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巯基丙酮酸硫基转移酶介导PI3K/AKT信号对急性胰腺炎细胞模型凋亡和自噬的影响
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作者 王小红 钱晶 +5 位作者 翁文俊 周国雄 朱顺星 祁小鸣 刘春 程睿智 《蚌埠医学院学报》 CAS 2024年第3期291-296,共6页
目的:研究巯基丙酮酸硫基转移酶(MPST)介导PI3K/AKT信号对急性胰腺炎(AP)细胞模型凋亡和自噬的影响。方法:构建AP体外细胞模型,分组为CON组、AP组、AP+siMPST组和AP+oeMPST组。采用CCK-8法检测细胞活力;采用ELISA法检测细胞上清炎症因子... 目的:研究巯基丙酮酸硫基转移酶(MPST)介导PI3K/AKT信号对急性胰腺炎(AP)细胞模型凋亡和自噬的影响。方法:构建AP体外细胞模型,分组为CON组、AP组、AP+siMPST组和AP+oeMPST组。采用CCK-8法检测细胞活力;采用ELISA法检测细胞上清炎症因子TNF-α、IL-1和IL-6水平;采用流式细胞仪检测细胞凋亡水平;采用Western blotting检测腺泡细胞LC3Ⅱ/Ⅰ、beclin1、ATG5、MPST、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的表达水平。结果:AP组、AP+siMPST组和AP+oeMPST组的细胞存活率均低于CON组(P<0.01),而细胞凋亡率则均高于CON组(P<0.01);AP+siMPST组细胞存活率、AP+oeMPST组细胞凋亡率均高于AP组(P<0.01),而AP+siMPST组细胞凋亡率、AP+oeMPST组细胞存活率均低于AP组(P<0.01)。AP组、AP+oeMPST组的腺泡细胞TNF-α、IL-1和IL-6、LC3Ⅱ/Ⅰ、beclin1、ATG5、MPST、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平明显高于CON组(P<0.01);上述指标水平AP+siMPST组均低于AP组(P<0.01),而AP+oeMPST组则均高于AP组(P<0.01)。结论:MPST可通过PI3K/AKT信号诱导胰腺腺泡细胞凋亡、自噬和炎症反应;抑制MPST可能对AP具有治疗意义。 展开更多
关键词 胰腺炎 巯基丙酮酸硫基转移酶 肠促胰酶肽 PI3K/AKT信号
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小鼠卵巢玻璃化冷冻原位移植后子代行为学评估 被引量:2
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作者 王生存 孙华 +5 位作者 李碧春 邵义祥 朱顺星 王庆华 高原 郭丰 《南通大学学报(医学版)》 2018年第3期161-165,共5页
目的 :建立小鼠卵巢玻璃化冷冻原位移植模型,通过对后代的行为学检测,探讨卵巢玻璃化冷冻的长期安全性。方法:选择8周龄的C57BL/6小鼠,将卵巢取出进行玻璃化冷冻,8周后复苏,同种异体原位移植,接受冷冻卵巢移植的母鼠通过自然交配所生后... 目的 :建立小鼠卵巢玻璃化冷冻原位移植模型,通过对后代的行为学检测,探讨卵巢玻璃化冷冻的长期安全性。方法:选择8周龄的C57BL/6小鼠,将卵巢取出进行玻璃化冷冻,8周后复苏,同种异体原位移植,接受冷冻卵巢移植的母鼠通过自然交配所生后代作为实验对象进行行为学检测,以正常C57BL/6小鼠为对照。结果:6项经典行为学测试结果显示,卵巢玻璃化冷冻复苏移植后出生的子代小鼠的行为学表现与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:卵巢玻璃化冷冻复苏原位移植可使受体母鼠恢复自然生育能力,其后代在行为学方面未见不良影响,是一种安全的生殖力保存方法。 展开更多
关键词 卵巢玻璃化冷冻 生育力保存 卵巢原位移植 行为学检测 C57BL/6小鼠
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含黄油的高脂饲料诱导高脂血症小鼠模型特征的研究 被引量:1
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作者 李静 杨俐萍 +3 位作者 朱顺星 邵晶晶 刘玉山 陈旭东 《实验动物科学》 2018年第6期41-46,共6页
目的建立富含牛奶制品黄油饮食诱导小鼠高脂模型,观察和分析其高脂血症的特征。方法选择同窝雄性C57BL/6小鼠20只,随机分成2组,每组各10只。一组小鼠喂养普通饲粮(不含黄油),设为对照组,另一组小鼠喂养添加黄油的高脂饲粮,设为高脂组。... 目的建立富含牛奶制品黄油饮食诱导小鼠高脂模型,观察和分析其高脂血症的特征。方法选择同窝雄性C57BL/6小鼠20只,随机分成2组,每组各10只。一组小鼠喂养普通饲粮(不含黄油),设为对照组,另一组小鼠喂养添加黄油的高脂饲粮,设为高脂组。实验期为120 d,动态检测小鼠体质量、血脂及体脂的变化,观察肝脏组织病理学变化。结果 1)造模120 d,与对照组小鼠相比,高脂组小鼠体质量及血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)量明显增加(P<0.001),而血清总甘油三酯(TG)量无明显差异;(2)与对照组小鼠相比,高脂组小鼠腹部脂肪及肝脏质量系数显著增加(P<0.001);(3)高脂组小鼠肝脏出现严重的脂肪变性及炎性细胞浸润。结论含有黄油饲料喂养形成的小鼠高脂模型出现血中总胆固醇明显改变,而总甘油三酯无明显变化的特征,提示牛奶制品黄油在饮食诱导的单纯高胆固醇血症动物模型中起着重要的作用。 展开更多
关键词 高胆固醇血症 动脉粥样硬化 动物高脂模型 黄油 脂肪肝
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B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞生长曲线及HSP70表达研究 被引量:2
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作者 姬桂青 邱天 +2 位作者 景瑾 朱顺星 邵义祥 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期99-106,共8页
目的探索B6-Co小鼠与正常C57BL/6小鼠眼睑成纤维细胞增殖能力与HSP70蛋白表达的差异。方法C57BL/6(B6)小鼠按雌雄小鼠2∶1的比例配种获取孕鼠;B6-Co小鼠按B6(雄)×B6-Co(雌)=1∶2或B6(雌)×B6-Co(雄)=2∶1比例配种获得孕鼠,取18... 目的探索B6-Co小鼠与正常C57BL/6小鼠眼睑成纤维细胞增殖能力与HSP70蛋白表达的差异。方法C57BL/6(B6)小鼠按雌雄小鼠2∶1的比例配种获取孕鼠;B6-Co小鼠按B6(雄)×B6-Co(雌)=1∶2或B6(雌)×B6-Co(雄)=2∶1比例配种获得孕鼠,取18.5 d的孕鼠腹中胚胎,再取胚胎眼睑组织培养小鼠眼睑成纤维细胞;用免疫荧光、HE染色鉴定原代细胞、观察成纤维细胞形态。根据血球计数板直接计数法观察两种细胞生长曲线的差异,用Real-time PCR和Western blot检测两种细胞中HSP70的表达量。体外构建HSP70基因siRNA干扰载体,Lipofectamin2000转染B6小鼠眼睑成纤维细胞;Real-time PCR和Western blot实验从mRNA和蛋白水平分别检测HSP70的相对表达量,测定其干扰效率;Transwell实验检测B6小鼠眼睑成纤维细胞的迁移能力。结果小鼠眼睑成纤维细胞生长曲线结果表明,B6-Co小鼠眼睑成纤维细胞增殖速度慢于B6小鼠眼睑成纤维细胞(P<0.01)。B6-Co小鼠成纤维细胞中HSP70表达量远远低于B6小鼠成纤维细胞,具有显著性差异。B6小鼠眼睑成纤维细胞转染HSP70 siRNA干扰载体后,siRNA-HSP70-3干扰效率最强,mRNA和蛋白水平均被有效抑制,干扰效率高达70%(P<0.05);siRNA-HSP70组在迁移能力上亦显著低于对照组(P<0.05)。结论HSP70基因及蛋白表达下调影响B6-Co的成纤维细胞生长曲线,构建的siRNA-HSP70-3干扰载体能够有效抑制B6小鼠眼睑成纤维细胞中HSP70基因的表达,并显著抑制细胞迁移。HSP70可能参与成纤维细胞胚胎期发育的调控,是造成其EOB表型的重要原因之一。 展开更多
关键词 眼睑成纤维细胞 HSP70 C57BL/6 B6-Co 迁移
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Detection of ECTV,MHV and SV in Clean-grade Mice and Rats in East China 被引量:1
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作者 Song Hongyan Dong Ronglian +6 位作者 Qiu Baofeng Jing Jin Gu Bingquan Shao Yixiang Liu Chun zhu shunxing Wu Liucheng 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2017年第1期41-43,共3页
To study the epidemic status of Ectromelia virus ( ECTV), Mouse hepatitis virus (MHV) and Sendai virus (SV) in clean-grade experimental mice and rats in East China, 30 individuals of ICR and/or C57BL/6 mice and ... To study the epidemic status of Ectromelia virus ( ECTV), Mouse hepatitis virus (MHV) and Sendai virus (SV) in clean-grade experimental mice and rats in East China, 30 individuals of ICR and/or C57BL/6 mice and 15 individuals of SD or Wistar rats were purchased from four major experimental animal supply bases in East China. Blood samples were collected by eyeball picking method, and serum was separated. ECTV, MHV and SV serum antibodies in mice were de- teeted using imported commercial ELISA kits. Since rats were not easily infected by MHV and SV, only the ECTV serum antibody was detected in rats. Survey re- suits revealed that clean-grade experimental mice and rats derived from three out of four major experimental animal supply bases were negative in detection, but the positive rates of MHV and SV serum antibody in clean-grade ICR mice in one supply base were 56.7% and 100.0%, respectively, while the positive rate of MHV serum antibody in C57BL/6 mice was 100%. Research results showed that most of the commercial experimental mice and rats in major experimental animal supply bases in East China were qualified in detection of above three kinds of diseases, but MHV and SV still existed in individual base, with severe infection status. Thus, active measures must be strengthened to purify mice and rats. Meanwhile, monitoring of mouse and rat diseases must be developed seriously to guarantee the quality of experimental mice and rats, so as to avoid adveme impacts on breeding and use of experimental rats and miee. 展开更多
关键词 East China MOUSE RAT Epidemiological survey
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肠衣传统和新型腌制技术研究及应用进展 被引量:1
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作者 宋鸿雁 仇保丰 +3 位作者 高雪梅 刘文斌 朱顺星 刘春 《中国动物检疫》 CAS 2021年第5期64-71,共8页
我国是世界肠衣出口大国。为使国内腌制肠衣企业全面了解国际肠衣腌制工艺更新动态,及时跟踪相关机构的科研方向及研究进展,本文综述了传统氯化钠(NaCl)腌制肠衣技术和新型磷酸盐补充干盐(P-salt)腌制肠衣技术的研究背景、最新进展及其... 我国是世界肠衣出口大国。为使国内腌制肠衣企业全面了解国际肠衣腌制工艺更新动态,及时跟踪相关机构的科研方向及研究进展,本文综述了传统氯化钠(NaCl)腌制肠衣技术和新型磷酸盐补充干盐(P-salt)腌制肠衣技术的研究背景、最新进展及其应用范围,介绍了国外更新肠衣加工工艺的操作模式。NaCl腌制技术一直是肠衣防腐杀菌和常温保存的主要方法,目前国际贸易中绝大多数半成品和成品肠衣采用该技术处理。NaCl腌制技术的杀菌能力与腌制肠衣中的盐浓度即水活性、腌制温度和pH等多种因素联系紧密。P-salt腌制技术能显著提高肠衣的卫生状况和机械特性,既可显著提高肠衣灌注内容物时的润滑度,又能提高肠衣携带病毒的杀灭效果。一些相关研究成果已成为当前制定肠衣腌制处理工艺的重要依据。目前国内外的肠衣腌制技术已由单一的NaCl腌制技术,逐渐进入到传统NaCl腌制和新型P-salt腌制共存的局面,并大有向后者倾斜的趋势。本文为国内肠衣腌制技术的研究和储备提供了参考。 展开更多
关键词 肠衣 腌制技术 氯化钠 磷酸盐补充干盐
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国际贸易中涉及微生物的肠衣卫生安全新要求
7
作者 宋鸿雁 仇保丰 +4 位作者 高雪梅 蒋荧梅 王晓颖 朱顺星 刘文斌 《中国动物检疫》 CAS 2018年第9期67-71,共5页
肠衣在我国农产品出口中一直占有重要地位。近年来多个国家针对进口肠衣提出了涉及微生物的卫生安全新要求。由于我国肠衣加工出口企业对此缺乏了解和重视,致使在应对时非常被动且损失较大。本文根据我国肠衣主要出口国家和地区的分布情... 肠衣在我国农产品出口中一直占有重要地位。近年来多个国家针对进口肠衣提出了涉及微生物的卫生安全新要求。由于我国肠衣加工出口企业对此缺乏了解和重视,致使在应对时非常被动且损失较大。本文根据我国肠衣主要出口国家和地区的分布情况,结合多年来收集的肠衣进出口监督管理和科学研究文献资料,将世界动物卫生组织、欧盟、美国、日本和韩国等组织或国家涉及微生物的肠衣卫生安全新规定和新要求进行了梳理和总结,以期为我国肠衣加工出口企业提供第一手参考资料。 展开更多
关键词 肠衣 微生物 国际贸易 安全 卫生
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冷冻原肠中细菌基因组DNA提取方法的建立
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作者 宋鸿雁 仇保丰 +4 位作者 高雪梅 刘春 刘文斌 朱顺星 邵义祥 《中国动物检疫》 CAS 2020年第2期87-93,共7页
为建立冷冻原肠中细菌基因组DNA的直接提取法,采用震荡洗脱、金属网过滤和梯度离心相结合的方法,对2份冷冻原肠样品进行前处理;对经前处理后的原肠样品,采用酚/氯仿法提取细菌基因组DNA,然后进行琼脂糖电泳和OD260/OD280比值测定;以细... 为建立冷冻原肠中细菌基因组DNA的直接提取法,采用震荡洗脱、金属网过滤和梯度离心相结合的方法,对2份冷冻原肠样品进行前处理;对经前处理后的原肠样品,采用酚/氯仿法提取细菌基因组DNA,然后进行琼脂糖电泳和OD260/OD280比值测定;以细菌基因组DNA为模板,用PCR技术扩增细菌16S rDNA并构建克隆文库,并从2个文库中各随机挑取3个菌落进行16S rDNA的PCR鉴定和DNA测序。结果显示:样品提取的DNA浓度、纯度较高,OD260/OD280比值介于1.8~2.0;挑取的6个菌落中,1个为阴性,剩余5个为阳性,为肠球菌属(Enterococcus)和魏斯氏菌属(Weissella)的5种细菌。结果表明,本研究提取的原肠细菌基因组DNA质量较好,可用于非培养法研究冷冻原肠中细菌的多样性。本研究解决了因缺乏原肠细菌基因组DNA提取方法,无法进一步应用现代分子生物学方法研究冷冻原肠细菌的多样性、菌群组成结构和动态变化等难题。 展开更多
关键词 冷冻原肠 细菌 细菌基因组DNA 提取方法
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Therapeutic effects of salidroside vs pyrrolidine dithiocarbamate against severe acute pancreatitis in rats 被引量:3
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作者 QIAN Jing WANG Xiaohong +3 位作者 WEI Benzhong ZHOU Guoxiong zhu shunxing LIU Chun 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CSCD 2022年第1期49-57,共9页
OBJECTIVE:To evaluate the therapeutic effectiveness of salidroside(Sal)and pyrrolidine dithiocarbamate(PDTC)against severe acute pancreatitis(SAP)in a rat model.METHODS:Rat models of SAP were established by retrograde... OBJECTIVE:To evaluate the therapeutic effectiveness of salidroside(Sal)and pyrrolidine dithiocarbamate(PDTC)against severe acute pancreatitis(SAP)in a rat model.METHODS:Rat models of SAP were established by retrograde infusion of sodium taurocholate solution.SAP rats were randomly divided into 6 groups:SAP 3 h group,SAP 24 h group,low-dose Sal treatment group(Sal L+S),middle-dose Sal treatment group(Sal M+S),high-dose Sal treatment group(Sal H+S)and PDTC treatment group(PDTC+S).The serum amylase,tumor necrosis factor-α(TNF-α),interleukin-1β(IL-1β)and interleukin-10(IL-10)levels were determined by optical turbidimetry and enzyme-linked immunosorbent assay.The expression of Beclin-1,microtubule-associated protein light chain 3Ⅱ(LC3Ⅱ),lysosome associated membrane protein 2(LAMP2),interleukin-1 receptor associated kinase 1(IRAK1),inhibitorαof nuclear transcription factor-κB(IκBα),nuclear transcription factor-κB 65(p65)in the pancreas tissues were detected by quantitative real-time polymerase chain reaction and Western blot,while the pIκBαand p-p65 levels were detected by Western blot.Pathological changes of the pancreas and all the other indexes were observed at 3 and 24 h after operation.RESULTS:The serum IL-10 level,IκBαand LAMP2 levels in Sal M+S,Sal H+S and PDTC+S groups were higher than those in SAP 24 h group,while all the other indexes in these three groups were all lower significantly than those in SAP 24 h group.There was no significant difference in all indexes between Sal H+S and PDTC+S groups.CONCLUSION:High-dose Sal has an effectively therapeutic effect on SAP in rats,which was similar to PDTC. 展开更多
关键词 rhodioloside PYRROLIDINES ethylenebis(dithiocarbamates) PANCREATITIS AUTOPHAGY NF-kappa B signal transduction
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