BOPPPS教学模式在组织学与胚胎学教学中的应用

组织学与胚胎学是医学生较早接触的一门医学形态学专业课程,是研究机体微细结构、相关功能及人体发生发育的一门学科,是在组织、细胞、亚细胞和分子水平对人体进行的研究[1,2]。由于其研究内容主要是在光镜和电镜下的微细结构,其中很大一部分时间要借助显微镜观察组织切片进行学习。这使得很多学生对所学知识感觉太抽象,知识点零散,逐渐失去学习兴趣。如何使学生快速有效的掌握医学知识,激发学生的学习热情,好的教学设计显得尤为重要。BOPPPS教学法就是一种以学生为中心,能使学生主动投入或者参与学习,形成有效教学效果的一种教学模式。

构建TRAF6基因3’非编码区荧光素酶报告质粒验证及与潜在靶基因TRAF6的靶向关系

背景:前期研究发现miR-146-5p在染氟成骨细胞凋亡时表达上调。目的:构建肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)基因3’非编码区(3’UTR)荧光素酶报告质粒,利用双荧光素酶报告基因验证miR-146-5p与其潜在靶基因TRAF6的靶向关系。方法:采用生物信息学方法预测mi R-146-5p与TRAF6基因的结合位点。采用PCR技术扩增TRAF6基因3’UTR片段,并克隆至p Yr-MirTarget载体,构建野生型重组双荧光素酶报告质粒。实验分6组:①6a-5p-核苷类似物+TRAF6野生型3’-UTR共转组;②无核苷类似物对照+TRAF6野生型3’UTR共转组(对照组);③miR-146a-5p-抑制剂+TRAF6野生型;④TRAF6野生型3’-UTR转染组;⑤p Yr-MirTarget空质粒转染组;⑥正常细胞组。分别将重组荧光素酶报告质粒与miR-146-5p和核苷类似物共转染Saos-2,同时设置无核苷类似物对照、miR-146-5p抑制剂阴性对照和空载p Yr-MirTarget-W3’UTR、TRAF6-W 3’UTR及正常对照。检测6组细胞中荧光素酶活性。将核苷类似物和miR-146-5pinhibitor以及无核苷类似物对照分别转染人成骨细胞Saos-2,裂解细胞提取蛋白后采用免疫印迹检测TRAF6蛋白表达水平。结果与结论:①共转染miR-146-5p mimics的Saos-2细胞中荧光素酶活性为10.103 0±0.558 5、对照组(无核苷类似物-TRAF63’UTR)荧光素酶活性为13.1400±0.7204、抑制剂(inhibitor)组荧光素酶活性为13.707 1±0.434 8、野生型TRAF6 3’UTR质粒的Saos-2细胞中荧光素酶活性为13.202 1±0.456 5。仅转染空质粒的细胞荧光素梅活性为14.706 2±0.441 6,Saos-2细胞中荧光素酶活性本底值为1.126 4±0.126 2。共转染miR-146-5p mimics组明显降低(F=715.789,P <0.000 1),其他3组间与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05);②免疫印迹结果显示,与对照组比较,细胞转染miR-146-5p mimics后TRAF6蛋白表达水平明显下调;③结果说明,TRAF6与mi R-146-5p存在靶向关系。

泡球蚴福尔马林固定标本的分子生物学鉴定方法

目的用分子生物学的方法对福尔马林固定液中浸泡的泡球蚴标本进行鉴别诊断。方法从感染多房棘球绦虫的大鼠体内提取泡球蚴病理组织,用福尔马林固定液分别浸泡6个月和12个月,将经浸泡后的组织提取DNA,用多房棘球绦虫的特异性引物EmH15/17进行扩增,与多房棘球绦虫的线粒体12SRNA序列对比,从而进行虫种鉴定。结果在扩增的43例样本中,福尔马林固定液中浸泡6个月和12个月的泡球蚴组织分别有25例和18例,经PCR扩增后比对,发现均与多房棘球绦虫具有相同序列。结论用这种分子生物学方法,可以使保存于福尔马林固定液中鼠来源的泡球蚴标本得到较满意鉴定,预示这种方法对于人体来源的泡球蚴福尔马林固定标本的分子鉴定工作具有可行性。

氟骨症中成骨细胞损伤机制的研究进展

氟是一种在生物圈内广泛分布的化学性质极其活泼的非金属元素。现代科学认为,微量的氟对生物体的生长、发育以及健康的维系起着不可或缺的促进作用[1],但是由于地质构造、工业污染等客观原因,部分地区居民系统暴露于自然高氟环境,因而患染了一系列慢性全身性疾病,是为地方性氟中毒[1]。我国是世界上地方性氟中毒流行较严重的国家之一[1]。临床研究发现,氟极易在骨组织中蓄积,造成氟骨症[2]。作为地方性氟中毒的基本病症,成骨活跃和骨转换加速是氟骨症进展的根本原因,也是临床表型多样的病理基础[2]。成骨细胞是由间充质干细胞经多种因素共同作用逐渐分化形成的一种分泌细胞,是骨形成的基本功能单位,在骨的生长、发育和骨损伤修复过程中均起到重要作用[2]。

Effect of sodium fluoride on expression of PI3K/Akt signal molecules and apoptosis in human osteosarcoma Saos-2 cells

To investigate the mechanism of fluoride induced apoptosis of osteoblasts in PI3K/Akt pathway and to understand the pathological mechanism of fluoride-induced apoptosis of osteoblasts.Osteoblasts were exposed to fluoride at 0(control group),5.0,10.0,20.0,40.0 mg/L sodium fluoride at the concentration of fluoride.The changes of PI3K-Akt signaling pathway and mitochondrial apoptotic pathway-related molecule FoxO1 were detected after 24 h and 48 h.