黄河口滩涂翼内茧型藻的分离鉴定及盐度适应性分析

从黄河口滩涂泥样中分离得到11株底栖微藻,经形态学和分子生物学鉴定,这11株微藻与翼内茧型藻属的藻株亲缘关系更近。为了解这11株微藻的盐度适应性,首先比较了这11株微藻在两个极端盐度(5、80)下的生长情况,并筛选出3株藻株(HaF、HaI和HaB)用于比较不同盐度(5、25、45、65、85)对藻株生长、光合潜力及生化组分的影响。研究表明,在实验盐度下,藻株HaF、HaI和HaB生长的最适盐度分别为25、25和45,在该盐度条件下,这3株藻株具有最高的比生长速率和光合色素含量。3株藻株的叶绿素荧光参数(Fv/Fm和ETRm)均随着培养时间的延长而逐渐降低,HaF、HaI藻株的光合潜力在各盐度条件下变化显著。HaF、HaI和HaB藻株的总脂含量均在盐度为5时最高,分别为68.231%、60.125%和63.324%;HaF、HaI和HaB藻株的总多糖含量在盐度为85时最高,分别为9.784%、8.132%和10.302%。研究结果表明,来自滩涂分离的翼内茧型藻具有广范的盐度适应性。本研究结果可为深入研究滩涂藻类盐度适应性机制提供参考。

隐秘小环藻藻际细菌分离鉴定及其对藻细胞生长的影响

为了解隐秘小环藻(Cyclotella cryptica)共生细菌对其生长的影响,本文运用稀释梯度涂布法分离纯化藻液中的细菌,检测了藻菌共培养液中的溶解有机碳(Dissolved organic carbon, DOC)、溶解无机碳(Dissolved inorganic carbon, DIC)及胞外聚合物(Extracellular polymeric substances, EPS)含量的变化,比较了分离菌株对微藻生物量和脂质的影响,初步探究了藻菌之间的相互作用模式。研究显示,从隐秘小环藻藻液共分离纯化8株可培养细菌,通过比对菌株的部分16S rDNA序列,完成了其分类学鉴定。其中,菌株C-1和C-7为隐秘小环藻的优势促生菌,分别将藻细胞密度提高了27.1%和23.9%。与菌株C-1共培养的隐秘小环藻,脂质含量高达43.53%,脂质产率为16.69 mg·L^(-1)·d^(-1),比无菌纯培养对照组的脂质产率提高了37.37%。碳交换研究结果显示,共培养7 d后,2个促生菌株构建的共培养体系中DOC含量显著低于无菌纯培养对照组;DIC含量显著高于无菌纯培养对照组。与无菌纯培养对照组相比,藻菌共培养导致培养上清液中EPS的多糖和蛋白含量显著降低,而细胞结合态EPS的多糖含量在前4 d高于对照组,之后显著降低,但细胞结合态EPS的蛋白含量始终高于对照组。本研究构建了隐秘小环藻与细菌的共生体系,探究了藻菌之间的互作效应,可为隐秘小环藻的规模化生产提供参考。

中国毛虾活性肽对免疫抑制小鼠免疫调节作用的影响

本文以毛虾为原料,采用蛋白酶酶解获得毛虾活性肽,通过建立免疫抑制小鼠模型探究了毛虾活性肽对免疫抑制小鼠的免疫调节功能。小鼠随机分为六组:正常对照组、模型组、阳性对照组以及低、中、高剂量组,其中剂量组分别灌胃0.25 g·kg^(-1)BW、0.5 g·kg^(-1)BW、1.0 g·kg^(-1)BW毛虾活性肽。结果表明,剂量组免疫抑制小鼠体重明显增加(P<0.05),免疫器官指数中的胸腺指数显著提高(P<0.05),此外,毛虾活性肽还促进了小鼠血清中免疫球蛋白(IgA、IgG和IgM)以及细胞因子(IL-2、IL-6和TNF-α)水平的提升(P<0.05),外周血白细胞总数基本恢复至正常水平,NK细胞活性也显著增强(P<0.05)。综上,毛虾活性肽具有改善免疫抑制剂导致的免疫功能损伤,增强免疫抑制小鼠免疫调节的作用。

超声对高浓度大豆分离蛋白结构和酶解产物抗氧化活性的影响

本文探究超声技术对高浓度大豆分离蛋白(soybean protein isolate,SPI)结构及其酶解产物抗氧化活性的影响。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、傅里叶变换红外光谱、荧光光谱和荧光探针分析超声对高浓度下大豆分离蛋白分子结构的影响,以及对酶解产物中多肽含量和分子量、游离氨基酸组成及抗氧化活性的影响。结果表明,在一定超声条件下,SPI一级结构不变,但高浓度(16%)SPI经超声处理后会引起蛋白其他结构特性的改变。二级结构中β-折叠含量增加,α-螺旋含量减少;内源荧光发射波长发生了明显红移,表面疏水性显著(P<0.05)增加,进而影响超声对SPI酶解效果。随着SPI浓度增加,与未超声相比,超声处理提高了酶解产物中多肽含量,当浓度16%时,多肽含量最高达84.27%,且浓度8%~16%时,分子量为200~2000 Da多肽占比增加。此外,超声处理显著(P<0.05)提高了SPI酶解产物中游离疏水性氨基酸的含量,并且当浓度16%时,酶解产物的DPPH自由基清除率、羟自由基清除率显著(P<0.05)提升,还原能力明显增强,表现出更高地抗氧化活性。可见,超声处理对高浓度SPI的改性效果有助于制备具有高抗氧化活性酶解产物,在制备多肽方面具有良好应用前景。

文氏马齿苋汤对急性湿疹小鼠血清IgE、IL-2和IL-5的影响

目的:通过观察文氏马齿苋汤对急性湿疹模型小鼠血清IgE、IL-2和IL-5水平的影响,为其治疗急性湿疹提供实验依据。方法:36只Balb/c雄性小鼠随机分为空白组、模型组、龙胆泻肝丸组和文氏马齿苋汤高、中、低剂量组,采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)丙酮-橄榄油液激发小鼠急性湿疹,然后给予各组小鼠相应药物治疗7 d。疗程结束后采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组IgE、IL-2和IL-5水平。结果:与空白组比较,文氏马齿苋汤各剂量组急性湿疹小鼠皮损均有所好转,表现在仅肉眼可见少量红斑、痂壳、鳞屑,其中文氏马齿苋汤高、中剂量组最为明显,且能不同程度降低血清IgE,IL-2和IL-5水平(P<0.05,P<0.01)。与龙胆泻肝丸组比较,文氏马齿苋汤中剂量组IgE表达更低(P<0.05),文氏马齿苋汤高剂量组IL-2水平明显降低(P<0.05),文氏马齿苋汤中、低剂量组IL-5表达水平显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论:文氏马齿苋汤能显著降低急性湿疹模型小鼠血清IgE、IL-2、IL-5水平,同时减轻皮损红斑、水肿、渗出等症状。

中性脂含量高的微拟球藻藻株的快速筛选

微拟球藻(Nannochloropsis oceanica)生长速度快、油脂含量高,已成为生产生物柴油的理想材料。为获得中性脂产率高的藻株,本研究从染色时间和染色浓度两个方面优化了尼罗红染色测定中性脂含量的方法,对不同育种方法得到的75株微拟球藻藻株的产油能力进行了评价。采用优化后的染色条件(尼罗红浓度1 mg/mL,染色时间10 min),测定了第9天微藻的中性脂相对含量及对应的生物量,获得藻株中性脂的相对产率。研究表明,与原始藻株相比,088号转基因藻株相对产率为252.16%,甲基磺酸乙酯(EMS)诱变藻株101号相对产率为259.02%,亚硝基胍(NTG)诱变藻株231号相对产率为323.84%。本研究获得了3株中性脂产率高的微拟球藻藻株,这3株藻株有望应用于生物柴油的生产,研究结果可为高油脂含量微藻的快速筛选提供参考。

中国毛虾自溶前后多肽和氨基酸的变化

目的:为开发毛虾小分子生物活性肽和氨基酸类产品提供依据。方法:测定毛虾内源蛋白酶的pH和温度,分析自溶前后产物中多肽、氨基酸和分子量的变化。结果:内源蛋白酶的最适温度为45℃,最适pH为8.0,该条件下反应4 h后,多肽质量浓度为10.36 mg/mL;总游离氨基酸、必需氨基酸以及疏水性氨基酸含量提升,苦味氨基酸占比增加了(4.54±0.02)%,而鲜味氨基酸和甜味氨基酸占比分别降低了(3.46±0.02)%和(1.78±0.01)%;降解产物分子量<1000 Da的占比由70%提升至87%。结论:自溶技术能降解中国毛虾蛋白并释放小分子肽和氨基酸。

基于COMSOL的圆纬机电磁选针器特性分析

针对现有电磁选针器长时间工作存在发热及电磁力降低等问题,提出一种基于COMSOL的电磁热耦合仿真方案。通过COMSOL多物理场耦合能力对短时间内电磁热耦合进行仿真,得出电磁选针器各发热部分平均时间损耗并将其作为热源,然后利用温度场进行单物理场仿真,得到长时间工作状态下电磁选针器温升曲线。最后通过对脉冲电压脉宽、塑料骨架结构、线圈匝数、外部冷却条件等参数进行调整,优化电磁选针器发热状况,并增强选针器电磁力等性能。仿真结果表明,磁保持电磁选针器正常工作下饱和温升约20.00℃,经优化后,温升下降约5.81%,同时电磁力也有一定提升。

垃圾桶提升机结构改进与控制系统设计

为了满足厨余垃圾处理设备的工作需求,对厨余垃圾处理设备中垃圾桶提升机进行结构优化与控制系统设计,设计了基于三菱控制器的垃圾桶提升机。通过SolidWorks软件对提升机结构进行设计、建模和改进;进行受力分析和液压缸的选型计算;通过ANSYS Workbench软件对液压缸进行静力学分析;设计提升机的电气与液压控制系统;最后对改进前后的提升机进行对比实验。结果表明:改进后的提升机经过计算和安全校核,与厨余垃圾处理设备集成到一个控制器上进行控制,工作稳定、可靠;单人操作平均耗时较改进前减少9 s左右,大大提高了厨余垃圾处理设备的工作效率。

微小RNA-92a调控音猥因子途径对心肌缺血再灌注损伤后促血管再生的影响及机制

目的探究微小RNA-92a(miR-92a)调控音猥因子(SHH)途径对心肌缺血再灌注(I/R)损伤后促血管再生的影响及机制。方法从1~3d龄SD大鼠中培养原代心肌细胞后建立心肌细胞缺氧/复氧模型,将其分成心肌细胞常氧培养组和心肌细胞I/R组。miR-92a模拟物(mimic)和拮抗剂(inhibitor)转染入大鼠原代心肌细胞,使miR-92a过表达或低表达,分成对照组、I/R组、miR-92amimic组和miR-92ainhibitor组。细胞计数法8测定各组细胞活力,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,ELISA和QT-PCR测定血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和血管生成素1等血管新生因子表达,Westernblot法测定SHH信号通路蛋白表达。结果心肌细胞I/R组miR-92a表达显著高于心肌细胞常氧培养组(3.89±0.29vs1.53±0.19,P<0.01)。对照组、miR-92ainhibitor组、I/R组和miR-92amimic组SHH蛋白(0.57±0.13vs0.51±0.11vs0.24±0.03vs0.14±0.02,P<0.01)、Smoothened蛋白(0.53±0.12vs0.49±0.10vs0.14±0.04vs0.09±0.01,P<0.01)、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(0.56±0.14vs0.50±0.13vs0.15±0.03vs0.08±0.01,P<0.01)和神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(0.58±0.11 vs0.49±0.12vs0.18±0.02vs0.11±0.03,P<0.01)比较差异有统计学意义。结论miR-92a在心肌I/R损伤中异常高表达,抑制miR-92a表达可激活SHH信号通路有效促进血管再生因子表达。

急性冠状动脉综合征发病机制的单细胞转录组生物信息学研究

目的利用单细胞转录组生物信息技术挖掘急性冠状动脉综合征(ACS)发病的潜在机制。方法从高通量基因表达数据库中下载ACS样本的单细胞转录组数据集GSE184073作为研究对象,利用R语言的Seurat数据包对数据进行过滤和标准化,将具有相似特征基因的细胞进行聚类和注释,筛选与ACS发病相关的细胞亚群,提取差异表达基因,对差异表达基因进行富集分析,挖掘ACS发病的潜在信号通路,下载GSE54977数据集,验证差异基因的表达并筛选ACS发病的核心基因,绘制受试者工作特征曲线评价核心基因预测ACS发病的价值。结果过滤获得ACS样本细胞1720个,稳定性心绞痛样本细胞1071个,共聚类成10个亚群,ACS样本中单核细胞占比高。筛选获得单核细胞相关的差异表达上调基因56个,差异表达下调基因56个。S100A8、S100A9、S100A12是ACS发病的核心基因。差异表达基因显著富集于肿瘤坏死因子α、核转录因子κB、炎性反应等信号通路。结论ACS与稳定性心绞痛样本细胞分布存在较大差异,单核细胞与急性冠状动脉综合征发病密切相关,是预防和治疗ACS的潜在靶细胞,S100A8、S100A9、S100A12是ACS发病的潜在核心基因。

湿热型脂溢性脱发中医研究进展

脂溢性脱发又称为雄性激素脱发,其中医辨证分型主要有血热风燥、湿热蕴结、肝肾不足等。各医家关于此病众说纷纭,但大多从脏腑辨证论治脂溢性脱发。该文主要通过归纳分析近年来与湿热型脂溢性脱发相关的研究,对湿热型脂溢性脱发病因病机、治疗方法、用药特色等进行总结综述。

内皮细胞特异性分子1在早期预测肠源性脓毒症急性呼吸窘迫综合征的价值

目的检测伴或不伴有急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的肠源性脓毒症患者外周血内皮细胞特异性分子1(Endocan)水平,探索其在诊断肠源性脓毒症是否并发ARDS的价值。方法选取2018年1月至2019年6月南京市中心医院、南京市鼓楼医院、江苏省中西医结合医院诊治的由于各种原因所致腹腔感染造成的肠源性脓毒症患者113例,其中未合并ARDS患者55例;确诊并发ARDS患者58例。纳入时获取患者外周静脉血,采用上转发光法检测血降钙素原(PCT)及血C反应蛋白(CRP),酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测Endocan,对比分析Endocan的价值。结果并发ARDS组患者Endocan水平低于未合并ARDS组患者(P<0.05),当患者血Endocan水平<5.36μg/L时,具有最好的诊断效率,敏感性为91%,特异性为85%。且受试者工作曲线下面积大于血CRP与PCT。结论Endocan可作为诊断肠源性脓毒症合并ARDS的检测指标。

盐度对隐秘小环藻生长、沉降及藻壳物理性质的影响

针对大规模培养硅藻过程中环境盐度变化问题,以隐秘小环藻(Cyclotella cryptica)为研究对象,在实验室条件下比较了不同盐度(5,10,20,30,40)培养条件对隐秘小环藻的生长、光合潜力、沉降、细胞大小及藻壳物理性质的影响。研究表明,隐秘小环藻能在广泛的盐度范围内生长,各盐度条件下最大相对生长率无显著差异,但光合潜力变化显著,生物量随培养环境盐度的增加而增大。与盐度5组相比,盐度40组的隐秘小环藻的细胞体积增加了1倍左右,藻壳的孔容和比表面积增加了2倍左右,沉降4 h后沉降率提高了76.4%。研究结果表明,高盐度引起的隐秘小环藻细胞体积增大和藻壳比表面积增加是导致该微藻快速沉降的主要因素。

一株富含多不饱和脂肪酸杜氏藻的鉴定和优化培养研究

筛选活性物质含量高、生长速度快、对温度、光照和盐度等环境变化适应能力强的藻株对微藻产业的发展具有重要意义。本研究从内蒙古哈马太湖分离纯化出一株绿藻,基于形态学、18S rDNA和5.8S rDNA部分序列特征鉴定其为Dunaliella sp.。对分离藻株的培养基种类、温度和盐度等环境因子进行优化和研究。研究表明:分离藻株的适宜培养基为Zarrouk培养基。在温度25℃、盐度20、光强200μmol/(m^(2)·s)和初始pH=9.3的条件下,分离藻株的总脂占藻株干质量的24.83%,不饱和脂肪酸占总脂肪酸的45.79%,其中亚麻酸和亚油酸分别占总脂肪酸的32.48%和8.05%。本研究可为在高光和较高pH条件下生产多不饱和脂肪酸(特别是α-亚麻酸)提供优良的候选藻株。

余承惠运用解毒法治疗慢性肾脏病皮肤瘙痒经验

余承惠主任医师对慢性肾脏病皮肤瘙痒症有独到的临床经验。将该病的病机概括为肾虚毒盛,强调肾气亏虚、湿毒蕴于肌肤是其发病的关键。辨证分为风阳挟毒、血瘀毒蕴、阴虚燥毒、湿毒走窜、禀赋畏毒五型。治疗上重视固护正气,强调解毒治法,善于辨证运用皮类中药,并结合中医外治法如足浴或油膏,临床疗效显著。

隐秘小环藻无菌化处理研究

为获得隐秘小环藻(Cyclotella cryptica)的无菌藻株,本研究开展了隐秘小环藻的药敏实验及抗生素耐受性实验,初步确定了除菌抗生素的种类及浓度,并对抗生素处理前后藻液的细菌多样性和群落结构进行了对比分析,在此基础上,设计了有效的抗生素组合进行除菌。研究表明,800μg·mL^(-1)硫酸卡那霉素、800μg·mL^(-1)硫酸链霉素、600μg·mL^(-1)硫酸庆大霉素抑菌效果较好且能够显著促进隐秘小环藻生长,采用以上三种抗生素的组合能去除藻液中大部分细菌,离心洗涤后,再追加25μg·mL^(-1)盐酸环丙沙星可去除残留的Muricauda菌,实现隐秘小环藻的无菌化培养。研究结果表明,在对微藻进行无菌化处理时,抗生素的种类、浓度和添加方式是获得无菌藻株的关键,研究结果可为微藻的无菌化处理提供参考。

改性蛭石对荧光染料吸附性能研究

以蛭石为原料,用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)改性蛭石,吡罗红和罗丹明B溶液模拟有机染料作为吸附研究对象,研究蛭石吸附性能。结果表明:改性蛭石对吡罗红和罗丹明B吸附率分别为67.1%和82.8%,然而蛭石对其几乎不吸附;动力学研究发现吡罗红和罗丹明B吸附基本符合拟二级动力学模型,属于化学性吸附控制过程;经过10次循环后对吡罗红和罗丹明B的再生率都在90%以上,表明改性蛭石具有优异的循环再生性能。

二氧化碳斜率和半乳糖凝集素-3在慢性心力衰竭心功能分级评估及心脏不良事件预测中的价值

目的分析二氧化碳斜率(VE/VCO2 slope)和半乳糖凝集素-3(Gal-3)在慢性心力衰竭(心衰)心功能分级评估及心脏不良事件预测中的价值,并探讨相关影响因素。方法选取2017年1月至2018年9月于济南市人民医院和济南市第四人民医院收治的138例慢性心衰(Ⅱ级22例、Ⅲ级69例和Ⅳ级47例)患者作为实验组,根据左室射血分数(LVEF)又可将其分为收缩性心衰(n=95)和舒张性心衰(n=43);选取同期与实验组性别、年龄及体质指数等一般资料无明显差异的50例健康体检者作为对照组。对所有研究对象进行VE/VCO2斜率和血清Gal-3检测,出院后随访90 d,记录心脏不良事件。比较不同分级和不同类型慢性心衰患者VE/VCO2斜率、血清Gal-3和主要心脏不良事件差异,并分析VE/VCO2斜率和血清Gal-3与心脏不良事件之间的关系,同时采用多因素Logistic回归分析探讨导致慢性心衰并发主要心脏不良事件的独立危险因素。结果与对照组比较,实验组VE/VCO2斜率和血清Gal-3增高,差异有统计学意义(P<0.05)。心功能分级不同,其VE/VCO2斜率、血清Gal-3和MACE发生率明显差异,有统计学意义(P<0.05),由小到大依次为心功能Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级。收缩性心衰VE/VCO2斜率、血清Gal-3和MACE发生率均高于舒张性心衰,差异有统计学意义(P<0.05)。经Spearman分析得知,VE/VCO2斜率、Gal-3与MACE之间均呈正相关(P<0.05),其R值分别为0.842和0.795。经多因素Logistic回归分析得知,NYHA心功能分级(Ⅲ级)、心衰类型(收缩性心衰)、VE/VCO2斜率和血清Gal-3是影响慢性心衰并发MACE的独立危险因素(P<0.05)。结论VE/VCO2斜率和Gal-3在不同类型和不同NYHA心功能分级慢性心衰中差异明显,是并发心脏不良事件的独立危险因素。

膜分离制备中国毛虾多肽及滋味评价

该文在前期酶解工艺优化条件的基础上对中国毛虾酶解液进行膜分离分级制备研究,将毛虾酶解液经过陶瓷膜、3000 Da超滤膜和150 Da纳滤膜多级过滤,得到毛虾截留液固形物回收率为(51.06±1.34)%,冷冻干燥得到多肽粉中总氮含量为(13.95±0.05)g/100g,多肽含量为(70.75±0.35)g/100g,游离氨基酸含量为(14.64±0.27)g/100g。以电子舌、疏水性指数和感官分析酶解液和膜分离组分的滋味特征,结果表明,酶解液经过膜分离后鲜味增加,酸味和咸味下降,疏水性指数下降,存在一定的苦味。该研究为中国毛虾多肽的制备方法和风味改善提供理论基础和技术支持,为低值毛虾酶法制备活性肽工业化生产和开发相关产品奠定基础。