姜酮对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响

目的:探究姜酮对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响。方法:HUVECs经不同浓度的姜酮(0,5,25,50,125,250μmol·L-1)处理24 h后再用LPS(100 ng·ml^(-1))刺激12 h,之后利用CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力并选定合适的姜酮浓度进行后续实验;将HUVECs随机分为4组:对照组;姜酮组(50μmol·L-1);LPS组(100 ngl·ml^(-1));LPS+姜酮组(100 ng·ml-1+50μmol·L-1)。通过实时荧光定量PCR检测各组细胞的炎症细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)]的m RNA表达水平;利用2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)探针对细胞活性氧类(ROS)水平进行检测;采用原位末端缺口标记法(Tunel)对细胞凋亡水平进行检测。结果:不同浓度的姜酮对HUVECs的存活率无明显差异(P>0.05),而姜酮预处理可逆转LPS刺激导致的存活率下降,其中50,125,250μmol·L^(-1)浓度组差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,LPS组的IL-1、IL-6、TNF-α m RNA水平、ROS水平、细胞凋亡数目显著升高(P<0.05)。姜酮预处理后可以抑制LPS诱导的HUVECs炎性反应,改善氧化应激水平,减少细胞凋亡数目(P<0.05)。结论:姜酮对LPS诱导的HUVECs损伤具有保护作用,且其保护作用可能与减少炎性因子表达、抑制氧化应激、减少细胞凋亡数目有关。

可视化血红素加氧酶-1小鼠模型用于药物肝毒性评价

目的建立实时动态监测药物肝毒性小鼠模型,用于药物肝毒性临床前评价。方法通过水动力高压转染法将表达萤火虫荧光素酶的血红素加氧酶-1(HO-1)报告基因质粒转染到小鼠肝细胞中,建立HO-1-Luc小鼠模型。使用HO-1-Luc小鼠模型动态监测对乙酰氨基酚(APAP)导致的肝损伤以及抗氧化剂谷胱甘肽对药物性肝损伤的治疗效果。结果使用HO-1-Luc小鼠模型通过活体荧光成像的手段能监测到APAP引起的肝毒性,与通过活性氧相关标志物、转氨酶以及组织病理学等经典肝毒性检测手段得到的结果吻合。同时该小鼠模型能够监测到谷胱甘肽对APAP诱导的肝毒性保护作用。结论建立的HO-1-Luc小鼠模型在药物临床前肝毒性评价中具有潜在应用价值。