动物免疫学线上线下混合式教学融入课程思政的方法及实践

目的:在动物免疫学课程中真正实现思想政治教育和专业教育的深度融合,有效提升学生的综合素质。方法:实验采用了动物免疫学线上线下混合式教学融入课程思政的教学方法,对课程设计理念、教学目标、教学设计和教学实施进行研究,并且从成绩和思政效果对教学成效进行评价。结果:表明该新型教学模式能够激发学生的学习兴趣,有助于提高学生考试成绩和综合能力的培养。结论:该方法教学效果良好,实现了立德树人的根本任务。

猪链球菌靶向DC重组蛋白DC3pep-SDZ对斑马鱼的免疫保护性分析

为了探究本课题组前期构建的由猪链球菌(SS)的分泌型DNA核酸酶A(SsnA)、二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLDH)和高亲和力锌摄取系统蛋白(ZnuA)3个毒力因子的优势细胞表位和树突状细胞靶向肽(DC3pep)串联而成的重组蛋白DC3pep-SDZ(SsnA-DLDH-ZnuA)对致病型SS攻击斑马鱼的免疫保护效果,本试验表达和纯化重组蛋白DC3pep-SDZ和SDZ,分别免疫AB系野生型斑马鱼,攻击致病型2、3和9型SS(SS2、SS3和SS9),计算存活率,采用苏木精-伊红(H.E.)染色法观察斑马鱼脑组织病理变化,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析SS3感染斑马鱼后脑组织炎性细胞因子表达量变化。结果显示,诱导表达的重组蛋白DC3pep-SDZ和SDZ分子质量分别为44和42 kDa,2个蛋白均以可溶的形式表达。SS2、SS3和SS9攻击斑马鱼后,重组蛋白DC3pep-SDZ组和重组蛋白SDZ组斑马鱼存活率分别为50.0%、65.0%和60.0%,45.0%、47.3%和45.0%,两组间差异不显著(P>0.05),但与PBS对照组相比差异均极其显著(P<0.001)。H.E.染色镜检结果显示,重组蛋白DC3pep-SDZ组的斑马鱼被3种分型SS攻击后脑组织均无明显病理变化。RT-qPCR结果显示,重组蛋白DC3pep-SDZ组促炎细胞因子:与PBS对照组相比较IL-6、TNF-α和IFN-γmRNA表达量分别极显著(P<0.01)、极其显著(P<0.001)和极显著(P<0.01)下调,与重组蛋白SDZ组相比较IL-6和TNF-αmRNA表达量分别极显著(P<0.01)和显著下调(P<0.05);重组蛋白DC3pep-SDZ组抗炎性细胞因子:与PBS对照组相比较IL-10和TGF-β1 mRNA表达量分别极显著(P<0.01)和极其显著(P<0.001)上调,与重组蛋白SDZ组相比较TGF-β1 mRNA表达量显著上调(P<0.05)。结果表明,重组蛋白DC3pep-SDZ较SDZ具有更好的免疫原性,能产生SS2、SS3和SS9交叉免疫保护作用,同时还能够有效缓解斑马鱼感染SS3后的脑部炎症。

活血通络解毒汤对血瘀蕴毒型子宫内膜异位症患者临床疗效及CA125、CRP水平的影响

目的探讨活血通络解毒汤对血瘀蕴毒型子宫内膜异位症患者临床疗效及糖类抗原125(CA125)、C反应蛋白(CRP)水平的影响。方法选取120例血瘀蕴毒型子宫内膜异位症患者随机分为观察组(n=60)和对照组(n=60)。对照组采用孕三烯酮胶囊治疗,观察组在对照组基础上采用活血通络解毒汤治疗,比较两组的临床疗效、CA125、CRP水平。结果观察组治疗总有效率为95.00%,明显高于对照组的80.00%(P<0.05)。治疗3个月经周期后,两组的CA125、CRP水平降低,且观察组CA125、CRP水平低于对照组(P<0.05)。结论活血通络解毒汤治疗血瘀蕴毒型子宫内膜异位症,可明显提升临床疗效,降低患者CA125、CRP水平,值得临床推广应用。

麦卢卡蜂蜜促健康功能研究进展

随着我国人民生活质量的提高,一些国外的进口蜂蜜进入我国市场,麦卢卡蜂蜜作为一款新西兰的特色高价值蜂蜜,具有良好的市场占有率和认可度。消费者和相关领域科研、技术工作者期望从专业角度认识麦卢卡蜂蜜的生物学活性和医学价值。该文系统介绍了麦卢卡蜂蜜中碳水化合物、黄酮类/酚酸类化合物、甲基乙二醛、矿物质和蛋白质的组分特征,分析和总结了其抗病原微生物机理、调节炎症模式、抗损伤效应、抗肿瘤机制、影响神经系统功能,结果表明麦卢卡蜂蜜具有优秀的促健康品质,且作用机理较为明确,在通过食疗替代改善亚健康方面具有重要意义。因此,对麦卢卡蜂蜜促健康功能的综述,可使消费者全面了解麦卢卡蜂蜜的特点,也为蜂产品和基于优质蜂蜜为原材料的促健康食品研发提供借鉴经验。

不同菌种发酵对诺丽果酵素的抗氧化性及风味物质的影响

为比较不同菌种发酵对诺丽果酵素品质的影响,选用鼠李糖乳杆菌12(LGG)、植物乳杆菌08(LP-08)、植物乳杆菌K11(LP-K11)、戊糖片球菌03(PP)、乳双歧杆菌36(BLA)分别对诺丽果汁进行发酵,比较不同菌种发酵对诺丽果汁的理化性质、抗氧化活性及风味物质的影响。结果显示:LP-08发酵后产酸能力最强,其次是BLA;LP-08利用还原糖的能力最强;发酵第5 d时,LP-08和LP-K11多酚含量显著提升29.74%和28.54%(P<0.05);BLA发酵3 d后SOD酶活力显著提高44.59%,LP-08发酵5 d时显著提高43.58%(P<0.05)。LP-08、LP-K11和BLA发酵3~7 d时有利于诺丽果酵素抗氧化活性的提升。BLA发酵后乳酸含量显著提高23.89倍(P<0.05),其次是LP-K11和LP-08。LP-08发酵后总体感官品质最好,发酵后增加了10种小分子有机酸、5种醇及其衍生物、4种醛类和3种酯类,赋予了诺丽果酵素奶酪香、花香和果香。与其它菌株相比,LP-08发酵产酸、产SOD酶能力较强,具有较高的抗氧化活性和良好的感官品质,在诺丽果酵素的生产中具有更大的研究和应用潜力。

基于“心主神志”理论探讨癌因性失眠治疗思路

基于中医“心主神志”理论探讨癌因性失眠的治疗思路,重点阐述心神与癌因性失眠关系,因癌病、治疗、情志而扰神导致失眠。治疗癌因性失眠,药物治疗着重选取具有扶正养神、祛邪安神、芳香安神、重镇安神等功效为主的药物,非药物治疗包括针灸调神、情志疗法、导引调神等。

猫传染性腹膜炎诊断与治疗

猫传染性腹膜炎是由猫冠状病毒引起的渐进性、高致死性疾病。患猫可能出现食欲减退、精神沉郁、体重下降、发热、呼吸困难等症状。本文对两例幼龄公猫进行临床、血液学、影像学检查,均出现不同程度的胸腹腔积液,并伴有贫血、总胆红素升高、白蛋白与球蛋白比值降低等情况,结合猫冠状病毒核酸检测结果,病例1确诊为湿性猫传染性腹膜炎,病例2确诊为混合性猫传染性腹膜炎。对两病例使用核苷类似物GS-441524制剂并配合保肝药物,进行数月跟踪治疗,各项指标恢复正常,治疗效果显著。本文可为猫传染性腹膜炎的诊断和治疗提供一定的参考意义。

裂解性噬菌体内溶酶和穿孔素抗革兰阴性菌的研究进展

随着细菌耐药情况的日益严重,人们开始寻找抗生素的代替物,噬菌体内溶酶(endolysin)和穿孔素(holin)受到了关注。其中内溶酶展现了良好的抑菌潜力,与抗生素和噬菌体制剂相比有着一定的优点。而内溶酶的作用特点决定了其在抑制革兰阴性菌时需要穿孔素的协同,因此有研究利用基因工程把内溶酶和穿孔素进行重组来解决这一问题。此外,在噬菌体-细菌相互作用的研究中,已有研究表明噬菌体基因参与调控细菌间的通讯系统,内溶酶和穿孔素正是其中重要的调控因素。本文通过对噬菌体与噬菌体制剂的研究进展、内溶酶和穿孔素抗革兰阴性菌的研究进展及其应用进行了综述,以期为未来有关噬菌体裂解酶的研究提供思路。

MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原A9(MAGE-A9)、MAGE-A11-和Ki67在喉鳞状细胞癌组织中的表达,并分析其与喉鳞状细胞癌患者临床病理学特征及预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2012-2014年住院手术切除的喉鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织标本各73例,同时选取该院3例前列腺癌住院患者去势治疗术后的睾丸组织作为阳性对照,应用免疫组织化学法检测喉鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织中MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67蛋白的表达水平。结果:喉鳞状细胞癌组织中MAGE-A9、MAGE-A11蛋白和Ki67的表达率[47.94%(35/73)]、[49.32%(36/73)]和[46.58%(34/73)]均显著高于相应的癌旁组织[0(0/75)(P<0.01)],MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者的临床分期和淋巴转移有关(P<0.05),Ki67LI表达与喉鳞状细胞癌患者的肿瘤大小、临床分期和淋巴转移有关(P<0.05)。相关性分析显示,MAGE-A9和MAGE-A11蛋白表达均与Ki67指数呈正相关(r=0.258,P=0.027;r=0.672,P=0.001)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67LI蛋白高表达阳性患者的生存率均显著低于低表达的患者,而且MAGE-A9和Ki67LI均高表达或MAGE-A11和Ki67LI均高表达患者的生存期均显著低于其单一高表达或均低表达的患者(P<0.05或P<0.01)。单因素和多因素Cox回归模型分析进一步提示,MAGE-A9蛋白和MAGE-A11蛋白是喉鳞状细胞癌患者总体生存的独立预后因素(P<0.05)。结论:MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67是喉鳞状细胞癌的肿瘤相关抗原,其可作为预测喉鳞状细胞癌患者的预后指标。

延续性护理在痛风患者中的应用效果

目的对延续性护理在痛风患者中的应用进行效果观察。方法将所有参与实验的患者按就诊的顺序号分两组,观察组的对象为单号的患者(n=63),对照组的对象为双号的患者(n=63)。观察组患者出院后即实施延续性护理,对照组患者在出院时进行出院指导,出院后无跟进措施。半年后调查患者对护理的满意度、遵医行为和痛风复发率,并比较其在两组中的差别。结果满意度调查包括服务态度、用药护理、疼痛护理、饮食护理、知识宣传等方面,观察组均显著高于对照组(P<0.05);观察组遵医总数比例为87.3%明显高于对照组遵医总数比例68.3%(P<0.0 5);痛风复发率方面,观察组为4.8%,对照组为22.2%,前者显著低于后者(P<0.05)。结论延续性护理使痛风患者对护理的满意度有了明显的提高,并形成良好的遵医行为,同时降低了痛风的复发率,这一护理模式值得在临床工作中进一步推广。

菜心SOD基因的克隆及其在低温条件下的表达分析

采用同源克隆法从菜心中获得3个SOD基因,并进行生物信息学分析,采用qRT-PCR分析3个基因在不同组织器官和低温胁迫下的表达模式。结果表明:(1)获得Cu/Zn-SOD、Fe-SOD、Mn-SOD基因的ORF,分别命名为BclCZSD、BclFSD、BclMSD,序列长分别为459、639、696bp,分别编码152、212、231个氨基酸。(2)生物信息学分析显示,3种蛋白均为稳定的亲水性蛋白,均不存在跨膜结构和信号肽,BclCZSD的二级结构以无规则卷曲为主,含有2个Cu/Zn-SOD结构域,BclFSD和BclMSD的二级结构以α-螺旋为主,含有一个相同的Mn/Fe-SOD结构域;进化分析显示BclCZSD和BclMSD与油菜最先聚在一个分支,BclFSD与甘蓝、萝卜、油菜、芜菁聚在一个分支。(3)qRT-PCR结果显示,BclCZSD、BclFSD和BclMSD基因在菜心根、茎、叶和叶柄中均有表达,且在根、茎、叶和叶柄中的表达模式不完全相同;低温条件下,3个基因的表达量随着胁迫时间的延长均呈先升高后降低的变化趋势。研究结果为进一步探讨菜心SOD基因在低温胁迫下的响应机制奠定了基础。

茄子小孢子再生体系的优化

【目的】开展影响茄子(Solanum melongena)小孢子愈伤组织诱导、生长和分化的研究,为茄子小孢子再生体系的建立及应用提供技术支持。【方法】以二倍体茄子游离小孢子为材料,探讨培养方式、诱导条件、培养基配方等若干因素对茄子小孢子愈伤组织诱导、生长和分化的影响,初步建立茄子小孢子培养体系。【结果】黑暗静止培养条件下采用2~3次更换部分新鲜培养基利于愈伤组织诱导和生长;愈伤组织分化培养时,愈伤组织直接转接到固体培养基时其成活率与大小有关,>2 mm时其成活率可达82.67%以上,固液共培对愈伤组织大小要求不严格,添加1~2 mL N3液体培养基时有利于愈伤组织生长和成活,液体培养基>2 mL会降低愈伤组织分化培养成活率;在添加36 g/L甘露醇的MS固体培养基培养的愈伤组织转绿(成熟)率最高,达94.64%;ZT 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L 激素组合有利于芽分化,分化率达57.78%。【结论】黑暗静止培养时,定时更换部分培养基利于愈伤组织诱导和生长,添加1~2 mL N3液体培养基固液共培养时愈伤组织成活率最高,生长快,固体培养基附加 36 g/L甘露醇和ZT 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L 激素组合有利于愈伤组织分化。

瓠瓜幼叶转录组功能基因测序及分析

为探讨瓠瓜转录组功能基因信息,对福州芋瓠瓠瓜叶片进行了Illumina Hiseqxten高通量无参转录组测序分析,共获得664 252 268个reads片段,经序列组装共计获得87 518个Unigene,总长度高达91 405 320 bp,76.03%的Unigene长度主要集中在1~1 000 bp。功能注释结果显示,有55 725个Unigene在Nr数据库获得注释,注释到葫芦科的Unigene数量最多,有26 354个,占总Unigene的47.29%。GO数据库注释到18 278个Unigene,可以分为分子功能、细胞组分和生物学过程共三大类的55个亚类。COG数据库中有41 635个Unigene获得注释,分布在信息存储与处理、细胞过程和信号传递、新陈代谢、无特征基因四大类的25个功能区域,其中参与氨基酸运输和代谢的Unigene数量最多。KEGG数据库中有24 770个Unigene获得注释,涉及到220个KEGG代谢途径。SSR位点检索结果显示,包含SSR序列的8 617条Unigene中存在11 029个SSR位点,发生频率为9.846%。本研究结果为进一步深入开展瓠瓜功能基因研究和SSR分子标记开发奠定了重要基础。

软腐病菌侵染下菜心叶片的转录组分析

为探讨软腐病菌侵染下菜心转录组功能基因信息,采用BGISEQ-500高通量测序技术对软腐病菌侵染下菜心叶片进行转录组测序,平均每个样获得47.27 M clean reads,Q20值均大于95%,共检测到表达的Unigene为36760个,其中已知的有35327个,预测新Unigene有1433个;共检测出19549个新转录本,其长度主要集中在300~2000 nt。功能注释结果显示,有32047个Unigene在Nr数据库获得注释,其中注释到芸薹属白菜上的Unigene最多;GO功能共注释到12588个Unigene;KEGG数据库注释到18583个Unigene,涉及到137个代谢通路。共获得21776个组间差异表达基因(differential expression genes,DEGs),其中对照与发病前期组间的DEGs有15007个,6137个上调表达,8870个下调表达;发病前期与发病中期组间DEGs有13118个,10278个上调表达,2840个下调表达;发病中期与发病后期组间DEGs有11293个,1790个上调表达,9503个下调表达。DEGs的Ven图分析显示5110个基因在每组间均存在差异,DEGs功能分析显示DEGs参与泛素蛋白降解途径、过氧化物酶体途径、光合碳固定途径、糖酵解途径等多种生命活动。本研究结果为深入开展菜心抗软腐病基因组学和分子生物学研究奠定基础。

基于瓠瓜转录组测序的EST-SSR标记的开发及其应用

为丰富瓠瓜分子标记库、开发瓠瓜SSR标记、寻找有效的瓠瓜种质资源鉴定方法,利用MISA软件对瓠瓜转录组测序获得的87 518条unigene序列进行筛选,共检测出11 029个SSR位点,发生频率为9.85%,分布距离为平均每8.3 kb有1个SSR位点。其中只包含1个SSR位点的unigene序列有6759条,其发生频率为7.72%;有1858条unigene序列含有2个及2个以上的SSR位点,发生频率为2.123%;有920条unigene序列属于混合形式的SSR标记,频率为1.051%。瓠瓜转录组中优势重复基序为单核苷酸、三核苷酸和二核苷酸,分别占总SSR位点的55.51%、25.41%和17.07%。A/T、AG/CT和AAG/CTT分别是单核苷酸、二核苷酸和三核苷酸的优势重复基元,分别占总SSR重复类型的98.22%、55.39%和39.86%。用Primer 3.0共设计出8617对SSR引物,利用6对条带清晰、多态性稳定的SSR引物构建了36个品种的指纹图谱,部分位点具有高度的一致性,说明基因来源范围较小。聚类分析显示,在相似系数为0.68时将36个瓠瓜品种分为6类。其表明我国瓠瓜品种资源遗传多样性非常狭窄,利用现有瓠瓜资源开展品种选育潜力有限,应加强对野生特异种质的引进与发掘利用。利用瓠瓜转录组数据进行SSR标记开发,获得的SSR位点能为其遗传多样性分析和遗传图谱构建提供更丰富可靠的标记选择。

最低工资标准对企业创新行为的影响——兼论企业间创新资源的再配置

本文使用1998—2009年中国工业企业数据库,从创新投入和创新产出双重维度探讨了要素驱动增长模式下最低工资标准上涨对企业创新行为的影响。研究发现,最低工资标准上调显著抑制了企业研发投入和新产品产值的提高。这一影响对不同类型的企业存在异质性。具体而言,相较于低生产率、低加成率、低工资和融资约束较紧的企业,最低工资上涨对高生产率、高加成率、高工资和融资约束较松企业创新行为的负向影响较小。由于后者在创新投入和创新产出上均存在显著优势,最低工资上涨显著扩大了同一行业内企业之间在创新投入和创新产出的差距,进而使行业内创新资源配置的不平等态势扩大。此外,企业所有权的异质性影响结果表明,最低工资上涨对企业创新行为的负向冲击主要体现于民营企业样本。整体上,由劳动力成本上涨引致的融资约束收紧是导致这一负向冲击的主要原因。

基因芯片研究针刺人迎穴对SHR主动脉弓基因表达的影响

目的应用基因芯片观察针刺人迎穴对SHR主动脉弓基因表达的影响。方法将20只SHR大鼠随机分为模型组、人迎组,10只WKY大鼠作为空白组。人迎组大鼠双侧人迎穴进行针刺干预,并记录各组大鼠收缩压变化。4周后剪取大鼠主动脉弓,进行基因芯片检测。结果与模型组比较,人迎组大鼠收缩压显著降低(P<0.05)。模型组与空白组相比,452个基因表达上调,245个基因表达下调;人迎组和模型组相比,261个基因表达上调,986个基因表达下调。KEGG通路分析显示在模型组VS空白组、人迎组VS模型组分别发现了12条、10条显著表达(P<0.05)的差异通路。结论针刺人迎穴降压机制可能与调控高血压血管重构的细胞外基质受体相互作用通路及通路中的相关基因表达有关。

菜心BclUBE2基因的克隆与表达分析

采用同源克隆法从菜心中获得cDNA全长459 bp的E2基因,命名为BclUBE2。该基因编码153个氨基酸,分子量为17.24ku,理论等电点为5.37,为亲水性非分泌蛋白。结构分析显示,该蛋白含有一个泛素结合酶E2活性位点、一个WD重复序列和一个高度保守的半胱氨酸。进化分析发现,菜心BclUBE2蛋白与芸薹属芜菁和油菜的亲缘关系较近。qRT-PCR分析表明,菜心BclUBE2基因在根、茎、叶、叶柄中均有表达,且表达丰度和变化趋势不同。在低温胁迫下,根中的表达量呈现先降低后升高的变化趋势,且在处理1 h时表达量最低;在茎、叶、叶柄中均呈现先升高后降低的表达趋势,茎和叶柄处理6 h时的表达量最高,叶片处理1 h时的表达量最高。说明菜心BclUBE2基因在响应低温胁迫中发挥作用。

互联网深化、信息不确定性与企业出口平稳性

互联网作为信息搜寻和传播的重要渠道,有利于缓解国际市场不确定性对企业出口决策的影响,从而有助于稳定企业出口预期,保障出口企业的持续生存。本文首先基于Fernandes和Tang(2014)的研究框架将互联网深化程度和出口集聚同时纳入到异质性贸易企业模型,在剥离出口集聚对企业出口行为影响的基础上,从理论视角揭示了互联网深化程度提高影响企业出口行为特别是出口持续生存的内在机理与方向。研究发现,不同于出口集聚会同时影响企业的需求冲击和成本冲击,互联网深化带来的信息溢出效应会通过贝叶斯法则(Bayesian Rule)使得企业修正其对国际市场不确定性的预期,提高其对目的国市场成本冲击的估计精度,从而在互联网深化程度较高的城市,企业进入出口市场的临界生产率较低,有利于其出口参与度和出口稳定性的提高。然而互联网深化程度提高不影响企业在目的国市场产品出口的集约边际。本文使用2000-2013年中国工业企业数据库、中国海关数据库和中国城市统计年鉴数据库的匹配数据从企业-目的国-产品层面实证检验了本文的理论命题。研究表明,我国政府应充分发挥互联网发展降低信息不确定性的微观机制,以推动外贸的平稳增长。

喉鳞状细胞癌中细胞外调节蛋白激酶抑制剂对Fra-1基因表达的影响

目的检测细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal regulated protein kinase,ERK)、(Fos related antigen-1,Fra-1)基因在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous carcinoma cell,LSCC)中表达情况,观察喉癌Hep-2细胞中应用ERK抑制后Fra-1表达变化,分析LSCC中Fra-1表达在多个参数组别中的影响。方法采用免疫组化SP法检测47例LSCC和21例癌旁组织中ERK和Fra-1表达情况,逆转录-多聚酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测加入ERK抑制剂(SCH772984)实验组与对照组的人喉癌Hep-2细胞中Fra-1 mRNA表达量,分析LSCC中Fra-1基因蛋白表达与各参数的关系。结果 LSCC中ERK、Fra-1蛋白表达均高于癌旁组织ERK(P<0.01),Fra-1(P<0.05),实验组中Fra-1mRNA表达量明显低于对照组(P<0.01)。LSCC中Fra-1蛋白水平表达与临床分期、淋巴结转移、吸烟相关,与病理分级、年龄、解剖分区无关。结论 LSCC中ERK、Fra-1蛋白水平表达均增高,Hep-2细胞中ERK基因受抑制后明显降低Fra-1基因的表达活性。ERK和Fra-1基因之间可能关联表达促进喉癌的发生与发展。