发酵葡萄酒中菌种的分离鉴定及糖类耐受性的探究

通过分离安徽阜阳葡天下所产的葡萄中的菌株来获得更适合该地区气候的菌株,为该地葡萄酒的优化提供相关理论依据。方法:分离纯化培养和测定其生长速度与理化性质来筛选出菌株,比较其中的形态特点和分子生物学特点来确定该菌株所属种属。结果表明:分离纯化获得8株菌株,选择其中生长速度较快,且理化性质不同的2种菌株进行形态和分子生物学鉴定,确定其分别为Sporidiobolus pararoseus和Papiliotrema flavescens。

Slc9a1基因在小鼠植入前胚胎发育过程中的作用研究

大量研究表明NHE1(Na^(+)/H^(+)exchanger 1)在肿瘤细胞增殖和凋亡过程中发挥重要作用,但其在植入前胚胎发育过程中作用尚未明确的报道。为探究Slc9a1(NHE1)基因在植入前胚胎发育过程中的作用,本研究利用RNA干扰(RNAi)技术构建小鼠Slc9a1基因敲低胚胎模型,重点研究了Slc9a1敲低对囊胚谱系分化、细胞增殖和细胞凋亡的影响。通过对谱系分化标志性分子Cdx2和Oct4的表达分析及p53和p21 mRNA水平的定量分析,结果发现Slc9a1通过影响囊胚的谱系分化、细胞周期和细胞凋亡参与早期胚胎发育。

植入前胚胎的短期酒精暴露对植入后胚胎发育的影响

哺乳动物的早期胚胎发育对胚胎着床以及胎儿的长期生长发育都具有决定性作用。酒精对胚胎发育可以产生严重影响,但现有研究主要集中于产前胎儿酒精暴露,对早期胚胎(植入前)酒精暴露关注较少。为进一步阐明酒精导致的胚胎的发育异常机理,本研究利用体外胚胎培养模型,重点研究了酒精暴露对囊胚细胞谱系的分化和胚胎植入的影响。通过对谱系分化标志性分子Cdx2和Oct-4的表达分析及酒精暴露后胚胎着床的分析,发现早期胚胎酒精暴露将严重影响囊胚的谱系分化,并损害胚胎的植入后发育和胎盘的形成状态。结果表明,早期胚胎酒精暴露会打破谱系分化,并严重影响胚胎植入后的宫内发育。

Dppa2基因启动子区Oct4结合位点突变对其活性的影响

目的:探讨Dppa2基因5'端启动子区Oct4结合位点突变对Dppa2基因启动子活性的影响。方法:PCR扩增包括Oct4结合位点的Dppa2基因5'端转录起始点上游-2439^+293 bp的启动子序列,片段长度为2732 bp。将该片段连接到p GL3-Basic载体,构建野生型p GL3-2439表达载体。采用定点突变法,将-1959^-1957位碱基的GCA突变成TAG,构建Oct4结合位点突变型p GL3-mo2439表达载体。用上述两种表达载体、PGL3-basic载体和Oct4表达载体分别瞬时转染HEK 293细胞。细胞培养48 h后,利用双荧光素酶报告系统测定各组细胞表达的荧光素酶的相对活性。结果:经琼脂糖凝胶电泳及测序鉴定,证实野生型(p GL3-2439)和突变型(p GL3-mo2439)载体构建成功。荧光素酶活性测定结果显示,转染Dapp2基因启动子野生型p GL3-2439表达载体的细胞组荧光素酶的相对活性为16.307,突变型p GL3-mo2439表达载体的细胞组荧光素酶的相对活性为10.634。Oct4结合位点突变后,Dppa2基因启动子区转录活性较野生型降低了35%。结论:Dppa2基因5'端启动子区-1959^-1957位的Oct4结合位点突变可能导致Dppa2基因启动子活性下降。