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蓝藻水华水样总氮含量的测定 被引量:1
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作者 祖瑶 陈思语 +3 位作者 罗玉 许晨 洪素娟 李建宏 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期55-60,共6页
为评估蓝藻水华藻密度对水样中总氮含量测定的影响,采用实验室培养纯藻和天然微囊藻水华样品,利用碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法,测定了不同藻密度水样TN的含量并进行了比较分析。研究发现,如果藻密度较高的水样稀释不充分, TN值会被... 为评估蓝藻水华藻密度对水样中总氮含量测定的影响,采用实验室培养纯藻和天然微囊藻水华样品,利用碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法,测定了不同藻密度水样TN的含量并进行了比较分析。研究发现,如果藻密度较高的水样稀释不充分, TN值会被严重低估。对太湖水华水样分析结果表明,叶绿素a与TN的相应值平均为0.156 mg N/μg Chl. a,干藻样的氮含量平均为16%。这些数据有助于估算蓝藻水华对水体TN的贡献。 展开更多
关键词 蓝藻水华 TN测定 含氮量 叶绿素 太湖
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糖原贮积症0型斑马鱼疾病模型的构建及表型分析 被引量:1
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作者 黄姣 霍锦倩 +4 位作者 刘姣 陈洁 祖尧 张庆华 任建峰 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第12期43-52,共10页
目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建糖原贮积症0(GSD0)型斑马鱼疾病模型,研究该病的发病进程和机制。方法针对gys1和gys2基因各设计一个靶点,进行基因编辑和突变体筛选;利用qPCR技术检测早期发育阶段和成鱼不同组织基因表达情况,通过... 目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建糖原贮积症0(GSD0)型斑马鱼疾病模型,研究该病的发病进程和机制。方法针对gys1和gys2基因各设计一个靶点,进行基因编辑和突变体筛选;利用qPCR技术检测早期发育阶段和成鱼不同组织基因表达情况,通过PAS染色技术检测糖原累积情况。结果获得了gys1和gys2基因各两种有效突变类型的F2纯合突变体,成功构建了GSD0型斑马鱼疾病模型。gys^(1-/-)纯合子F3早期胚胎发育迟缓,48 hpf内全部死亡,而gys^(2-/-)纯合子发育正常。基因表达分析显示,野生型斑马鱼早期发育阶段(0~125 hpf),gys1和gys2的表达先下降后上升,受精卵时期表达最高;成鱼阶段,gys1在心脏和肌肉组织中高表达,gys2在肝中高表达。PAS糖原染色显示,与野生型相比,gys^(1-/-)心脏和肌肉没有明显的糖原积累,gys^(^(2-/-))肝没有明显的糖原积累。结论gys1和gys2基因敲除斑马鱼模型的表型与小鼠模型相似,但也存在差异;Gys1敲除小鼠模型中F2大部分纯合子死亡,斑马鱼gys^(^(1-/-))纯合子F2正常生长发育,而自交产生的F3不能存活。斑马鱼gys1和gys2敲除突变体的制备,为进一步研究人类糖原储存障碍GSD0的发病进程和机制提供了材料。 展开更多
关键词 糖原贮积症GSD0 疾病模型 斑马鱼 基因敲除 gys1 gys2
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多曲面喷头静电纺射流形成机制与成膜特性 被引量:5
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作者 权震震 王亦涵 +1 位作者 祖遥 覃小红 《纺织学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第9期39-45,共7页
为实现微纳米纤维的批量化制备,研究了一种新型多曲面喷头静电纺丝装置。利用ANSYS Maxwell 3D仿真软件模拟多曲面喷头的电场强度分布,探究了自由液面射流形成的理论公式。通过多曲面喷头制备了不同质量分数的聚丙烯腈(PAN)微纳米纤维膜... 为实现微纳米纤维的批量化制备,研究了一种新型多曲面喷头静电纺丝装置。利用ANSYS Maxwell 3D仿真软件模拟多曲面喷头的电场强度分布,探究了自由液面射流形成的理论公式。通过多曲面喷头制备了不同质量分数的聚丙烯腈(PAN)微纳米纤维膜,并借助扫描电子显微镜等对纳米纤维膜的形貌及产量进行表征。结果表明:喷头曲面顶部电场强度最大,高聚物液体易产生波动不稳定现象,当电场力大于液体表面张力时将打破平衡状态,从而产生多股射流;通过该静电纺丝装置获得了光滑无串珠的PAN微纳米纤维,其直径随PAN质量分数的增加而增加,且产量是传统单针头的103倍。 展开更多
关键词 静电纺丝 多曲面喷头 有限元分析 射流理论 微纳米纤维 电场力 聚丙烯腈
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Lucy-tag促进海七鳃鳗嗅觉受体细胞膜表达
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作者 高翔 张哲 +3 位作者 李伟明 任建峰 祖尧 张庆华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期727-732,共6页
目的阐明一种多肽标签Lucy-tag对于海七鳃鳗(Petromyzon marinus)嗅觉受体膜表达的促进作用。方法用免疫细胞化学、双荧光素酶报告基因(Luciferase)系统和钙流检测法,验证多肽标签Lucy-tag对于海七鳃鳗嗅觉受体的作用。结果多肽标签Lucy... 目的阐明一种多肽标签Lucy-tag对于海七鳃鳗(Petromyzon marinus)嗅觉受体膜表达的促进作用。方法用免疫细胞化学、双荧光素酶报告基因(Luciferase)系统和钙流检测法,验证多肽标签Lucy-tag对于海七鳃鳗嗅觉受体的作用。结果多肽标签Lucy-tag促进了20个嗅觉受体中13个嗅觉受体的膜表达,并且Lucy-tag不影响嗅觉受体的固有活性,Lucy-tag也不影响G蛋白偶联受体(G protein coupled receptor,GPCR)的IP_3信号通路。结论该技术为寻找嗅觉受体的配体提供了有利的技术手段,为进一步深入研究GPCR与配体的功能奠定了良好的理论基础。 展开更多
关键词 嗅觉受体 G蛋白偶联受体 海七鳃鳗 Lucy-tag 免疫细胞化学 固有活性
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Parametric Effects on Length of Stable Section of Electrospinning Jet
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作者 QUAN Zhenzhen zu yao +2 位作者 LEI Sailing QIN Xiaohong YU Jianyong 《Journal of Donghua University(English Edition)》 CAS 2021年第5期417-423,共7页
While electrospinning is an effective method for fabricating nanofibers with good application prospects,controlling the length of stable section of electrospinning jet is critical and remains challenging.In the paper,... While electrospinning is an effective method for fabricating nanofibers with good application prospects,controlling the length of stable section of electrospinning jet is critical and remains challenging.In the paper,the effects of electrospinning parameters on the length of stable section have been investigated experimentally using polyacrylonitrile(PAN).The results based on single factor experiments and orthogonal experiments showed that the stable⁃jet length increased with the increase of solution concentration,receiving distance,voltage and solution flow rate,and decreased with the enhanced concentration of salt which was commonly utilized as additive to facilitate the spinning.Furthermore,experimental results based on polyethylene oxide(PEO)and polyvinyl alcohol(PVA)showed that the length of stable section changed with increasing salt concentration,and due to the parametric interaction,the change was distinct under different driving voltages or solution concentration conditions. 展开更多
关键词 ELECTROSPINNING stable section NANOFIBER JET orthogonal experiment
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资质认定评审员管理体系构建探索
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作者 祖瑶 《中国检验检测》 2023年第2期90-92,45,共4页
以安徽省综合检测类资质认定评审员为研究对象,通过深入分析资质认定评审员管理的现状及存在的问题,研究加强资质认定评审员管理的要素及有效路径,提出安徽省检验检测机构资质认定评审员管理体系模型和优化建议,有利于资质认定评审员的... 以安徽省综合检测类资质认定评审员为研究对象,通过深入分析资质认定评审员管理的现状及存在的问题,研究加强资质认定评审员管理的要素及有效路径,提出安徽省检验检测机构资质认定评审员管理体系模型和优化建议,有利于资质认定评审员的规范管理。 展开更多
关键词 资质认定 评审员 评审员管理体系 规范管理
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斑马鱼幼鱼嗜中性粒细胞对副溶血弧菌清除的动态变化 被引量:1
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作者 郭欣娅 季策 +4 位作者 谢子健 季帆 祖尧 任建峰 张庆华 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期180-188,共9页
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是人-兽-鱼共患的致病菌,严重威胁食品安全和人类的健康。为了研究宿主嗜中性粒细胞清除细菌感染的动态变化过程,利用红色荧光蛋白标记的副溶血弧菌Vp57RFP菌株感染受精后48 h(hours post fertiliza... 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是人-兽-鱼共患的致病菌,严重威胁食品安全和人类的健康。为了研究宿主嗜中性粒细胞清除细菌感染的动态变化过程,利用红色荧光蛋白标记的副溶血弧菌Vp57RFP菌株感染受精后48 h(hours post fertilization,hpf)的斑马鱼(Danio rerio)幼鱼耳泡,建立局部感染模型,并以大肠杆菌(Escherichia coli)Ec01菌株为对照,系统比较了副溶血弧菌和大肠杆菌的半数致死剂量(median lethal dose,LD50)、存活曲线以及和嗜中性粒细胞相互作用的动态过程,RT-qPCR验证炎症相关基因il1b和il10在感染前后的表达量变化。结果显示副溶血弧菌和大肠杆菌感染斑马鱼幼鱼的LD50分别为7.90×10^8 CFU/mL和1.14×10^11 CFU/mL,与感染大肠杆菌相比,斑马鱼感染副溶血弧菌后招募嗜中性粒细胞的速度更快,且数量更多。RT-qPCR结果发现斑马鱼感染副溶血弧菌后在相同时间点能够激活更高的il1b和il10基因的表达,引起强烈的炎症反应。基于以上研究,我们建立的副溶血弧菌-斑马鱼幼鱼耳泡局部感染模型,为进一步研究嗜中性粒细胞清除副溶血弧菌感染的动态过程,以及深入揭示天然免疫应答机制提供了依据。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 斑马鱼 嗜中性粒细胞 天然免疫
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七鳃鳗KCTD基因家族成员全基因组鉴定及进化分析 被引量:1
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作者 邢璐璐 祖尧 +1 位作者 李伟明 任建峰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期2437-2449,共13页
钾离子通道四聚化结构域(KCTD)蛋白基因家族是一个保守的基因家族,该家族成员的共同特征是具有一个含有BTB保守结构域的N-末端和一个可变的C-末端。KCTD基因的突变或不正常调控与人类多种疾病相关。七鳃鳗是现存最原始的脊椎动物,作为... 钾离子通道四聚化结构域(KCTD)蛋白基因家族是一个保守的基因家族,该家族成员的共同特征是具有一个含有BTB保守结构域的N-末端和一个可变的C-末端。KCTD基因的突变或不正常调控与人类多种疾病相关。七鳃鳗是现存最原始的脊椎动物,作为联系无脊椎动物和脊椎动物之间的桥梁,在生物进化研究中占有重要地位。本研究通过对海七鳃鳗(Petromyzon marinus)和日本七鳃鳗(Lethenteron japonicum)基因组和转录组数据分析,全面系统地鉴定了海七鳃鳗和日本七鳃鳗KCTD基因家族成员,并对其基因结构特征、蛋白保守基序和基因表达模式进行了分析。在海七鳃鳗和日本七鳃鳗中分别鉴定出13个和14个KCTD基因,基因长度和外显子数目在不同KCTD基因间变化很大,KCTD蛋白中4个基序保守性显著,大多数KCTD基因呈泛表达模式,并且在胚胎发育时期明显高表达。除七鳃鳗外,对12个无脊椎动物和脊椎动物代表物种KCTD基因家族成员进行了鉴定,并对KCTD基因家族成员的进化关系进行了分析。根据进化树聚类情况,将KCTD基因家族成员分为11个亚家族。进化分析结果显示,KCTD基因家族从低等的无脊椎动物线虫和果蝇到高等的人类都存在;线虫中仅有5个成员,果蝇中有8个成员,随着物种进化程度由低到高,KCTD家族成员数目呈现增加的趋势;从爬行类开始,脊椎动物KCTD基因数目稳定在24个左右。硬骨鱼类特有的全基因组复制事件影响鱼类KCTD基因数目。本研究结果不仅丰富了七鳃鳗KCTD基因家族信息,同时也对KCTD家族基因间的进化关系进行了探究,为深入研究该家族基因功能提供了一定的依据。 展开更多
关键词 七鳃鳗 KCTD基因家族 基因结构 表达模式 进化
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糖原贮积症Ⅴ型斑马鱼疾病模型的构建及其表型分析 被引量:1
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作者 黄姣 霍锦倩 +4 位作者 刘姣 祖尧 张庆华 李伟明 任建峰 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期11-20,共10页
建立肌型糖原磷酸化酶基因pygma和pygmb突变体斑马鱼疾病模型,对人类PYGM基因突变导致的糖原贮积症Ⅴ型(glycogen storage disease typeⅤ,GSDⅤ)的研究具有重要意义。利用CRISPR/Cas9技术成功敲除了斑马鱼pygma和pygmb基因,分别获得pyg... 建立肌型糖原磷酸化酶基因pygma和pygmb突变体斑马鱼疾病模型,对人类PYGM基因突变导致的糖原贮积症Ⅴ型(glycogen storage disease typeⅤ,GSDⅤ)的研究具有重要意义。利用CRISPR/Cas9技术成功敲除了斑马鱼pygma和pygmb基因,分别获得pygma^((-11bp)-/-)和pygma^((+14bp)-/-)两种纯合突变体,以及pygmb^((+1bp)-/-)和pygmb^((-2bp)-/-)两种纯合突变体。过碘酸希夫糖原染色(periodic acid Schiff stain)实验显示pygma^(-/-)和pygmb^(-/-)纯合突变体心脏和肌肉组织出现明显的糖原累积。对野生型斑马鱼15个早期发育时间点以及12个成鱼组织中pygma和pygmb基因表达分析显示,pygma和pygmb早期发育阶段表达模式相似,从24 hpf到125 hpf,两基因表达量总体呈上升趋势,且pygmb的上升幅度大于pygma的上升幅度。在检测的12个组织中,pygma和pygmb只在少数几个组织中有明显表达。pygma在肌肉组织中表达最高,其次为心脏和皮肤组织;pygmb在心脏、脑、眼睛3个组织中高表达,在肌肉组织中也有表达,但表达量相对较低。斑马鱼pygma^(-/-)和pygmb^(-/-)突变体具有GSDⅤ病肌肉糖原累积的典型特征,该疾病模型的建立为进一步研究糖原贮积症的发病进程、详细机制和药物筛选等治疗策略提供基础数据。 展开更多
关键词 斑马鱼 肌型糖元磷酸化酶 糖原贮积症V型 基因敲除 疾病模型
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先天性心脏病致病基因斑马鱼直系同源基因的鉴定及表达分析
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作者 刘姣 黄姣 +5 位作者 朱哲 祖尧 贾亮 张庆华 李伟明 任建峰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期3658-3671,共14页
先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)较高的发病率(0.69%~0.93%)和致死率是儿童致残和致死的首要原因。虽然环境危险因素涉及,但流行病学研究证明遗传因素是CHD的主要病因。临床上,将CHD分为综合征先心病(Syndromic CHD)和单纯... 先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)较高的发病率(0.69%~0.93%)和致死率是儿童致残和致死的首要原因。虽然环境危险因素涉及,但流行病学研究证明遗传因素是CHD的主要病因。临床上,将CHD分为综合征先心病(Syndromic CHD)和单纯性先心脏(Isolated CHD)。尽管不同脊椎动物心脏腔室数目不同,但是心脏发育的过程和调控的机制具有保守性。斑马鱼胚胎体外发育且透明,内部器官清晰可见,非常适合用于心脏早期发育机制和CHD致病机理的研究。本研究总结了97个人类CHD致病基因,鉴定了其在小鼠和斑马鱼中的直系同源基因,并比较了基因在蛋白水平上的序列相似性。利用Tg(myl7:EGFP)标记斑马鱼心脏的鱼系,收集24 hpf(Hour post fertilization)、30 hpf、36 hpf和48 hpf胚胎期心脏和24 hpf身体(除心脏外的整个鱼体)作为对照,样品利用Illumina平台进行转录组基因表达分析。在93个CHD致病基因斑马鱼直系同源基因中,相对于身体,约50%的基因在心脏早期发育过程中显著上调表达。本研究对CHD疾病遗传诊断和利用斑马鱼疾病模型研究CHD发病机制研究具有重要的理论意义和实践价值。 展开更多
关键词 先天性心脏病 遗传致病基因 斑马鱼 直系同源基因 基因表达
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