关文献报道,对40余个主要峰进行成分分析,最终从吴茱萸甲醇提取物中鉴定了21种生物碱,包括10种吲哚生物碱,10种喹诺酮生物碱,1种麻黄碱,基本明确了吴茱萸中生物碱的主要类型成分。并且研究发现这几种生物碱类组分主要在正模式下有较好响应。结论:基于HPLC-Q-TOF-MS/MS技术,通过高效液相色谱分离,质谱测定相对分子质量、裂解数据、文献分析检索,能快捷、准确、较全面地鉴定吴茱萸中的生物碱类化学成分,为吴茱萸化学成分的进一步提取分离和药效物质基础的研究提供科学依据。

臭牡丹降糖有效部位化学成分研究

目的:对臭牡丹降糖有效部位化学成分进行研究。方法:臭牡丹乙醇提取物分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到3个提取部位;利用体外α-葡萄糖苷酶活性测定3个提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性来初步筛选臭牡丹降糖有效部位,然后通过高效液相-四级杆-飞行时间-质谱(HPLC-Q-TOF-MS/MS)研究降糖有效部位的化学成分,并通过查阅相关文献初步确定哪些化学成分具有潜在的α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果:通过体外α-葡萄糖苷酶活性测定确定乙酸乙酯部位为臭牡丹降糖有效部位,并从该部位鉴定出29个化合物,包括12个苯乙醇苷,7个黄酮,5个酚酸以及5个其它化合物;通过查阅相关文献,初步确定化合物2~4、7、9~10、12~13、15、19、26具有潜在的α-葡萄糖苷酶抑制活性。结论:利用体外测定α-葡萄糖苷酶活性结合HPLC-Q-TOF-MS/MS技术能快速筛选臭牡丹降糖有效部位以及研究其化学成分;最终,明确了臭牡丹体外降糖的主要化学成分,为寻找更好的α-葡萄糖苷酶抑制剂提供理论依据。