醉蝶花主要成分提取及其对黄瓜枯萎病菌的抑菌活性

[目的]确定醉蝶花活性物质最佳提取工艺并分析其主要成分,明确这些主要成分对黄瓜枯萎病菌的抑菌活性与盆栽防效,以期为开发新的植物源农药,推动病虫害的绿色防控、农业的可持续发展提供参考依据。[方法]在单因素试验中,以提取物得率和抑菌率为指标,选取溶剂种类(无菌水以及甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、环己烷和丙酮)、乙醇浓度、萃取时间、料液比、萃取温度5个因素进行单因素试验。乙醇浓度选取20%、30%、40%、50%、60%、70%和80%,萃取时间选取1、2、3、4、5、6、7和8 h八个水平,料液比选取1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8和1∶9七个水平,萃取温度选取20、25、30、35、40、45和50℃七个水平。随后以单因素试验为基础,溶剂选择乙醇,根据萃取时间、温度、乙醇浓度进行正交试验设计。采用GC/MS分析醉蝶花活性物质主要成分,从中选取部分物质对黄瓜枯萎病菌进行处理。[结果]醉蝶花活性物质最佳提取工艺为萃取时间5 h、料液比1∶8、乙醇浓度60%和萃取温度30℃,在此条件下共分离出59种化合物,以牡丹酚含量最多;醉蝶花12种主要成分对黄瓜枯萎病菌的生长具有明显的抑制作用;芳樟醇、牡丹酚和茶香螺烷对黄瓜枯萎病菌的毒力回归方程分别为Y=12.3377+0.4726X(EC50值为0.1692 g·L^(-1))、Y=12.2580+0.5428X(EC_(50)值为0.2943 g·L^(-1))和Y=12.3779+0.4932X(EC_(50)值为0.1962 g·L^(-1));而茶香螺烷、芳樟醇和牡丹酚对黄瓜枯萎病的盆栽防效分别为68.2%、80.6%和75.7%。[结论]醉蝶花主要成分中的茶香螺烷、芳樟醇和牡丹酚可以有效地抑制黄瓜枯萎病菌,对黄瓜枯萎病有很好的防治作用。

血站和单采血浆站协同发展的要素调查

目的分析影响血站、单采血浆站(以下简称浆站)协同发展的要素,探讨血站、浆站协同发展的可行性措施。方法通过血液信息管理系统、血源信息管理系统调取2017—2021年山东省9个市血站和浆站的献血和献浆相关数据,分析献血献浆人数及人员交集情况;数据分析采用卡方检验,通过问卷调查的方法调研有关献血献浆事业协同发展政策和信息化现状及建设期望。结果2017—2021年全山东省9个市的献血总人数高于献浆总人数,均逐年递增,献浆人数增幅显著高于献血人数(131.78%vs 23.90%,P<0.05)。献血献浆交集人员占献血献浆总人数的比例逐年上升,从2017年的0.45%增长至2021年的1.04%,增幅131.11%。94.2%参与调查单位所在行政区未发布促进献血献浆事业协同发展的相关政策文件。期望血站和浆站设置距离间隔50 km以上的居多(63%)。血站与浆站血液管理信息系统互联互通的功能需求前4位的项目为血液检测结果(94.61%)、身份证号(87.54%)、献血献浆记录(85.51%)、健康征询/检查结果(82.15%)。血站、浆站协同发展的要素排在前4位的是政策支持(96.25%)、信息化联网(92.36%)、顶层设计(87.44%)、文化建设(86.58%)。结论献血献浆交集人员逐年上升,主要为献全血与献浆交集的人数,应引起关注。实现献血与献浆事业协同发展,政策支持是推进血站浆站协同发展最关键和基础的手段。推动血液信息化标准体系建设,实现献血和献浆信息共享是血液信息化建设的趋势。完善立法,制定协同发展政策,加强顶层设计,规范献血和献浆宣传,树立献血献浆同样光荣的思想,促进献血和献浆事业协同发展,保障血液安全。

移植肾缺血/再灌注损伤后PBRM1分子表达及作用分析

目的探讨PBRM1分子在移植肾缺血/再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)中的表达及其作用机制。方法选取3组肾脏组织(每组5例),分为正常肾脏组(Control组)、移植术后肾功能稳定组(STA组)、移植肾缺血/再灌注损伤组(IRI组)。采用免疫组化技术检测多溴蛋白1(polybromo 1,PBRM1)在3组中的蛋白表达。结合基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)数据集分析PBRM1在肾脏IRI后的表达,探讨其机制,并通过体外实验验证Pbrm1分子在Th17细胞的表达。结果免疫组化染色结果显示,与Control组和STA组相比,IRI组的PBRM1表达程度显著高于其他两组。经GSE180420数据库分析显示,与Control相比,IRI组PBRM1分子表达水平显著升高,GSEA结果提示PBRM1可促进Th17细胞的功能。体外实验证实,与Th0细胞相比,Pbrm1基因的转录水平在Th17细胞中显著升高。结论移植肾IRI后PBRM1分子表达水平显著升高,PBRM1分子可能通过影响Th17细胞的功能,从而加重肾脏IRI。

基于脂质组学和风味组学分析日龄、品种对鸭胸肌风味的影响

旨在研究日龄、品种对鸭胸肌的脂质组成和风味物质的影响。本研究选取120日龄连城白鸭(LC120),500日龄连城白鸭(LC500),500日龄龙岩山麻鸭(SM500)为研究对象,采集胸肌组织,利用液相色谱-质谱联用技术测定鸭肉脂质组成,顶空固相微萃取结合全二维气相色谱-飞行时间质谱联用技术检测鸭肉中挥发性风味物质组成,用单变量统计检验和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)筛选差异脂质和差异挥发性风味物质,计算相对气味活度值(ROAV),确定影响鸭风味的主要物质。结果显示,在LC120、LC500、SM500中共鉴定出1615种脂质,LC120与LC500和SM500与LC500的比较中分别筛选到26和38个差异脂质,其中LC120与LC500的脂质差异主要为甘油三酯类(triglyceride,TG),SM500与LC500的脂质差异主要体现在磷脂酰胆碱类(phosphatidylcholine,PC)上。进一步分析发现,TG、PC的结构位点上是不饱和脂肪酸时会影响肉类中挥发性化合物的形成,在LC120、LC500中TG侧链sn-2位点存在少量多不饱和脂肪酸,但在SM500中并未发现。风味物质检测结果显示,在LC120与LC500的比较中筛选出1种差异挥发性化合物,为3-乙酰基-2,4-二甲基呋喃;在SM500与LC500的比较中筛选出29种差异挥发性化合物,差异挥发性化合物主要体现在烃类、醛酮类和其他类等。此外,计算ROAV值得到3组鸭肉的关键香气化合物16种,其中2-甲基丁醛和2,3-丁二酮为主要风味物质。综上,本研究筛选到了64种区分3组鸭胸肌肌肉的差异脂质,确定16种挥发性有机化合物是3组鸭胸肌肌肉的关键香气物质,表明连城白鸭风味优于龙岩山麻鸭,品种对肉质风味的影响大于日龄对肉质风味的影响;TG、PC在鸭肉挥发性化合物的形成中起着关键作用,这些为鸭种质资源开发以及我国地方品种鸭风味品质评价提供理论依据和数据支撑。

不同外源添加物下黑木耳废弃菌渣无害化处理效果

为有效提高黑木耳废弃菌渣的无害化处理效率及处理效果,针对黑木耳废弃菌渣堆肥过程中的无害化处理效果进行研究,以堆肥物料组配方式及接种腐熟菌剂种类为变化因子,设置不同物料组配的堆肥处理,跟踪调查堆肥过程中的温度、GI、pH、养分、C/N等技术指标,明确不同外源物质添加下各项指标的变化趋势,以期评价不同处理对堆体无害化处理效果。结果表明:处理F和B温度提升速率最快,均在第4天达到50℃以上,较A、D、E处理提前2 d;高温持续时间也以F处理最长,C、E处理次之。各处理菌渣堆肥发酵时,堆肥物料有碱化的趋势,处理D、E和F的外源物质添加可以抑制碱化趋势;处理F的外源物质添加对于菌渣堆肥有机质提升有促进作用;调控助剂的添加及复合菌剂的倍量使用极大的提高了后期总氮、磷、钾含量,与处理A达到差异显著水平;外源物质添加均降低了碱解氮含量,提高了速效磷和速效钾含量。综上,不同处理对黑木耳菌渣养分的影响存在较大差异,纯菌渣处理物料达到无害化处理的效率明显较其它处理低,通过添加助剂及复合菌剂可以显著提高菌渣的无害化处理效率和堆肥质量,是一种切实可行的黑木耳菌渣无害化处置技术措施。

食用菌菌渣高效降解菌的筛选及主菌株产酶环境优化

为筛选出高效降解食用菌废弃菌渣的复合菌系,有效促进菌渣的降解速率,明确复合菌系主要功能菌株最佳发酵环境。利用富集培养、限性继代培养和低温逐代驯化技术对205份采集的菌源材料进行筛选,通过对纤维素酶活性的测定,选取最佳菌源提取物料。同时采用划线分离培养,分离主要功能菌株,对菌株的产酶条件进行优化。结果表明,从205份菌源提取物质中分离纯化的1个具有较强的纤维素降解能力的材料,发现该菌属于曲霉属,产酶较高的主菌株是聚多曲霉(Aspergillus sydowii),对该菌株的产酶环境优化发现,产半纤维素酶和纤维素酶的最优环境是菌渣35 g·L^(-1)、硫酸铵3.5 g·L^(-1)、吐温-80为1.4 mL·L^(-1)、KH_(2)PO_(4)1.0 g·L^(-1)、MgSO_(4)·7H_(2)O 1.0 g·L^(-1)、NaCl 0.5 g·L^(-1)、FeSO_(4)·7H_(2)O 0.1 g·L^(-1),培养时间为15 d。最终明确了复合菌系中主要功能菌株的菌株类别及其发酵环境,可为废弃菌渣资源的快速降解提供宝贵资源,并为菌渣资源肥向利用提供技术依据。

黄瓜霜霉菌对氟吗啉的抗药性风险研究

丙烯酰胺类杀菌剂氟吗啉具有高效环保、对作物及人畜安全、农用成本低等优点,在生产中广泛使用。为明确黄瓜霜霉菌对氟吗啉的抗药性,采用离体叶盘漂浮法测定了我国广东省、湖北省、江苏省、山东省、北京、辽宁省、吉林省和黑龙江省8个省份13个黄瓜主产区69个黄瓜霜霉病菌株对氟吗啉的敏感性及抗性水平。结果表明:黄瓜霜霉菌对氟吗啉的EC_(50)为0.217 2~2.464 3μg·mL^(-1),EC_(50)平均值为0.728 2μg·mL^(-1)。供试的69个菌株中有2个敏感菌株、60个低抗菌株和7个中抗菌株,无高抗菌株。除山东省的供试菌株对氟吗啉的抗性风险较高以外,其余省份对氟吗啉抗性风险相对较低。总体来说,黄瓜霜霉菌对氟吗啉尚处于低抗阶段。

高效液相色谱法测定阿昔洛韦片含量的仪器比对实验

目的:考察不同高效液相色谱仪测定结果的差异,以保证药品检验结果的准确性。方法:采用《中国药典》2015年版二部阿昔洛韦片的含量测定方法,用Z比分数统计法对实验结果进行统计分析。结果:参加比对的6台仪器实验结果的│Z│值均≤2。结论:6台高效液相色谱仪测定结果准确可靠。

Arntl基因敲除对小鼠T细胞发育及抗感染功能的影响

目的观察Arntl基因敲除对小鼠T细胞发育及抗感染功能的影响。方法构建在T细胞中特异性敲除Arntl基因小鼠(Arntl^(F/F)CD4cre^(+),KO);采用流式细胞术(FCM)检测KO小鼠胸腺和脾脏中T细胞各亚群的比例及数目;检测淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus,LCMV)感染7 d后小鼠脾脏中T细胞各亚群比例、病毒特异性CD8^(+)T细胞的比例,以及CD8^(+)T细胞中IFN-γ的表达水平;qPCR方法检测小鼠脾脏中病毒载量;借助流式细胞仪分选初始CD4^(+)T细胞(CD4^(+)CD25^(-)CD44^(-)CD62L^(+)T细胞),经体外诱导Th1细胞分化,检测表达IFN-γ细胞的比例。结果与对照组(Arntl^(F/F)CD4cre^(-),WT)小鼠相比,KO小鼠胸腺和脾脏中T细胞各亚群的百分比及数目均无明显改变(P>0.05)。感染LCMV后,KO小鼠脾脏中效应T细胞的比例较对照组无明显改变(P>0.05),但分泌IFN-γT细胞的比例显著增多(P<0.05),病毒清除率升高(P<0.05)。此外,KO小鼠初始CD4^(+)T细胞向Th1细胞分化较对照组显著增强(P<0.05)。结论Arntl在T细胞中特异性敲除不影响T细胞的发育,但会增强T细胞抗病毒感染的能力。

Study on the Resistance of Pseudoperonospora cubensis to Cymoxanil

[Objective] The paper was to clarify the sensitivity and resistance of Pseudoperonospora cubensis to cymoxanil.[Method] A total of 69 strains were collected from 13 major cucumber producing areas in eight provinces and cities of Guangdong, Hubei, Jiangsu, Shandong, Beijing, Liaoning, Jilin and Heilongjiang from 2012 to 2016, and their sensitivity and resistance to cymoxanil was determined using leaf disc floating method.[Result] The EC50 of cymoxanil to P. cubensis were 0.006 8-0.134 1 μg/mL and the average EC50 was 0.062 4 μg/mL. The sensitivity of P. cubensis to cymoxanil presented a single-peak curve, which was approximately normal distribution, and no strains with decreased sensitivity were found. The average EC50 (0.062 4 μg/mL) could be used as the sensitivity baseline of P. cubensis to cymoxanil. Among the 69 strains, 16 were low-resistance strains, accounting for 23.19% of the total strains;53 were sensitive strains, accounting for 76.81%, which were dominant populations;and no medium-resistance and high resistance strains were found. The resistance of P. cubensis to cymoxanil ranged from 0.11 to 2.15 times, and the average resistant level was 1.00 times.[Conclusion] Cymoxanil showed strong inhibitory effect against P. cubensis.

他克莫司软膏有关物质测定的影响因素分析

目的:考察测定他克莫司软膏有关物质的影响因素。方法:色谱柱为二醇基柱(Diol)4.6 mm×250 mm,5μm两根串联;以正己烷-正丁基氯-乙腈(7∶2∶1)为流动相;柱温为28℃;流速为1.7 mL·min-1;检测波长为225 nm;进样体积为20μL。选用3种塑料离心管和3种乙酸乙酯分别进行试验。结果:3种塑料离心管均会产生杂质;乙酸乙酯对测定结果会产生影响。结论:测定他克莫司软膏有关物质时应避免塑料和乙酸乙酯对试验结果的影响。

中国药典2015年版尿素含量测定结果影响因素的探讨

目的:考察干燥失重检查项对尿素含量测定结果的影响,为药品质量控制提供参考。方法:用《中国药典》2015年版二部方法对尿素含量进行测定,用《中国药典》2015年版四部通则0831干燥失重测定法测定干燥失重,并对测定结果进行了比较分析。结果:按干燥品计算的测定结果高于原标准测定结果。结论:建议增加干燥失重检查项,含量按干燥品计算,现行检验标准有待修改。

孕早期TPO-Ab与糖代谢及妊娠期糖尿病的关系

目的探讨孕早期抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)与糖代谢及妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法选取于该院产检的孕妇300例,检测TPO-Ab、促甲状腺素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)及抗甲状腺球蛋白抗体(Tg-Ab),根据TPO-Ab阳性及阴性分为两组,收集两组孕妇空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、糖化血红蛋白(HbA1c)数据,以及口服糖耐量结果并进行比较。结果与TPO-Ab阴性组比较,TPO-Ab阳性组HbA1c[(5.73±0.92)%]及Tg-Ab[(7.38±6.44)ng/mL]增高,且组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。TPO-Ab阳性组FBG、TSH、TC及TG水平较TPO-Ab阴性组增高(P>0.05),FT3、FT4较TPO-Ab阴性组降低(P>0.05)。HbA1c与TSH呈正相关(r=0.089、Beta=0.202,P<0.05)。TPO-Ab阳性组GDM发病率明显高于TPO-Ab阴性组(68.53%vs.38.85%,P<0.05)。孕早期TPO-Ab阳性孕妇后期患GDM风险升高(OR=3.43,P=0.015 7)。结论 TPO-Ab阳性孕妇出现糖代谢异常较TPO-Ab阴性孕妇的风险升高。

髓源性抑制细胞通过抑制炎症反应减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的:探讨髓源性抑制细胞(MDSC)对小鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的作用及其可能机制。方法:15只雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、IRI组、IRI+MDSC组,每组5只。所有小鼠采取背部双侧切口,切除左肾。假手术组小鼠暴露右肾50 min后缝合,IRI组夹闭右侧肾蒂50 min后开放灌注,IRI+MDSC组于开放灌注1 h内经尾静脉输注使用C57BL/6小鼠骨髓细胞诱导的MDSC。恢复灌注后24h,留取小鼠血液及肾脏和脾脏组织标本,观察肾组织病理变化,检测血尿素氮和肌酐水平。ELISA检测血清中细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-10水平。流式细胞术检测脾脏中T细胞活化。符合正态分布的计量数据以均数±标准差(±s)表示,采用单因素方差分析比较。结果:与IRI组相比,IRI+MDSC组小鼠肾功能明显改善,血尿素氮和血清肌酐水平均低于IRI组[(29.6±3.1)和(34.1±1.4)mmol/L,(105±13)和(176±20)μmol/L,P均<0.05]。IRI+MDSC组肾小管上皮细胞坏死程度、范围及炎性细胞浸润程度较IRI组减轻,Paller评分优于IRI组[(55.0±3.0)和(40.6±6.7)分,P<0.05]。IRI+MDSC组血清中促炎性细胞因子水平均低于IRI组(P均<0.05),TNF-α分别为(452±55)和(605±73)pg/mL,IFN-γ分别为(405±101)和(576±76)pg/mL,IL-6分别为(459±37)和(863±20)pg/mL;而具有抗炎作用的细胞因子IL-10水平则高于IRI组,分别为(1519±244)和(926±66)pg/mL。同时,IRI+MDSC组小鼠脾脏中活化的CD4+T细胞和CD8+T细胞水平均低于IRI组,分别为(15.6±1.3)%和(20.2±1.4)%、(31.8±1.8)%和(40.4±2.0)%,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:体外诱导MDSC可通过抑制IRI后机体的炎症反应,减轻肾损伤。